JoVE Science Education
Basic Methods in Cellular and Molecular Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology

The ELISA Method

00:00Overview
00:43ELISA: Components and Principles
04:03Running an ELISA
07:18Applications
09:53Summary

English العربية 中文 Nederlands Français Deutsch עברית Italiano 日本語 한국어 Português русский Español Türkçe

שיטת אליסה

English

Share

Overview

חיסון הקשור לאנזים (ELISA) מבוצע בדרך כלל כדי לזהות את הנוכחות ו/או הכמות של חלבון יעד של עניין בתוך מדגם ניסיוני. זיהוי חלבון היעד מתאפשר על ידי נוגדנים, מה להפוך את ELISA לחיסון. באמצעות סדרה של שלבי דגירה ושטיפה, נוגדנים אלה, המקושרים לעתים קרובות, או מצומדים, לאנזים, יזהו חלבון ציפוי בתחתית באר על צלחת microtiter. כאשר נחשף למצע, אנזים הקשור לנוגדנים יגרום לשינוי צבע, ובכך יציין את נוכחותו של חלבון העניין במדגם.

בסרטון זה, התיאוריה שמאחורי אופן העבודה של ELISAs מוסברת, כולל דיון בכריכה ראשונית ומשנית של נוגדנים וחשיבות חסימת צעדים. התיאוריה מלווה בפועל, ככל שהסרטון מתקדם להסבר על ההליך שלב אחר שלב. לבסוף, וריאציות של ELISA הסטנדרטי כגון כריך ו ELISAs תחרותי מוצגים, ויישומים בעולם האמיתי של שיטה זו, כגון בבדיקות הריון ללא מרשם מוסברים.

Procedure

ELISA, או חיסון הקשורים לאנזים, היא שיטה נפוצה לקביעת נוכחות או היעדר חלבון יעד ספציפי. באמצעות סדרה של שלבי כביסה וקשירה, נוגדן מצומד, או מקושר, לאנזים יזהה חלבון מטרה בתחתית צלחת 96-well. כאשר מצע נוסף לדגימה, תתרחש תגובה אנזימטית, שתגרום לשינוי צבע המאפשר זיהוי וכימות של חלבון היעד. <div …

Disclosures

No conflicts of interest declared.

Transcript

Cite This

JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. The ELISA Method. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

Related Videos

Applications