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अभिव्यक्ति, शुद्धि, क्रिस्टलीकरण, और फ्जाइम परख के Fumarylacetoaceate hydrolase डोमेन युक्त प्रोटीन
JoVE Journal
Biochemistry
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JoVE Journal Biochemistry
Expression, Purification, Crystallization, and Enzyme Assays of Fumarylacetoacetate Hydrolase Domain-Containing Proteins
DOI:

10:21 min

June 20, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:12Expression of FAHD Proteins in Competent E. coli
  • 03:44Lysis of Bacterial Pellets and Filtration of Debris
  • 04:33Purification of His-tagged FAHD Proteins using Ni-NTA Affinity Chromatography
  • 05:59Purification of FAHD Proteins via Ion Exchange Chromatography
  • 06:35Basic FAHD Activity Assays with Substrates Oxaloacetate and Acetylpyruvate
  • 07:53Results: Expression and Purification of Fumarylacetoacetate Hydrolase Domain-containing Proteins
  • 09:19Conclusion

Summary

Automatic Translation

fumarylacetoaceate hydrolase डोमेन युक्त प्रोटीन की अभिव्यक्ति और शुद्धि उदाहरण के साथ वर्णित है (ई. कोलाईमें अभिव्यक्ति , FPLC). शुद्ध प्रोटीन क्रिस्टलीकरण और एंटीबॉडी उत्पादन के लिए उपयोग किया जाता है और एंजाइम assays के लिए कार्यरत हैं. चयनित photometric परख oxaloaceate decarboxylase और acylpyruvate hydrolase के रूप में FAHD1 की बहु कार्यक्षमता प्रदर्शित करने के लिए प्रस्तुत कर रहे हैं.

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