इलेक्ट्रोटैक्सिस परख: सी एलिगेंस में लोकोमोशन का निरीक्षण करने की एक विधि

- संवेदी उत्तेजनाओं के बिना, सी एलिगेंस आंदोलन आम तौर पर आगे होता है और रिवर्सल और टर्न से बाधित होता है -- यादृच्छिक पुनर्विन्यास युद्धाभ्यास जिसके परिणामस्वरूप दिशा में परिवर्तन होता है। सी एलिगेंस विद्युतीय होते हैं। यानी, वे विद्युत क्षेत्रों को समझ सकते हैं।

कीड़े के लोकोमोशन का अधिक सटीक रूप से निरीक्षण करने के लिए, जानवर को माइक्रोफ्लुइडिक डिवाइस में रखें और डीसी इलेक्ट्रिक फील्ड लागू करें। खेत की दिशा को उलट ें, और कीड़ा कैथोड की दिशा की ओर विपरीत रास्ता बदल जाएगा। एक बारी वर्तमान, एसी, और कीड़ा लागू करना बंद हो जाएगा । क्षेत्र की दिशा में बारी परिवर्तन कीड़ा न्यूरोमोटर सिस्टम अभिभूत, कीड़ा के स्थिरीकरण में जिसके परिणामस्वरूप । डीसी क्षेत्र को फिर से लागू किया जाएगा, और कीड़ा कैथोड की ओर आगे की गति फिर से शुरू होगा ।

निम्नलिखित उदाहरण प्रोटोकॉल में, हम एक माइक्रोफ्लुइडिक डिवाइस में इलेक्ट्रोटैक्सिस परख का प्रदर्शन करने वाला सेटअप देखेंगे।

- एक मॉनिटर से जुड़े एक घुड़सवार कैमरे के साथ एक माइक्रोस्कोप के एक जाइल-चल चरण पर बस इकट्ठे माइक्रो चैनल रखकर इस कदम की शुरुआत करें। माइक्रो-चैनल के इलेक्ट्रोड से बिजली की आपूर्ति को कनेक्ट करें।

इस बात की पुष्टि करने के बाद कि माइक्रो-चैनल का प्रतिरोध लगभग 0.6 मेगा-ओम है, माइक्रो-चैनल की आउटपुट ट्यूब को डिस्पोजेबल सिरिंज से अटैच करें। इसके बाद इनलेट ट्यूब के मुंह को M9 शारीरिक बफर में निलंबित नेमाटोड के समाधान में जलमग्न कर दें। सिरिंज के अंदर नकारात्मक दबाव डालें ताकि चैनल में तरल को एस्पिरेट किया जा सके।

जब इनलेट और आउटलेट ट्यूब दोनों भर रहे हैं, सिरिंज को डिस्कनेक्ट करें और हाइड्रो-स्टैटिक रूप से चैनल के केंद्र में एक कीड़ा रखने के लिए ट्यूब की सापेक्ष ऊंचाई को समायोजित करके प्रवाह में हेरफेर करें। फिर दोनों ट्यूबों को एक ही ऊंचाई पर फ्लैट रखें। इलेक्ट्रोटैक्सिस प्रयोग के दौरान कीड़ा के नमूने स्विच करते समय माइक्रो-चैनल के अंदर शून्य प्रवाह बनाए रखने के लिए, दोनों इनलेट ट्यूबों को एक ही ऊंचाई पर समतल करने के बाद, यदि अभी भी प्रवाह होता है तो ट्यूब की ऊंचाई के सापेक्ष एक दूसरे के सापेक्ष में छोटे समायोजन करते हैं।

- यदि हम कभी अनिश्चित हैं कि क्या प्रवाह वास्तव में शून्य है, तो हम विद्युत क्षेत्र की ध्रुवीयता को बदलकर कीड़ा के आंदोलन में एक उलट-फेर पैदा कर सकते हैं और फिर कीड़े के रैखिक वेग का मूल्यांकन कर सकते हैं क्योंकि यह चारों ओर मुड़ता है।

- अब, उचित वोल्टेज के लिए बिजली की आपूर्ति सेट करें। बिजली के सिग्नल को सक्रिय करें, और कीड़े को खेत में अनुकूलित करने के लिए एक मिनट के पूर्व-एक्सपोजर की अनुमति दें, जिस दौरान कीड़ा कैथोड की ओर बढ़ना शुरू कर देना चाहिए। जब मिनट बीत चुका है, रिकॉर्डिंग शुरू करें।

प्रयोग समाप्त होने पर, चैनल से सभी तरल और कीड़े निकाल दें। कक्ष को डी-आयनित पानी से कुल्ला करें और डिवाइस को सूखने के लिए 125 डिग्री सेल्सियस पर गर्म प्लेट पर छोड़ दें।