Uma das principais vantagens de trabalhar com zebrafish (Danio rerio) é que sua genética pode ser facilmente manipulada pela microinjeção de embriões em estágio inicial. Usando esta técnica, soluções contendo material genético ou construtos de knockdown são entregues nos blastomeres: as células embrionárias sentadas no topo da gema do óvulo recém-fertilizado. A entrega no citoplasma é obtida através da injeção direta no blastomere, ou através de movimentos citoplasmáticos naturais que ocorrem após uma solução ser injetada na gema. Manipulações genéticas bem sucedidas são geralmente seguidas pela quantificação de fenótipos embrionários a fim de elucidar os mecanismos genéticos de desenvolvimento.

Este vídeo fornecerá uma introdução à realização de microinjeções em embriões de zebrafish. A discussão começa com uma revisão das ferramentas essenciais para a técnica, incluindo o aparelho de injeção e o microinjetor, que controla o movimento do fluido com pulsos de pressão do ar. Em seguida, são demonstrados importantes passos preparatórios, como o derramamento de placas de ágar para estabilizar embriões durante a injeção e calibração do aparelho de microinjeção. O procedimento de injeção é então apresentado juntamente com dicas sobre quando e onde as injeções devem ser realizadas. Finalmente, são discutidas aplicações da técnica de microinjeção, incluindo superexpressão genética via injeção de mRNA, silenciamento genético por meio da entrega de oligonucleotídeos de morfolino antiscenos e a geração de zebrafish transgênicos usando DNA plasmídeo especialmente projetado.