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Un protocole in vitro pour évaluer les niveaux de microARN, les fonctions et les gènes cibles associés dans les cellules tumorales
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
An In Vitro Protocol for Evaluating MicroRNA Levels, Functions, and Associated Target Genes in Tumor Cells
DOI:

09:45 min

May 21, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:06MicroRNA (miRNA) Mimic Transfection
  • 02:03Sulforhodamine B (SRB) Assay
  • 03:20Generation of a Dose-response Curve
  • 04:35Verification of the Direct Target Gene of a miRNA of Interest
  • 06:37Luciferase Assay
  • 07:52Results: miRNA-107 Negatively Regulates Proliferation of PANC-1 Cells
  • 08:53Conclusion

Summary

Automatic Translation

Ce protocole utilise une réaction en chaîne de polymérase en temps réel (PCR) basée sur la sonde, un prédisme de sulforhodamine B (SRB), 3' régions non traduites (3' UTR) et un résultat de luciferase pour vérifier les gènes cibles d'un miRNA d'intérêt et pour comprendre les fonctions des miRNAs.

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