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FM Dyes in Vesicle Recycling
  • 00:00Overview
  • 01:07Biochemistry of FM Dyes
  • 03:37General Protocol for Examining Vesicle Recycling
  • 06:03Applications
  • 08:06Summary

Corantes FM na Reciclagem de Vesículas

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Overview

Os corantes FM são uma classe de moléculas fluorescentes que tem encontrado importante uso no estudo do processo de reciclagem de vesículas. Em virtude de uma estrutura química, essas moléculas podem inserir-se no folheto externo das membranas bicamadas fosfolipídicas. Após a inserção da membrana, eles são internalizados na célula através de vesículas endocitadas, e liberados quando essas vesículas reciclam de volta para a membrana. Uma vez que esses corantes fluorescem fortemente no ambiente hidrofóbico dentro das membranas e fracamente no compartimento extracelular, os níveis de fluorescência FM podem ser usados para rastrear a atividade vesicular durante todo o processo de reciclagem.

Este vídeo fornece uma introdução ao uso de corantes FM em experimentos destinados a examinar a reciclagem de vesículas. Primeiro revisamos a bioquímica dos corantes FM e como suas propriedades permitem seu uso nesses experimentos. Em seguida, passamos por um protocolo geral para o uso de corantes FM em tais estudos e, finalmente, discutimos algumas pesquisas recentes que fazem uso dessas moléculas únicas.

Procedure

Corantes FM são corantes de membrana que são amplamente utilizados para a reciclagem de vesículas de imagem. Este é o processo pelo qual uma célula forma vesículas a partir de sua própria membrana para preservar o tamanho da célula, reutilizar proteínas caras e transportar moléculas consecutivamente para o espaço extracelular. Este processo é mais comumente estudado em sinapses neuronais, onde está envolvido na liberação de neurotransmissores. Além de examinar a reciclagem de vesículas, os corantes FM sã…

Disclosures

No conflicts of interest declared.

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JoVE Science Education Database. JoVE Science Education. FM Dyes in Vesicle Recycling. JoVE, Cambridge, MA, (2023).

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