Encyclopedia of Experiments: Biology
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- Sin estímulos sensoriales, el movimiento C. elegans es generalmente hacia adelante y es interrumpido por reversiones y giros-- maniobras de reorientación aleatorias que resultan en un cambio de dirección. C. elegans son electrorreceptivos. es decir, pueden sentir campos eléctricos. Cuando se exponen a una corriente directa leve o CC, los gusanos se mueven en un camino recto e ininterrumpido en la dirección del electrodo negativo o catódico, un comportamiento llamado electrotaxis.
Para observar con mayor precisión la locomoción del gusano, coloque al animal en un dispositivo microfluídico y aplique un campo eléctrico de CC. Invierta la dirección del campo y el gusano girará en sentido contrario hacia la dirección del cátodo. Aplique una corriente alterna, AC y el gusano se detendrá.
En el siguiente protocolo de ejemplo, veremos una configuración que muestra un ensayo de electrotaxis en un dispositivo microfluídico.
- Comience este paso colocando el microcanal recién montado en una etapa móvil de un microscopio con una cámara montada conectada a un monitor.
Después de confirmar que la resistencia del microcanal es de alrededor de 0,6 mega-ohmios, conecte el tubo de salida del microcanal a una jeringa desechable.
Cuando los tubos de entrada y salida se llenan, desconecte la jeringa y manipule hidroestaxi el flujo ajustando la altura relativa del tubo para colocar un gusano en el centro del canal.
- Si alguna vez no estamos seguros de si el flujo es realmente cero, podemos inducir una inversión en el movimiento del gusano cambiando la polaridad del campo eléctrico y luego evaluando la velocidad lineal del gusano a medida que se da la vuelta.
- Ahora, ajuste la fuente de alimentación a la tensión adecuada. Active la señal eléctrica y deje que un minuto de preexposición para que el gusano se aclimata al campo, durante el cual el gusano debe comenzar a moverse hacia el cátodo. Cuando haya pasado el minuto, comience a grabar.
Cuando termine el experimento, retire todo el líquido y gusanos del canal. Enjuague la cámara con agua des-ionizada y deje el dispositivo en una placa caliente a 125 grados Celsius para secar.
