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Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
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JoVE Science Education Basic Methods in Cellular and Molecular Biology
An Introduction to Transfection
  • 00:00An Introduction to Transfection
  • 01:26Principal Components of Transfection
  • 04:26The Transfection Procedure
  • 05:36Applications
  • 07:17Summary

Introduction à la transfection

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Overview

La transfection est la procédure d’insertion de matériel génétique, tel que l’ADN et l’ARN double brin, à l’intérieur de cellules mammifères. L’insertion d’ADN dans une cellule permet l’expression, ou la production, de protéines utilisant la propre machinerie des cellules, alors que l’insertion d’ARN dans une cellule est utilisée pour réguler vers le bas la production d’une protéine spécifique par l’arrêt de la traduction. Alors que le lieu d’action pour l’ARN transfecté est le cytoplasme, l’ADN doit être lui transporté jusqu’au noyau pour une transfection efficace. Là-bas, l’ADN peut être exprimé transitoirement pour une courte durée, ou devenir incorporé dans l’ADN génomique, où le changement est passé de cellule en cellule lors de la division.

Cette vidéo décrit les bases derrière la transfection chimique et introduit quelques uns des réactifs les plus utilisés, incluant les lipides chargés, les polymères et le phosphate de calcium. Chaque étape est décrite depuis la préparation des cellules pour la transfection jusqu’à l’analyse de l’efficacité de la transfection. De plus, la section sur les applications de cet article-vidéo décrit l’utilisation de l’électroporation et une transfection biolostique comme méthode alternative pour l’introduction d’acide nucléique dans les cellules mammifères. Elle décrit également une utilisation avancée de la transfection où la co-transfection d’ARN interférent et d’ADN sont introduits comme un moyen pour réguler vers le bas une protéine produite naturellement pendant qu’au même moment une variante mutante de celle-ci est produite à l’intérieur de la même cellule.

Procedure

La transfection est le processus d’insertion de matériel génétique, tel que l’ADN et l’ARN double brin, dans des cellules mammifères. L’insertion d’ADN autorise l’expresssion, ou production, de protéines utilisant la propre machinerie des cellules. Alors que l’insertion d’ARN double brin est utilisée pour arrêter la production d’une protéine spécifique par l’arrêt de la traduction. Cet outil puissant a permis aux chercheurs une meilleure étude des fonctions et expressions des gènes, de la fonction des protéin…

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No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. An Introduction to Transfection. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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