Journal
/
/
Enkel og hurtig rullende cirkelforstærkningsbaseret påvisning af topoisomerase 1-aktivitet i rå biologiske prøver
JoVE Journal
Cancer Research
This content is Free Access.
JoVE Journal Cancer Research
Simple and Fast Rolling Circle Amplification-Based Detection of Topoisomerase 1 Activity in Crude Biological Samples
DOI:

10:13 min

December 02, 2022

, , , , ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:51Preparation of Functionalized Slides
  • 01:34Generation of Closed Circular Substrates
  • 02:16Blocking of the Wellmaker and Hybridization of the Circles
  • 03:48Rolling Circle Amplification (RCA) and Visualization by Fluorescence Microscopy
  • 05:54Coupling of HRP-Conjugated Antibody to Rolling Circle Products and Visualization
  • 07:57Results: Detection of Topoisomerase 1 Activity Using the REEAD Assay
  • 09:29Conclusion

Summary

Automatic Translation

En protokol for følsom og kvantitativ påvisning af topoisomerase 1-aktivitet ved hjælp af den rullende cirkelforbedrede enzymaktivitetsdetektionsanalyse er beskrevet. Metoden gør det muligt at påvise topoisomerase 1-aktivitet fra oprensede komponenter eller celle-/vævsekstrakter. Denne protokol har vidtrækkende anvendelser på ethvert område, der involverer påvisning af enzymatisk aktivitet.

Related Videos

Read Article