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Rapida fissazione in vivo e isolamento dei complessi traslazionali dalle cellule eucariotiche
 
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Rapida fissazione in vivo e isolamento dei complessi traslazionali dalle cellule eucariotiche

Article DOI: 10.3791/62639-v 14:29 min December 25th, 2021
December 25th, 2021

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Presentiamo una tecnica per stabilizzare rapidamente complessi traslazionali (biosintesi proteica) con reticolazione di formaldeide in cellule di lievito vivo e di mammifero. L'approccio consente di sezionare intermedi transitori e interazioni dinamiche RNA:proteina. I complessi reticolati possono essere utilizzati in molteplici applicazioni a valle come nei metodi di profilazione basati sul sequenziamento profondo, nella microscopia e nella spettrometria di massa.

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Biologia Numero 178 Cattura istantanea di biosintesi proteica stabilizzazione del complesso di traduzione risposte cellulari rapide stress cellulare complessi ribosomiali purificazione dell'affinità degli intermedi di traduzione controllo traslazionale sequenziamento del profilo complesso di traduzione TCP-seq profilo ribosomico (traduzione) ribo-seq sedimentazione ribosoma mediante ultracentrifugazione nel gradiente di saccarosio
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