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June 04, 2020
DOI:
10.3791/60597-v
使用这个程序,内淋巴水培可以相对快速诱导豚鼠与足够的成功率。该技术的主要优点是,内淋巴水培可以诱导与最小的风险CSF泄漏或伤害后半圆运河。在确认对踏板反射缺乏反应后,将12毫升的皮下液体玻利瓦尔的哺乳环器溶液注射到麻醉豚鼠的背面,将豚鼠放在加热垫上的苏皮位置。
将 27.5 量的蝴蝶针放在针内,确认正确放置,仅在针尖内存在空气,并放置豚鼠在易发位置。将头部固定到立体定向支架中,将脉冲血小计固定到未发人动的脚上。使用直肠探针和加热毯将体温保持在 38 摄氏度,并在动物的眼睛上涂抹软膏。
将一块遮蔽胶带放在背面,以沿皮肤提供足够的张力,将胶带的末端固定到立体定向支架上。然后自由准备皮肤覆盖的奥奇普特和后颈与三个连续的碘磨砂和70%酒精,并放置一个无菌披肩在动物。开始外科手术,使用15号刀片,使一个小中线切口沿后侧切口延伸到后颈。
一旦下皮,使用虹膜剪刀将右后颈肌从腹骨分离,用无菌棉球的压力控制任何出血。使用解剖显微镜和数字三,二,和一毫米金刚石毛刺与5-0吸气和无菌灌溉的组合,执行颅骨切除术,边界远至外部腹体峰横向,羔羊脊优越,腹状质缝合线在地中海,和前体巨无霸的背边低。并使用 0.5 毫米金刚石毛刺对西格莫德正弦进行骨架化。
轻轻地将一小块盐水湿润的棉花放在骨头下面,同时将腹骨与杜拉分离。小心地取出覆盖鼻窦的骨头,并使用棉球轻轻收回西莫德鼻窦。小心地收回西格莫德正弦,将操作器识别为位于 petrous 时间骨内的狭缝状结构。
内淋巴囊的外侧部分可以可视化为操作体和覆盖西莫德正窦的杜拉状连接。对西格莫德正弦应用温和的中缩,以清楚地可视化内淋巴囊的外质部分,并增加囊的外间和内分部之间的张力。使用细角拾取,轻轻清除内淋巴囊的中间部分,并沿骨内侧广泛刮取操作体内的细取。
对于此过程的成功,杜拉和操作器之间没有可见的连接至关重要。使用小花栗沿着时间骨刮,以获得骨片,并慷慨地用骨片包装手术。用骨蜡密封手术库,注意没有多余的蜡脱落到头骨,并使用骨蜡来掩盖颅骨切除术的缺陷。
然后以中断的方式用 4-0 编织可吸收缝合线近似后颈椎肌肉,并使用 4-0 编织可吸收缝合线近似深层和表皮层,以 4-0 编织可吸收缝合线近似深层。在这个具有代表性的实验中,对时间骨骼的组织学分析揭示了整个右耳蜗的内淋巴水合,而左耳蜗则有七分之六。每个转弯时对斯卡拉介质的横截面面积进行量化表明,与在控制动物中观察到的相比,在消灭内淋巴囊30天后存活30天的动物的耳朵中,横截面区域一般较大。
在具有内淋巴水培的动物中,听觉神经重叠波形阈值增加,表明存在低频听力损失,而大多数高频耳蜗复合作用潜在阈值在8至20千赫之间。在正常范围内。如果 dura 和 operculum 之间的区域在清除囊后干燥,请尝试在西格莫德正弦上放置额外的缩回,以确保它和蛋白石之间没有明显的连接。按照这个程序,可以进行关于耳蜗解剖和生理学的其他研究,以解决有关内淋巴水合的重要研究问题。
本文演示了一种外膜方法,用于消灭豚鼠内膜囊,用精细的挑料伤害内膜导管,以诱导实验性内膜水肿。
07:59
Using a Comparative Species Approach to Investigate the Neurobiology of Paternal Responses
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Cite this Article
Valenzuela, C. V., Lee, C., Buchman, C. A., Lichtenhan, J. T. A Revised Surgical Approach to Induce Endolymphatic Hydrops in the Guinea Pig. J. Vis. Exp. (160), e60597, doi:10.3791/60597 (2020).
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