Análise do ciclo celular

O ciclo celular refere-se ao conjunto de eventos através dos quais uma célula cresce, replica seu genoma e, finalmente, se divide em duas células filhas através do processo de mitose. Como a quantidade de DNA em uma célula mostra mudanças características ao longo do ciclo, técnicas conhecidas como análise do ciclo celular podem ser usadas para separar uma população de células de acordo com as diferentes fases do ciclo celular em que estão, com base em seu conteúdo de DNA variado.

Este vídeo cobrirá os princípios por trás da análise do ciclo celular através da coloração de DNA. Revisaremos um protocolo generalizado para a realização desta coloração usando bromodeoxyuridina (BrdU, um análogo de timina que é incorporado em fios de DNA recém-sintetizados) e iodeto de propidium (PI, um corante de DNA que mancha todo o DNA), seguido pela análise das células manchadas com citometria de fluxo. Durante a citometria de fluxo, uma única suspensão celular de células fluorescentes rotuladas é passada através de um instrumento com um raio laser e a fluorescência de cada célula é lida. Em seguida, discutiremos como interpretar dados a partir de gráficos de dispersão citométrica de fluxo e, finalmente, olharemos para algumas aplicações dessa técnica.