Journal
/
Biology
/
En fluorescensbasert analyse av membranpotensial for funksjonell studie med høy gjennomstrømning av to endogene ionekanaler i to epitelcellelinjer
JoVE Journal
Biology
This content is Free Access.
JoVE Journal Biology
A Fluorescence-Based Assay of Membrane Potential for High-Throughput Functional Study of Two Endogenous Ion Channels in Two Epithelial Cell Lines

En fluorescensbasert analyse av membranpotensial for funksjonell studie med høy gjennomstrømning av to endogene ionekanaler i to epitelcellelinjer

DOI:
10.3791/63528-v

•

06:59 min

•

June 22, 2022

•

, , ,
1Molecular Medicine,Hospital for Sick Children, 2Cell Biology,Hospital for Sick Children, 3Department of Physiology,University of Toronto, 4Department of Paediatrics,University of Toronto, 5Department of Biochemistry,University of Toronto

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:46Cell Plating and Differentiation
  • 02:33CFTR Functional Assay
  • 05:24Results: Measurement of CFTR Channel Activity
  • 06:22Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Denne protokollen beskriver en metode for studier av elektrogene membranproteiner ved å måle endringer i membranpotensial. Denne analysen gir en plattform for funksjonell avlesning av flere ionekanaler endogent uttrykt i epitelcellelinjer.

Tags

Keywords: Fluorescence-based AssayMembrane PotentialHigh-throughputIon ChannelsEpithelial CellsCalu-3Caco-2Cell CultureTrypsin96-well Plate384-well PlateSodium-free BufferChloride-free BufferNMDG

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/63528?article_type=v

Crystallizing Membrane Proteins for Structure Determination using Lipidic Mesophases
check_url/63528?article_type=v

Assessing Two-dimensional Crystallization Trials of Small Membrane Proteins for Structural Biology Studies by Electron Crystallography
check_url/63528?article_type=v

Mutagenesis and Functional Analysis of Ion Channels Heterologously Expressed in Mammalian Cells
check_url/63528?article_type=v

Patch Clamp and Perfusion Techniques for Studying Ion Channels Expressed in Xenopus oocytes
check_url/63528?article_type=v

Bruk av en robot for High-throughput Krystallisering av membran proteiner i Lipidic Mesophases
check_url/63528?article_type=v

Høsting og Cryo-kjøling Krystaller av membran proteiner Grown i Lipidic Mesophases for strukturbestemmelse av Macromolecular Crystallography
check_url/63528?article_type=v

High-throughput screening for små-molekyl modulatorer av Inderlige likeretter kaliumkanaler
check_url/63528?article_type=v

Høy gjennomstrømming Funksjonell Screening ved hjelp av en hjemmelaget Dual-glød Luciferase Assay
check_url/63528?article_type=v

Isolering av humane hepatocytter av en to-trinns Collage Perfusjons Prosedyre
check_url/63528?article_type=v

Høy gjennomstrømming Screening for kjemi modulatorer av Post-transcriptionally Regulerte Gener

Read Article