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Zellbasierte Assays der SINEUP nicht-kodierende RNAs, die speziell mRNA Übersetzung verbessern können
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Cell Based Assays of SINEUP Non-coding RNAs That Can Specifically Enhance mRNA Translation
DOI:

10:21 min

February 01, 2019

, ,

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:48Design of Binding Domains (BDs) of SINEUP Constructs for Target mRNAs
  • 01:48Cell Culture and SINEUPs Transfection
  • 03:46Protein Extraction
  • 05:32Protein Separation by SDS-PAGE and Detection of Target Proteins by Western-blot Analysis
  • 07:21Imaging Analysis of SINEUPs by Semi-automated Detection Method
  • 08:26Results: Analysis of Translation Upregulation by SINEUP-GFP
  • 09:11Conclusion

Summary

Automatic Translation

SINEUPs sind synthetische antisense nicht-kodierende RNAs, die enthalten eine Bindung (BD) und ein Effektor-Domäne (ED) und Übersetzung bis zu regulieren Ziel mRNA. Hier beschreiben wir Nachweismethoden für SINEUPs in kultivierten Zelllinien, Analyse ihrer Tätigkeit zur Förderung der Übersetzung von Western-Blot und eine halbautomatische Hochdurchsatz imaging-System.

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