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Chapters
- 00:05Introduction
- 00:42Saccharomyces cerevisiae Cell Culture
- 02:00EdU Labeling
- 02:40Cell Fixation and Permeabilization
- 03:20Click-It Reaction for Cytometry Analysis
- 06:32Results: Using EdU Labeling to Determine the S-Phase Duration in Saccharomyces cerevisiae
- 07:56Conclusion
Descrevemos dois protocolos complementares para determinar com precisão a duração da fase S em S. cerevisiae usando EdU, um análogo da timidina, que é incorporado in vivo e detectado usando a química Click por microscopia e citometria de fluxo. Ele permite a fácil caracterização da duração da replicação do DNA e defeitos de replicação negligenciados em mutantes.
