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Correção rápida in Vivo e isolamento de complexos translacionais de células eucarióticas
 
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Correção rápida in Vivo e isolamento de complexos translacionais de células eucarióticas

Article DOI: 10.3791/62639-v 14:29 min December 25th, 2021
December 25th, 2021

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Apresentamos uma técnica para estabilizar rapidamente complexos translacionais (biossíntese de proteínas) com formaldeído interligando em leveduras vivas e células mamíferas. A abordagem permite dissecar intermediários transitórios e interações dinâmicas de RNA:protein. Os complexos interligados podem ser usados em vários aplicativos a jusante, como em métodos de perfil baseados em sequenciamento profundo, microscopia e espectrometria de massa.

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Biologia Edição 178 captura de instantâneos de biossíntese de proteínas estabilização complexa de tradução respostas celulares rápidas estresse celular complexos ribossômicos purificação de afinidade de intermediários de tradução controle translacional sequenciamento de perfil complexo de tradução TCP-seq ribosome (tradução) perfil ribo-seq sedimentação ribossômica por ultracentrifugação em gradiente de sacarose
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