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用SDS-PAGE技术分离蛋白
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Overview
十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳，也称SDS-PAGE，是一种被广泛使用，仅根据分子量大小来分离蛋白质混合物的技术。 阴离子去污剂SDS，在变性的线性蛋白表面沿长度均匀分布使其带电。 将它们上样到聚丙烯酰胺凝胶后， 施加电压，这些表面覆盖SDS的蛋白将被分开。电场作为驱动力，牵引SDS结合的蛋白朝阳极移动，分子量大的蛋白将比小的蛋白移动慢。为了判断蛋白的大小，已知分子量大小的蛋白质标准也会和样品一起上样并在同等条件下跑胶。
本短片介绍SDS-PAGE技术, 首先将解释其背后的原理，然后演示每一步的操作过程。视频还将讨论实验中的各种参数，如聚丙烯酰胺浓度，和用于跑胶的电压。还会介绍电泳之后的考马斯亮蓝和银染色方法，以及其他电泳技术，如双向凝胶电泳。
Procedure
SDS-PAGE是一种被许多研究人员用来根据分子量大小分离蛋白质混合物的技术。成功完成该技术是如免疫杂交 等多种蛋白质分析方法的重要前提。而该技术本身也是一个用来测定蛋白质大小和纯度的有用工具。 要了解SDS-PAGE技术，首先要知道它的主要组成成分。SDS-PAGE是十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳的缩写。其中的第一部分SDS, 也就是十二烷基硫酸钠, 是一种阴离子去?…
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No conflicts of interest declared.
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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. Separating Protein with SDS-PAGE. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
