Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.
You will only be able to see the first 2 minutes.
The JoVE video player is compatible with HTML5 and Adobe Flash. Older browsers that do not support HTML5 and the H.264 video codec will still use a Flash-based video player. We recommend downloading the newest version of Flash here, but we support all versions 10 and above.
If that doesn't help, please let us know.
Konstruktion av lokala fältpotentialmikroelektroder för in vivo-inspelningar från flera hjärnstrukturer samtidigt
Chapters
Summary March 14th, 2022
Please note that all translations are automatically generated.
Click here for the English version.
Det nuvarande protokollet beskriver konstruktionen av skräddarsydda mikroelektrodmatriser för att registrera lokala fältpotentialer in vivo från flera hjärnstrukturer samtidigt.
Transcript
Forskare behöver ofta registrera lokala fältpotentialer från flera strukturer samtidigt. Vår enkla mikroelektroddesign gör att vi kan spela in LFP från flera hjärnstrukturer på olika djup samtidigt. Kommersiellt tillgängliga mikroelektroder saknar ofta flexibilitet och tillåter inte att spela in från flera hjärnstrukturer.
Vår mikroelektroddesign gör det enkelt att modifiera konstruktionen så att den passar alla önskade strukturer. Börja med att ta en dianalbelagd nickelkromtråd 50 mikrometer i diameter. Tejpa ena änden av tråden på baksidan av plattformen och linda tråden tre gånger runt närmaste ratt på plattformen.
Sträck tråden runt den längsta andra ratten för att göra två öglor mellan rattarna. Vik tråden ytterligare tre gånger runt den första ratten för att fixera tråden på plats och tejpa änden på baksidan av plattformen. Placera spänningsstängerna under ledningarna med tejpen lindad runt dem.
Använd ett mikroskop och fina pincett, gör antingen ett tre millimeter mellanrum mellan ledningarna för att göra kortikala, ventral-laterala, talamiska kärnmikroelektroder eller ett 4,5 millimeter gap för att göra striatal-nidral mikroelektroder. Om förstoring används på mikroskopet, se till att beräkna och justera för skillnaden i förstoring och det faktiska avståndet mellan ledningarna. Skär fyra små bitar av 0,5 millimeter tjock plast ungefär sex millimeter i bredd och tre millimeter i höjd.
Applicera lim på plasten. Placera plastbitarna ungefär en centimeter från mitten av tråden, som är en centimeter från spänningsstången. Ta bort överflödigt lim med en bomullspinne.
När limet torkar, klipp tråden med fin sax. Skär fyra sju millimeter glasrör med ett kommersiellt tillgängligt kit och sätt in elektrodtråden i glasrören. Sätt limet vid basen av glasrören för att ansluta dem till plasten.
Vänta tills limet torkar och skär sedan glasrören och ledningarna med en skalpell. Använd superlim för att fästa plast i önskad ordning av målregioner. Applicera epoxiharts runt plasten för att binda elektroderna ihop.
Ta en tjock tråd och gör en slinga i ena änden, doppa slingan i epoxilösningen och placera den på plasten, så att den tjocka tråden ligger platt så att denna tråd kan användas som handtag. Skär tråden till två centimeter. Gruppera ledningarna och skrapa bort en millimeter av de isolerade ändarna med en skalpell.
Böj de kortikala elektroderna och separera ledningarna. Använd fina pincett och gör en slinga i slutet av varje tråd. Håll ett 10-polig headset med en hemostat och använd träänden på en bomullspinne för att applicera minimala mängder flöde på stiften.
Använd träänden på bomullspinnen och applicera flöde på trådslingorna. Löd trådslingorna till det 10-poliga headsetet. Torka headsetet för att förhindra kortslutning bland stiften.
Ta en tunn tråd på cirka 0,05 till 0,008 tum för referens- och jordledningar och ta bort plasten från ena änden. Gör en slinga i andra änden av tråden. Löd den avskalade sidan av referens- och jordledningarna till sina respektive stift.
Håll den tjocka tråden, applicera kranioplastisk cement runt mikroelektroderna, särskilt där ledningarna ansluter till stiften. Undvik att röra vid de faktiska elektrodändarna med cementet. När cementet torkar, sätt epoxiharts vid basen av glasrören, striatala mikroelektrodtrådar och runt hela elektroden.
Undvik att röra elektrodändarna med epoxiharts. Lokala fältpotentialinspelningar utfördes från höger premotorisk cortex, vänster VL, striatum och SNR. Anfallsstart identifierades som en avböjning av spänningsspåret minst två gånger baslinjen.
Effektspektrumdiagrammet visar frekvensfördelningen för de inspelade lokala potentiella inspelningarna. Latenser för anfallsstart kan jämföras mellan varje struktur med millisekundprecision. En strömpuls applicerades i slutet av inspelningarna för att markera och bekräfta placeringen av elektrodspetsarna som bildar lesionen.
Om mikroelektroderna är konstruerade för olika hjärnstrukturer, kom ihåg att ändra mellanrummen mellan ledningarna enligt de stereotaktiska koordinaterna för din önskade struktur. Placera de djupa strukturelektroderna i glasrören och justera mikroelektrodernas längder. Fäst sedan plasten i önskad ordning.
Related Videos
You might already have access to this content!
Please enter your Institution or Company email below to check.
has access to
Please create a free JoVE account to get access
Login to access JoVE
Please login to your JoVE account to get access
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Please enter your email address so we may send you a link to reset your password.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Your JoVE Unlimited Free Trial
Fill the form to request your free trial.
We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.
If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.
Thank You!
A JoVE representative will be in touch with you shortly.
Thank You!
You have already requested a trial and a JoVE representative will be in touch with you shortly. If you need immediate assistance, please email us at subscriptions@jove.com.
Thank You!
Please enjoy a free 2-hour trial. In order to begin, please login.
Thank You!
You have unlocked a 2-hour free trial now. All JoVE videos and articles can be accessed for free.
To get started, a verification email has been sent to email@institution.com. Please follow the link in the email to activate your free trial account. If you do not see the message in your inbox, please check your "Spam" folder.
