Journal
/
Biology
/
Snelle in vivo fixatie en isolatie van translationele complexen uit eukaryote cellen
JoVE Journal
Biology
Author Produced
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
Rapid In Vivo Fixation and Isolation of Translational Complexes from Eukaryotic Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Snelle in vivo fixatie en isolatie van translationele complexen uit eukaryote cellen

DOI:
10.3791/62639-v

•

14:29 min

•

December 25, 2021

•

, , , , ,
1Division of Genome Sciences and Cancer, The John Curtin School of Medical Research,The Australian National University, 2Centre for Advanced Microscopy,The Australian National University, 3Victor Chang Cardiac Research Institute

Chapters

  • 00:10Introduction
  • 01:06Yeast Cell Culture and FIxation
  • 03:58Yeast Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 05:45Mammalian Cell Culture and Fixation
  • 09:40Mammalian Cell Disruption and Cytosol Collection
  • 11:02Results
  • 13:41Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

We presenteren een techniek om translationele (eiwitbiosynthese) complexen snel te stabiliseren met formaldehyde crosslinking in levende gist- en zoogdiercellen. De aanpak maakt het mogelijk om transiënte tussenproducten en dynamische RNA:eiwitinteracties te ontleden. De crosslinked complexen kunnen worden gebruikt in meerdere downstream-toepassingen, zoals in op diepe sequencing gebaseerde profileringsmethoden, microscopie en massaspectrometrie.

Tags

In Vivo FixationTranslational ComplexesEukaryotic CellsRapid ChillingFormaldehyde FixationGlycine QuenchingCell LysisRibosomal FractionsAffinity PurificationRNA AnalysisMass SpectrometryYeast CultureExponential Growth PhaseFormaldehyde ConcentrationFixation TimeCell PelletingGlycine Buffer

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Isolatie van labiele Multi-eiwit-complexen door In vivo Gecontroleerde Cellulaire Cross-Linking and Immuno-magnetische affiniteitschromatografie

Oprichting van Microbiële Eukaryote Enrichment Culturen van een chemisch Stratified Antarctic Lake en Beoordeling van Carbon Fixatie Potentiële

Isolatie van Ribosoom Bound Nascent Polypeptiden<em> In vitro</em> Om Translationeel Pauze plaatsen langs mRNA identificeren

Efficiënte en snelle isolatie van een vroeg stadium embryo's van<em> Arabidopsis thaliana</em> Zaden

Identificatie van post-translationele modificaties van Plant eiwitcomplexen

Een In vivo Crosslinking Aanpak eiwitcomplexen te isoleren van Drosophila Embryo's

Isolatie en functionele analyse van Mitochondriën uit gekweekte cellen en muis Tissue

Isolatie en Primaire Cultuur van de muis endotheelcellen

Genoom-brede Zuivering van extrachromosomale circulaire DNA van eukaryote cellen

Filtratie Isolatie van nucleïnezuren: Een eenvoudige en snelle DNA Extraction Method

Read Article