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ELISA
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Overview
효소-연결된 면역흡소감 분석(ELISA)은 전형적으로 실험 샘플 내에서 관심있는 표적 단백질의 존재 및/또는 양을 검출하기 위해 수행됩니다. 표적 단백질의 검출은 ELISA를 면역 분석으로 만드는 항체에 의해 가능하게 된다. 일련의 인큐베이션 및 세척 단계를 통해, 자주 연결되거나 효소에 공주되는 이러한 항체는 마이크로티터 플레이트에 우물의 바닥을 코팅하는 단백질을 검출합니다. 기판에 노출되면, 항체 결합 효소는 색 변화를 일으켜 시료에 대한 관심 있는 단백질의 존재를 나타낸다.
이 비디오에서, ELISA작동 방법의 이론은 1 차 및 이차 항체 결합 둘 다의 토론 및 차단 단계의 중요성을 포함하여 설명됩니다. 비디오가 단계별 절차에 대한 설명으로 진행됨에 따라 이론은 연습에 뒤따릅니다. 마지막으로, 샌드위치와 경쟁적인 ELISA와 같은 표준 ELISA의 변형이 도입되고, 창구 판매 임신 검사와 같은 이 방법의 실제 응용 프로그램이 설명된다.
Procedure
상기 ELISA, 또는 효소-연결된 면역흡소벤트 분석법은, 특정 표적 단백질의 존재 또는 부재를 결정하는 널리 사용되는 방법입니다. 일련의 세척 및 결합 단계를 통해, 항체가 공주하거나 효소에 연결되어 96웰 플레이트의 바닥에 표적 단백질을 인식하게 된다. 기판이 시료에 첨가되면 효소 반응이 발생하여 표적 단백질의 식별 및 정량화를 허용하는 색 변화가 발생합니다. <div id="script_1"…
Disclosures
No conflicts of interest declared.
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ELISAEnzyme-linked Immunosorbent AssayTarget ProteinWashing And Binding StepsAntibody ConjugatedEnzyme-linked Antibody96-well PlateSubstrateEnzymatic ReactionColor ChangeIdentification And QuantificationEquipment And Reagents96-well Flat Bottom PlateExperimental SampleSpecific Target ProteinsPrimary AntibodyHigh Affinity BindingEpitopeUnlabeled AntibodyNonspecific Binding Sites
Cite This
JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. The ELISA Method. JoVE, Cambridge, MA, (2023).
