Journal
/
Cancer Research
/
Enkel og hurtig rullende cirkelforstærkningsbaseret påvisning af topoisomerase 1-aktivitet i rå biologiske prøver
JoVE Journal
Cancer Research
This content is Free Access.
JoVE Journal Cancer Research
Simple and Fast Rolling Circle Amplification-Based Detection of Topoisomerase 1 Activity in Crude Biological Samples

Enkel og hurtig rullende cirkelforstærkningsbaseret påvisning af topoisomerase 1-aktivitet i rå biologiske prøver

DOI:
10.3791/64484-v

•

10:13 min

•

December 02, 2022

•

, , , , ,
1Department of Molecular Biology and Genetics,Aarhus University, 2Department of Clinical Medicine,Aarhus University, 3VPCIR Biosciences ApS, 4Department of Pathology,Aarhus University Hospital

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:51Preparation of Functionalized Slides
  • 01:34Generation of Closed Circular Substrates
  • 02:16Blocking of the Wellmaker and Hybridization of the Circles
  • 03:48Rolling Circle Amplification (RCA) and Visualization by Fluorescence Microscopy
  • 05:54Coupling of HRP-Conjugated Antibody to Rolling Circle Products and Visualization
  • 07:57Results: Detection of Topoisomerase 1 Activity Using the REEAD Assay
  • 09:29Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

En protokol for følsom og kvantitativ påvisning af topoisomerase 1-aktivitet ved hjælp af den rullende cirkelforbedrede enzymaktivitetsdetektionsanalyse er beskrevet. Metoden gør det muligt at påvise topoisomerase 1-aktivitet fra oprensede komponenter eller celle-/vævsekstrakter. Denne protokol har vidtrækkende anvendelser på ethvert område, der involverer påvisning af enzymatisk aktivitet.

Tags

Rolling Circle AmplificationTopoisomerase 1 ActivityCrude Biological SamplesSimple And Fast DetectionAnti-cancerAnti-infectious DiseasesPrimer MixCircular SubstratesRecombinant Topoisomerase 1Cell ExtractSDSBuffer WashHybridization

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

Next Generation Sequencing til påvisning af søgsmål mutationer i fast og flydende tumorer

Cell-Free DNA Integritet Analyse i urinprøver

Udnyttelse af DNA-farve-udløst sidebefolkningens fenotype til at detektere og rense kræftstamceller fra biologiske prøver

Bevæger sig opad: En enkel og fleksibel In Vitro tredimensionale Invasion Assay protokol

Ved hjælp af 22C 3 Anti-PD-L1 antistof koncentrere sig om biopsi og cytologi prøver fra patienter med ikke-småcellet lungecancer

Påvisning af Protease aktivitet af fluorescerende peptid Zymography

Påvisning og overvågning af tumor associeret cirkulerende DNA i patientens Biofluider

Påvisning af tilbagevirkende aktivitet af Hot LINE-1s ved lang distance-inverse PCR

Machine Learning Algoritmer til tidlig påvisning af Bone Metastases i en eksperimentel rotte model

Påvisning af cellefri DNA i blodplasmaprøver af kræftpatienter

Read Article