La transfection est la procédure d’insertion de matériel génétique, tel que l’ADN et l’ARN double brin, à l’intérieur de cellules mammifères. L’insertion d’ADN dans une cellule permet l’expression, ou la production, de protéines utilisant la propre machinerie des cellules, alors que l’insertion d’ARN dans une cellule est utilisée pour réguler vers le bas la production d’une protéine spécifique par l’arrêt de la traduction. Alors que le lieu d’action pour l’ARN transfecté est le cytoplasme, l’ADN doit être lui transporté jusqu’au noyau pour une transfection efficace. Là-bas, l’ADN peut être exprimé transitoirement pour une courte durée, ou devenir incorporé dans l’ADN génomique, où le changement est passé de cellule en cellule lors de la division.
Cette vidéo décrit les bases derrière la transfection chimique et introduit quelques uns des réactifs les plus utilisés, incluant les lipides chargés, les polymères et le phosphate de calcium. Chaque étape est décrite depuis la préparation des cellules pour la transfection jusqu’à l’analyse de l’efficacité de la transfection. De plus, la section sur les applications de cet article-vidéo décrit l’utilisation de l’électroporation et une transfection biolostique comme méthode alternative pour l’introduction d’acide nucléique dans les cellules mammifères. Elle décrit également une utilisation avancée de la transfection où la co-transfection d’ARN interférent et d’ADN sont introduits comme un moyen pour réguler vers le bas une protéine produite naturellement pendant qu’au même moment une variante mutante de celle-ci est produite à l’intérieur de la même cellule.
