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Cromatografia líquida acoplada ao índice refrativo ou detecção espectrométrica em massa para perfil metabólito em sistemas livres de células baseadas em lysato
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Liquid Chromatography Coupled to Refractive Index or Mass Spectrometric Detection for Metabolite Profiling in Lysate-based Cell-free Systems

Cromatografia líquida acoplada ao índice refrativo ou detecção espectrométrica em massa para perfil metabólito em sistemas livres de células baseadas em lysato

DOI:
10.3791/62852-v

•

14:42 min

•

September 23, 2021

•

, , ,
1Graduate School of Genome Science & Technology,University of Tennessee Knoxville, 2Bredesen Center for Interdisciplinary Research,University of Tennessee Knoxville, 3Biosciences Division,Oak Ridge National Laboratory

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:08Starting, Stopping, and Processing Time Course CFME Reactions for HPLC-RID Quantification
  • 03:18Creating a Sequence Table for Autosampling and Start the HPLC-RID System for Data Acquisition
  • 04:54Extracting and Analyzing Data Post-Run
  • 07:20Starting, Stopping, and Processing Time Course Isotope Tracing CFME Reactions for LC-MS/MS Quantification
  • 09:20Setting Up a Run Sequence and Starting the LC-MS/MS Run
  • 10:16Calculating Negative Mode Masses of 13C-Labeled Glucose-Derived Metabolites and Searching for the m/z Features of These Analytes in Filtered Data
  • 11:45Results: Metabolite Profiling in Lysate-based Cell-free Systems
  • 13:54Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Os protocolos descrevem métodos de cromatografia líquida de alto desempenho acoplados ao índice refrativo ou detecção espectrométrica em massa para estudar reações metabólicas em sistemas complexos de isenta de células baseadas em lysato.

Tags

Keywords: Liquid ChromatographyRefractive Index DetectionMass SpectrometryMetabolite ProfilingCell-free SystemsCarbon MetabolismCentral MetabolitesLysate-basedHPLCSample PreparationAcidificationFiltration

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