JoVE Science Education
Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
Using a Hemacytometer to Count Cells
  • 00:00Overview
  • 00:32Basic Hemacytometer Components
  • 01:49Basic Operation of the Hemacytometer
  • 03:26How to Count Cells
  • 06:21Determining Cell Viability
  • 07:57Applications
  • 09:53Summary

Uso de um hemacitômetro para contar células

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Overview

Muitos experimentos biomédicos requerem manipulação de uma quantidade conhecida de células, a fim de alcançar dados precisos, reprodutíveis e estatisticamente relevantes. Portanto, aprender a contar células é uma técnica particularmente essencial para qualquer cientista biomédico bem sucedido. A maneira mais comum de contar células é usando um hemacítmetro – um instrumento que carrega duas grades gravadas a laser, que ajudam na enumeração de uma célula aliquot sob um microscópio de luz simples. Esses dados podem então ser usados para extrapolar o número de células em amostras experimentais.

Este vídeo mostrará como: ajustar a concentração experimental da amostra para que você não esteja tentando contar muitas – ou poucas – células; como usar um hemacítômetro para contar uma pequena alíquota (~10 μl) de células; como determinar qual quadrante da grade laser hemacítômetro usar para contagem; como calcular o número total de células em sua amostra experimental, dependendo do qual quadrante foi utilizado; e como determinar a viabilidade de sua população celular experimental usando a exclusão azul trypan. Além disso, também são discutidas várias situações experimentais para as quais é necessária uma determinação confiável e precisa dos números de células, incluindo um exemplo usando um contador automatizado de células.

Procedure

A contagem de células é um passo importante em muitos ensaios baseados em células para determinar o número e a viabilidade da célula. Em geral, o objetivo da contagem é entender o quanto uma amostra de uma concentração celular desconhecida deve ser diluída para uso posterior. A ferramenta de laboratório mais comum para contar células é o hemacytómetro. O hemacítmetro é uma ferramenta de contagem que foi originalmente criada para contar células sanguíneas. No centro do hem…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Using a Hemacytometer to Count Cells. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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