Construção de microeletrodos potenciais de campo local para gravações in vivo de múltiplas estruturas cerebrais simultaneamente

Os pesquisadores muitas vezes precisam registrar potenciais de campo locais a partir de múltiplas estruturas ao mesmo tempo. Nosso design fácil de microeletrodes nos permite gravar LFPs de várias estruturas cerebrais em diferentes profundidades simultaneamente. Microeletros disponíveis comercialmente muitas vezes carecem de flexibilidade e não permitem gravar a partir de múltiplas estruturas cerebrais.

Nosso projeto de microeletrodo permite modificar facilmente a construção para se adequar a qualquer estrutura desejada. Comece tomando um fio de cromo de níquel revestido de dianal de 50 micrômetros de diâmetro. Grave uma extremidade do fio na parte de trás da plataforma e enrole o fio três vezes ao redor do botão mais próximo da plataforma.

Estique o fio ao redor do segundo botão mais distante para fazer dois loops entre os botões. Enrole o fio mais três vezes ao redor do primeiro botão para fixar o fio no lugar e tape a extremidade na parte de trás da plataforma. Coloque as barras de tensão sob os fios com a fita enrolada em volta delas.

Usando um microscópio e fórceps finos, faça uma diferença de três milímetros entre os fios para fazer microeletrodos corticais, ventral-laterais, de núcleo talâmico ou uma lacuna de 4,5 milímetros para fazer microeletrodos estriais-nidral. Se a ampliação for usada no microscópio, certifique-se de calcular e ajustar para a diferença na ampliação e a distância real entre os fios. Corte quatro pequenos pedaços de plástico de 0,5 milímetros de espessura aproximadamente seis milímetros de largura e três milímetros de altura.

Aplique cola no plástico. Coloque as peças de plástico aproximadamente um centímetro de distância do meio do fio, que está a um centímetro da barra de tensão. Remova o excesso de cola com um cotonete.

Depois que a cola secar, corte o fio usando uma tesoura fina. Corte quatro tubos de vidro de sete milímetros usando um kit comercialmente disponível e insira o fio de eletrodo nos tubos de vidro. Coloque a cola na base dos tubos de vidro para conectá-los ao plástico.

Espere até a cola ser, depois corte os tubos de vidro e os fios usando um bisturi. Use super cola para fixar plásticos na ordem desejada das regiões-alvo. Aplique resina epóxi ao redor do plástico para unir os eletrodos.

Pegue um fio grosso e faça um loop em uma extremidade, mergulhe o laço na solução epóxi e coloque-o sobre o plástico, garantindo que o fio grosso esteja deitado plano para que este fio possa ser usado como uma alça. Corte o fio para dois centímetros. Agrupar os fios e raspar um milímetro das extremidades isoladas com um bisturi.

Dobre os eletrodos corticais e separe os fios. Usando fórceps finos, faça um loop na extremidade de cada fio. Segure um fone de ouvido de 10 pinos com um hemosta e use a extremidade de madeira de um cotonete de algodão para aplicar quantidades mínimas de fluxo nos pinos.

Usando a extremidade de madeira do cotonete, aplique fluxo nas alças do fio. Soldar os laços de fio para o fone de ouvido de 10 pinos. Seque o fone de ouvido para evitar um curto-circuito entre os pinos.

Pegue um fio fino de cerca de 0,05 a 0,008 polegadas para referência e fios de terra e retire o plástico de uma extremidade. Faça um loop na outra extremidade do fio. Soldar o lado despojado da referência e fios de terra para seus respectivos pinos.

Segurando o fio grosso, aplique cimento cranioplastia ao redor dos microeletrous, especialmente quando os fios se conectam aos pinos. Evite tocar nas extremidades reais do eletrodo com o cimento. Depois que o cimento secar, coloque resina epóxi na base dos tubos de vidro, fios de microeletroderna escorestar, e ao redor de todo o eletrodo.

Evite tocar nas extremidades do eletrodo com resina epóxi. Gravações potenciais de campo locais foram realizadas a partir do córtex pré-motor direito, da VL esquerda, do estriato e do SNR. O início da convulsão foi identificado como uma deflexão do traço de tensão pelo menos o dobro da linha de base.

O gráfico do espectro de energia mostra a distribuição de frequência para as gravações potenciais locais gravadas. Latências de início de convulsão podem ser comparadas entre cada estrutura com precisão de milissegundo. Um pulso de corrente foi aplicado no final das gravações para marcar e confirmar a localização das pontas dos eletrodos formando a lesão.

Se os microeletrodos forem construídos para diferentes estruturas cerebrais, lembre-se de modificar as lacunas entre os fios de acordo com as coordenadas estereotáticas da estrutura desejada. Coloque os eletrodos da estrutura profunda nos tubos de vidro e ajuste os comprimentos dos microeletrodos. Em seguida, conecte os plásticos na ordem necessária.