Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Aynı Anda Birden Çok Beyin Yapısından İn vivo Kayıtlar için Yerel Alan Potansiyeli Mikroelektrotlarının İnşası
Chapters
Summary March 14th, 2022
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Mevcut protokol, aynı anda birden fazla beyin yapısından in vivo olarak yerel alan potansiyellerini kaydetmek için özel yapım mikroelektrot dizilerinin yapımını açıklamaktadır.
Transcript
Araştırmacıların genellikle aynı anda birden fazla yapıdan yerel alan potansiyellerini kaydetmeleri gerekir. Kolay mikroelektrot tasarımımız, aynı anda farklı derinliklerde çeşitli beyin yapılarından LFP'leri kaydetmemizi sağlar. Ticari olarak temin edilebilen mikroelektrotlar genellikle esneklikten yoksundur ve birden fazla beyin yapısından kayıt yapılmasına izin vermez.
Mikroelektrot tasarımımız, konstrüksiyonu istenen herhangi bir yapıya uyacak şekilde kolayca değiştirmenizi sağlar. 50 mikrometre çapında dianal kaplı nikel krom tel alarak başlayın. Telin bir ucunu platformun arkasına bantlayın ve teli platformdaki en yakın düğmenin etrafına üç kez sarın.
Düğmeler arasında iki döngü yapmak için teli en uzak ikinci düğmenin etrafına gerin. Teli yerine sabitlemek için teli ilk düğmenin etrafına üç kez daha sarın ve ucunun platformun arkasına bantlayın. Gergi çubuklarını, etraflarına sarılmış bant olacak şekilde tellerin altına yerleştirin.
Bir mikroskop ve ince forseps kullanarak, kortikal, ventral-lateral, talamik çekirdek mikroelektrotları yapmak için teller arasında üç milimetrelik bir boşluk veya striatal-nidral mikroelektrotlar yapmak için 4.5 milimetrelik bir boşluk açın. Mikroskopta büyütme kullanılıyorsa, büyütmedeki farkı ve teller arasındaki gerçek mesafeyi hesapladığınızdan ve ayarladığınızdan emin olun. Yaklaşık altı milimetre genişliğinde ve üç milimetre yüksekliğinde dört küçük 0,5 milimetre kalınlığında plastik parçasını kesin.
Plastik üzerine yapıştırıcı uygulayın. Plastik parçaları, gergi çubuğundan bir santimetre uzakta olan telin ortasından yaklaşık bir santimetre uzağa yerleştirin. Fazla yapıştırıcıyı pamuklu çubukla çıkarın.
Tutkal kuruduktan sonra, ince makas kullanarak teli kesin. Ticari olarak temin edilebilen bir kit kullanarak dört adet yedi milimetrelik cam tüpü kesin ve elektrot telini cam tüplere yerleştirin. Yapıştırıcıyı plastiğe bağlamak için cam tüplerin tabanına yerleştirin.
Tutkal kuruyana kadar bekleyin, ardından cam tüpleri ve telleri bir neşter kullanarak kesin. Plastikleri hedef bölgelerin istenen sırasına göre tutturmak için süper yapıştırıcı kullanın. Elektrotları birbirine bağlamak için plastiğin etrafına epoksi reçine uygulayın.
Kalın bir tel alın ve bir ucunda bir halka yapın, ilmeği epoksi çözeltisine batırın ve plastiğin üzerine yerleştirin, kalın telin düz durduğundan emin olun, böylece bu tel bir sap olarak kullanılabilir. Teli iki santimetreye kesin. Telleri gruplandırın ve izole uçların bir milimetresini bir neşterle kazıyın.
Kortikal elektrotları bükün ve telleri ayırın. İnce forseps kullanarak, her telin sonunda bir döngü yapın. Hemostatlı 10 pimli bir kulaklık tutun ve pimlere minimum miktarda akı uygulamak için pamuklu çubuğun ahşap ucunu kullanın.
Pamuklu çubuğun ahşap ucunu kullanarak, tel halkalara akı uygulayın. Tel halkaları 10 pimli kulaklığa lehimleyin. Pimler arasında kısa devre yapılmasını önlemek için kulaklığı kurutun.
Referans ve topraklama telleri için yaklaşık 0,05 ila 0,008 inçlik ince bir tel alın ve plastiği bir ucundan çıkarın. Telin diğer ucunda bir döngü yapın. Referansın ve topraklama tellerinin sıyrılmış tarafını ilgili pimlerine lehimleyin.
Kalın teli tutarak, özellikle tellerin pimlere bağlandığı yerlerde, mikroelektrotların etrafına kraniyoplasti çimentosu uygulayın. Çimento ile gerçek elektrot uçlarına dokunmaktan kaçının. Çimento kuruduktan sonra, epoksi reçinesini cam tüplerin tabanına, striatal mikroelektrot tellerine ve tüm elektrotun etrafına koyun.
Epoksi reçine ile elektrot uçlarına dokunmaktan kaçının. Lokal alan potansiyel kayıtları sağ pre-motor korteks, sol VL, striatum ve SNR'den yapıldı. Nöbet başlangıcı, voltaj izinin taban çizgisinin en az iki katı kadar sapması olarak tanımlandı.
Güç spektrumu grafiği, kaydedilen yerel potansiyel kayıtların frekans dağılımını gösterir. Nöbet başlangıçlı gecikmeler her yapı arasında milisaniye hassasiyetiyle karşılaştırılabilir. Kayıtların sonunda, lezyonu oluşturan elektrot uçlarının yerini işaretlemek ve doğrulamak için bir akım darbesi uygulandı.
Mikroelektrotlar farklı beyin yapıları için yapılmışsa, teller arasındaki boşlukları istediğiniz yapının stereotaktik koordinatlarına göre değiştirmeyi unutmayın. Derin yapı elektrotlarını cam tüplere yerleştirin ve mikroelektrotların uzunluklarını ayarlayın. Ardından, plastikleri gerekli sırayla takın.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
