2,800 Views
•
06:07 min
•
March 14, 2022
DOI:
Исследователям часто приходится регистрировать локальные полевые потенциалы из нескольких структур одновременно. Наша простая микроэлектродная конструкция позволяет нам записывать LFP из нескольких структур мозга на разной глубине одновременно. Коммерчески доступные микроэлектроды часто не обладают гибкостью и не позволяют записывать из нескольких структур мозга.
Наша микроэлектродная конструкция позволяет легко модифицировать конструкцию в соответствии с любой желаемой структурой. Начните с никель-хромовой проволоки диаметром 50 микрометров. Прикрепите один конец провода к задней части платформы и обмотайте провод три раза вокруг ближайшей ручки на платформе.
Растяните проволоку вокруг самой дальней второй ручки, чтобы сделать две петли между ручками. Оберните проволоку еще три раза вокруг первой ручки, чтобы закрепить провод на месте и заклеить конец в задней части платформы. Поместите натяжные стержни под провода с обмотанной вокруг них лентой.
Используя микроскоп и тонкие щипцы, сделайте либо трехмиллиметровый зазор между проводами, чтобы сделать корковые, вентрально-боковые, таламические микроэлектроды ядра, либо 4,5-миллиметровый зазор, чтобы сделать стриатально-нидральные микроэлектроды. Если на микроскопе используется увеличение, убедитесь, что вычислите и отрегулируйте разницу в увеличении и фактическое расстояние между проводами. Вырежьте четыре небольших кусочка пластика толщиной 0,5 миллиметра примерно шесть миллиметров в ширину и три миллиметра в высоту.
Нанесите клей на пластик. Поместите пластиковые куски примерно на один сантиметр от середины проволоки, которая находится на расстоянии одного сантиметра от натяжного стержня. Удалите излишки клея ватным тампоном.
После того, как клей высохнет, отрежьте проволоку тонкими ножницами. Вырежьте четыре семимиллиметровые стеклянные трубки, используя коммерчески доступный комплект, и вставьте электродную проволоку в стеклянные трубки. Положите клей на основание стеклянных трубок, чтобы соединить их с пластиком.
Подождите, пока клей высохнет, затем разрежьте стеклянные трубки и провода с помощью скальпеля. Используйте суперклей для крепления пластмасс в нужном порядке целевых областей. Нанесите эпоксидную смолу вокруг пластика, чтобы связать электроды вместе.
Возьмите толстую проволоку и сделайте петлю на одном конце, окуните петлю в эпоксидный раствор и поместите ее на пластик, убедившись, что толстая проволока лежит плоско, чтобы эту проволоку можно было использовать в качестве ручки. Отрежьте проволоку на два сантиметра. Сгруппируйте провода и соскоблите один миллиметр изолированных концов скальпелем.
Согните корковые электроды и отделите провода. Используя тонкие щипцы, сделайте петлю на конце каждой проволоки. Держите 10-контактную гарнитуру с гемостатом и используйте деревянный конец ватного тампона, чтобы нанести минимальное количество флюса на булавки.
Используя деревянный конец ватного тампона, нанесите флюс на проволочные петли. Припаяйте петли провода к 10-контактной гарнитуре. Высушите гарнитуру, чтобы предотвратить короткое замыкание между контактами.
Возьмите тонкую проволоку размером от 0,05 до 0,008 дюйма для эталонных и заземляющих проводов и снимите пластик с одного конца. Сделайте петлю на другом конце провода. Припаяйте зачищенную сторону опорного и заземляющего проводов к соответствующим контактам.
Удерживая толстую проволоку, нанесите цемент для краниопластики вокруг микроэлектродов, особенно там, где провода соединяются со штифтами. Избегайте прикосновения к фактическим торцам электрода с цементом. После того, как цемент высохнет, положите эпоксидную смолу на основание стеклянных трубок, стриатальные микроэлектродные провода и вокруг всего электрода.
Избегайте прикосновения к торцам электрода эпоксидной смолой. Локальные записи потенциала поля были выполнены из правой предмоторной коры, левого VL, полосатого тела и SNR. Начало захвата было идентифицировано как отклонение следа напряжения, по крайней мере, в два раза выше базового уровня.
График спектра мощности показывает распределение частот для записанных локальных потенциальных записей. Задержки начала судорог можно сравнить между каждой структурой с точностью до миллисекунд. Импульс тока был применен в конце записи, чтобы отметить и подтвердить местоположение кончиков электродов, образующих поражение.
Если микроэлектроды построены для разных структур мозга, не забудьте изменить промежутки между проводами в соответствии со стереотаксическими координатами желаемой структуры. Поместите электроды глубокой структуры в стеклянные трубки и отрегулируйте длину микроэлектродов. Затем прикрепите пластик в необходимом порядке.
Настоящий протокол описывает построение специально изготовленных микроэлектродных массивов для записи локальных потенциалов поля in vivo от нескольких структур мозга одновременно.
11:00
Single-unit In vivo Recordings from the Optic Chiasm of Rat
Related Videos
11598 Views
08:36
Functional Neuroimaging Using Ultrasonic Blood-brain Barrier Disruption and Manganese-enhanced MRI
Related Videos
14889 Views
10:29
Design and Assembly of an Ultra-light Motorized Microdrive for Chronic Neural Recordings in Small Animals
Related Videos
12008 Views
09:23
Paired Whole Cell Recordings in Organotypic Hippocampal Slices
Related Videos
14580 Views
10:36
Electrophysiological Method for Whole-cell Voltage Clamp Recordings from Drosophila Photoreceptors
Related Videos
14855 Views
10:46
Acute In Vivo Electrophysiological Recordings of Local Field Potentials and Multi-unit Activity from the Hyperdirect Pathway in Anesthetized Rats
Related Videos
15421 Views
08:31
Concurrent Recording of Co-localized Electroencephalography and Local Field Potential in Rodent
Related Videos
12124 Views
10:07
Simultaneous Recordings of Cortical Local Field Potentials, Electrocardiogram, Electromyogram, and Breathing Rhythm from a Freely Moving Rat
Related Videos
10706 Views
06:35
In Vivo Electrophysiological Measurement of Compound Muscle Action Potential from the Forelimbs in Mouse Models of Motor Neuron Degeneration
Related Videos
18865 Views
07:03
Evaluation of Hemisphere Lateralization with Bilateral Local Field Potential Recording in Secondary Motor Cortex of Mice
Related Videos
6682 Views
Read Article
Cite this Article
Brodovskaya, A., Shiono, S., Batabyal, T., Williamson, J., Kapur, J. Construction of Local Field Potential Microelectrodes for in vivo Recordings from Multiple Brain Structures Simultaneously. J. Vis. Exp. (181), e63633, doi:10.3791/63633 (2022).
Copy