Un análisis enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA) se realiza generalmente para detectar la presencia o la cantidad de una proteína diana de interés dentro de una muestra experimental. Detección de la proteína Diana es hecha posible por los anticuerpos, que hacen el ELISA de un inmunoensayo. A través de una serie de incubación y de pasos de lavado, estos anticuerpos, que con frecuencia están vinculados, o conjugado, a una enzima, detecta proteína capa el fondo de un pozo en una placa de microtitulación. Cuando se expone a un sustrato, enzima anticuerpo causará un cambio de color, lo que indica la presencia de la proteína de interés en la muestra.
En este video, se explica la teoría detrás de cómo funcionan los ELISAs, incluyendo una discusión de tanto enlace con anticuerpos primarios y secundarios y la importancia de bloquear pasos. Teoría es seguida por la práctica, como el vídeo avanza a explicar el procedimiento paso a paso. Finalmente, las variaciones de la norma ELISA como el sándwich y Elisa competitiva son introducidas y reales aplicaciones de este método, tales como pruebas de embarazo de venta libre se explican.
Procedure
La ELISA o ensayo inmunoenzimático, es un método ampliamente utilizado para determinar la presencia o ausencia de una proteína objetivo específico. Través de una serie de pasos vinculantes y lavado, un anticuerpo conjugado, o ligado, a una enzima reconoce una proteína de la blanco en la parte inferior de una placa de 96 pocillos. Cuando se añade a la muestra de sustrato, se produce una reacción enzimática, provocando un cambio de color permite la identificación y cuantificación de la proteína…