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Rilevazione semplice e veloce basata sull'amplificazione del cerchio di rotolamento dell'attività della topoisomerasi 1 in campioni biologici grezzi
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Chapters
- 00:04Introduction
- 00:51Preparation of Functionalized Slides
- 01:34Generation of Closed Circular Substrates
- 02:16Blocking of the Wellmaker and Hybridization of the Circles
- 03:48Rolling Circle Amplification (RCA) and Visualization by Fluorescence Microscopy
- 05:54Coupling of HRP-Conjugated Antibody to Rolling Circle Products and Visualization
- 07:57Results: Detection of Topoisomerase 1 Activity Using the REEAD Assay
- 09:29Conclusion
Viene descritto un protocollo per la rilevazione sensibile e quantitativa dell'attività della topoisomerasi 1 utilizzando il saggio di rilevamento dell'attività enzimatica potenziata del rolling circle. Il metodo consente di rilevare l'attività della topoisomerasi 1 da componenti purificati o estratti di cellule/tessuti. Questo protocollo ha applicazioni ad ampio raggio in qualsiasi campo che coinvolga il rilevamento dell'attività enzimatica.
