Electroforesis del Gel de poli-acrilamida de sodio dodecil sulfato, o SDS-PAGE, es una técnica utilizada para separar mezclas de proteínas basadas en su tamaño y nada más. SDS, un detergente aniónico, se utiliza para producir una carga uniforme a lo largo de las proteínas que han sido linealizado. Primera carga en un gel hechos de poliacrilamida y aplicando un campo eléctrico sobre el gel, luego se separan proteínas SDS-revestida. El campo eléctrico actúa como la fuerza impulsora, dibujo las proteínas SDS cubierto hacia el ánodo con proteínas más grandes, más lentamente que las proteínas pequeñas. Para identificar las proteínas por tamaño, estándares de proteínas de tamaño conocido se cargan junto con las muestras y bajo las mismas condiciones.
Este video presenta una introducción a SDS-PAGE primero explicando la teoría detrás de él y más tarde demostrando su procedimiento paso a paso. Se discuten diversos parámetros experimentales, como la concentración de poliacrilamida y voltaje aplicado el gel. Aguas abajo como Coomassie y plata manchas se introducen los métodos y variaciones del método de tinción, como 2D electroforesis en gel se presentan.
Procedure
SDS-PAGE es una técnica utilizada por muchos investigadores para separar mezclas de proteínas por tamaño. Realización de esta técnica es un primer paso esencial para muchos métodos de análisis de proteínas, como el immunoblotting. Por sí mismo, es una herramienta útil en la evaluación de pureza y tamaño de la proteína. Para entender la técnica de SDS-PAGE, primero debe entender los componentes de su principio. SDS-PAGE es electroforesis del Gel de poli-acrilamida…