Journal
/
Genetics
/
Direkte Gene knock-out av Axolotl spinal Cord nevrale stamceller via electroporation av CAS9 protein-gRNA komplekser
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Direct Gene Knock-out of Axolotl Spinal Cord Neural Stem Cells via Electroporation of CAS9 Protein-gRNA Complexes

Direkte Gene knock-out av Axolotl spinal Cord nevrale stamceller via electroporation av CAS9 protein-gRNA komplekser

DOI:
10.3791/59850-v

•

09:10 min

•

July 09, 2019

•

, , , ,
1School of Life Sciences,South China Normal University, 2The Research Institute of Molecular Pathology (IMP),Vienna Biocenter (VBC), 3Institute for Brain Research and Rehabilitation (IBRR),South China Normal University

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:16CAS9-gRNA Ribonucleoprotein Mixture and Agarose Plate Preparation
  • 02:33Electroporator Configuration and Glass Microinjection Capillary Loading
  • 04:09Pneumatic Pump Configuration
  • 04:37CAS9-gRNA Ribonucleoprotein Mixture Injection
  • 06:05Electroporation
  • 06:45Knock-Out Efficiency Assessment
  • 07:25Results: Representative Knock-Out Effects in Axolotl Spinal Cord Neural Stem Cells
  • 08:33Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Presentert her er en protokoll for å utføre tid-og plassbegrensede genet Knock-Out i Axolotl spinal snorer ved å injisere CAS9-gRNA kompleks i ryggmargen sentrale kanalen etterfulgt av electroporation.

Tags

AxolotlSpinal CordNeural Stem CellsGene Knock-outElectroporationCAS9GRNARegenerationMolecular MechanismsNeural Stem Cell FunctionSpinal Cord InjuryAgarose Electroporation PlatePoring PulseTransfer Pulse

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Utvalgsavhengig og uavhengig generasjon av CRISPR / Cas9-medierte Gene Knockouts i mammale celler

En Standard metode for å undersøke stedet genetisk virkning som en funksjon av punkt mutasjon reparasjon katalysert av CRISPR/Cas9 og SsODN i menneskeceller

Microinjection CRISPR/Cas9 protein i kanalen Gråsteinbit, Ictalurus punctatus, embryo for Gene Editing

En protokoll for produksjon av Integrase dårlig Lentiviral vektorer for CRISPR/Cas9-mediert Gene Knockout i dele celler

Svært effektiv Gene avbrudd i Murine og menneskelig blodkreft stamfar celler av CRISPR/Cas9

Endogene Protein merking i menneskelig indusert Pluripotent stilk celler med CRISPR/Cas9

Forberedelse og genet modifikasjon Nonhuman primas blodkreft stilk og Progenitor celler

Bruke Sniper-Cas9 å minimere Off-målet effekter av CRISPR-Cas9 uten tap av på målet aktivitet Via regissert evolusjon

CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein-mediert presis Genredigering av tube electroporation

Generering av definerte genomisk modifikasjoner bruke CRISPR-CAS9 i Human Pluripotent stamceller

Read Article