NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC<sub>50</sub> Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases

Brian J. Stockman; Abinash Kaur; Julia  K. Persaud; Maham Mahmood; Samantha  F. Thuilot; Melissa  B. Emilcar; Madison Canestrari; Juliana  A. Gonzalez; Shannon Auletta; Vital Sapojnikov; Wagma Caravan; Samantha  N. Muellers

doi:10.3791/59928

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NMR-आधारित क्रियाकलाप परख संमिश्र निषेध, आईसी₅₀ मान, कृत्रिम गतिविधि, और न्यूक्लिओसाइड रिबोहाइड्रोलेस की संपूर्ण-कोशिका गतिविधि का निर्धारण करने के लिए

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NMR-Based Activity Assays for Determining Compound Inhibition, IC₅₀ Values, Artifactual Activity, and Whole-Cell Activity of Nucleoside Ribohydrolases

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NMR-आधारित क्रियाकलाप परख संमिश्र निषेध, आईसी₅₀ मान, कृत्रिम गतिविधि, और न्यूक्लिओसाइड रिबोहाइड्रोलेस की संपूर्ण-कोशिका गतिविधि का निर्धारण करने के लिए

DOI:

10.3791/59928-v

•

10:24 min

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June 30, 2019

•

Brian J. Stockman, Abinash Kaur, Julia K. Persaud, Maham Mahmood, Samantha F. Thuilot, Melissa B. Emilcar, Madison Canestrari, Juliana A. Gonzalez, Shannon Auletta, Vital Sapojnikov, Wagma Caravan², Samantha N. Muellers³

¹Department of Chemistry,Adelphi University, ²Department of Chemistry,Washington University in St. Louis, ³Department of Chemistry,Boston University

Chapters

00:04Title
00:59Initial Test Compound Assay
05:01Detergent Counter Screen Assay
06:19Jump-Dilution Counter Screen Assays
07:56Results: Representative Nuclear Magnetic Resonance (NMR)-Based Assay Results
09:28Conclusion

Summary

Automatic Translation

एनएमआर-आधारित गतिविधि परख दो न्यूक्लिओसाइड राइबोहाइड्रोलेस एंजाइमों के अवरोधकों की पहचान करने और उनकी विशेषता के लिए विकसित की गई है। प्रोटोकॉल 500 डिग्री और 250 डिग्री सेल्सियस पर प्रारंभिक यौगिक assays के लिए प्रदान की जाती हैं, आईसी₅₀ मूल्यों का निर्धारण करने के लिए खुराक प्रतिक्रिया assays, डिटर्जेंट काउंटर स्क्रीन परख, कूद-डिल्यूशन काउंटर स्क्रीन परख, और ई. कोलाई पूरे कोशिकाओं में परख.

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