L’un des principaux avantages à travailler avec le poisson zèbre (Danio rerio), c’est que leur génétique peut être facilement manipulée par micro-injection des jeunes embryons. Grâce à cette technique, les solutions contenant du matériel génétique ou des séquences nucléotidiques pour l’inactivation génétique «knockdown» sont livrées dans les blastomères: les cellules embryonnaires adjacentes au sac vitellin d’un œuf nouvellement fécondé. L’administration dans le cytoplasme est possible soit par injection directe dans le blastomère, soit par l’intermédiaire des mouvements cytoplasmiques naturels qui se produisent après l’injection d’une solution dans le sac vitellin. Les manipulations génétiques qui réussissent sont généralement suivies par la quantification des phénotypes embryonnaires afin d’élucider les mécanismes génétiques du développement.

Cette vidéo fournit une introduction à la réalisation de micro-injections dans les embryons de poisson zèbre. La vidéo commence par une revue des outils essentiels pour la technique, y compris le dispositif d’injection et le micro-injecteur, qui contrôle le mouvement de la solution avec des changements de pression d’air. Ensuite, des étapes préparatoires importantes sont mises en évidence, comme la coulée d’agarose pour stabiliser les embryons durant l’injection et la calibration de l’appareil de micro-injection. La procédure d’injection est alors présentée ainsi que des conseils sur quand et où les injections doivent être effectuées. Finalement, les utilisations de la technique de micro-injection sont décrites, y compris la surexpression de gènes par l’intermédiaire d’ARNm injecté, l’inactivation de gènes par la livraison d’oligonucléotides antisens morpholino, et la génération d’un poisson zèbre transgénique en utilisant de l’ADN plasmidique spécialement conçu.