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November 11, 2022
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Dieses Modell ahmt das menschliche, soziale, isolierte Leben nach und ist eine nichtinvasive und einfache Möglichkeit, ein Modell für Angst und leichte kognitive Beeinträchtigung zu erstellen. Diese Technik erfordert nur die geeigneten Haltungsbedingungen und Behandlungsschnecken und erfordert keine langwierigen Prozesse wie Injektionen oder genetische Manipulation. Für die soziale Isolation der Tiere nehmen Sie einen Standard-Mauskäfig mit einer Quadratfläche von 75 Zoll.
Fügen Sie die Hälfte der Bettwäsche und ein quadratisches Stück Baumwolle zum Nisten hinzu. Wickeln Sie die Außenseite der Käfigwände in undurchsichtige schwarze Plastiktüten, ohne dass ein Segment des Beutels von innen zugänglich ist. Sichern Sie den Beutel mit Klebeband und stellen Sie sicher, dass die äußere Umgebung oder Umgebung des Tieres nicht sichtbar ist.
Lassen Sie die Ober- und Unterseite des Käfigs unverpackt, es sei denn, die Mäuse können benachbarte Tiere durch sie hindurch sehen. Halten Sie die Kontrollmäuse in Gruppen von zwei oder drei unter normalen Käfigbedingungen in einem Standard-Mauskäfig mit voller Menge Bettwäsche, einem zwei Zoll großen quadratischen Stück Baumwolle oder einem gleichwertigen Stück Baumwolle zum Nisten, ohne Umhüllung von undurchsichtigen Taschen. Stellen Sie sicher, dass die in der Gruppe untergebrachten Mäuse ohne Konflikte kompatibel sind.
Wenn nicht, schließen Sie den Angreifer von der Analyse aus. Wechseln Sie die Käfige nur einmal pro Woche während des Dunkelzyklus, wobei derselbe Plastikbeutel in einen neuen Käfig umgewickelt wird, es sei denn, es liegt ein erheblicher Schaden vor. Bei Kontrollmäusen wechseln Sie die Käfige zweimal pro Woche oder öfter während des Dunkelzyklus.
Isolieren Sie die Mäuse für mindestens vier Wochen, um die optimalen Ergebnisse zu beobachten. Um die Behandlung vorzubereiten, fügen Sie 3% Agar zu entionisiertem Wasser hinzu und lösen Sie es bei etwa 90 Grad Celsius mit einer Heizplatte oder Mikrowelle auf. Verhindern Sie, dass die sprudelnde Lösung verschüttet oder überkocht.
Schwenken Sie die Lösung, bis sie homogen wird. Während die Lösung noch warm ist, fügen Sie 5% Saccharose hinzu. Schwenken Sie die homogene Lösung, bevor Sie die Lösung in eine Form gießen.
Lassen Sie es abkühlen und erstarren Sie bei Raumtemperatur oder 4 Grad Celsius. Bei einer lichtempfindlichen Behandlung die Form vor Licht schützen. Nach dem Erstarren schneiden Sie den Agar in Würfel von 0,5 mal 0,5 mal 0,5 Zentimetern und lagern Sie ihn bis zur Verabreichung bei 4 Grad Celsius.
Verabreichen Sie die Behandlung zu geplantem Zeitpunkt und in der geplanten Häufigkeit mit so wenig Handhabung wie möglich. Legen Sie einen einzelnen Würfel ruhig und vorsichtig auf ein kleines Boot oder ein gleichwertiges Boot, wie die Kappe einer 50-Milliliter-Chronikröhre während der Dunkelphase des hellen Dunkelzyklus, ohne die Maus zu berühren. Lassen Sie die Maus das Agar verzehren.
Nachdem Sie den vollständigen Verbrauch des Agars bestätigt haben, entfernen Sie vorsichtig das Wegboot aus dem Käfig und wiederholen Sie dies bei Bedarf. Sozial isolierte Mäuse verbringen im Vergleich zur Kontrollgruppe signifikant weniger Zeit im offenen Arm und deutlich länger im geschlossenen Arm. Im Freilandtest legten sozial isolierte Mäuse weniger Strecken zurück, zogen sich weniger auf und verbrachten mehr Zeit in den Kurven.
In ähnlicher Weise verbrachten sie weniger Zeit im zentralen Bereich als die Kontrolle, was auf ein verstärktes angstähnliches Verhalten hinweist. Sozial isolierte Mäuse zeigten auch eine reduzierte Erkennung neuartiger Objekte und neuartiger Kontexte im Vergleich zur Kontrolle, was auf kognitive Beeinträchtigungen hindeutet. Diese Technik ermöglicht es uns, die Entwicklung von Angstzuständen und kognitiven Beeinträchtigungen und nicht nur das Ergebnis der Störungen zu untersuchen.
Hier wird ein durch soziale Isolation (SI) induziertes Angstmausmodell vorgestellt, das Wildtyp-C56BL / 6J-Mäuse verwendet, um Stress und angstähnliches Verhalten mit minimaler Handhabung und ohne invasive Verfahren zu induzieren. Dieses Modell spiegelt moderne Lebensmuster sozialer Isolation wider und ist ideal für die Untersuchung von Angstzuständen und verwandten Störungen.
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Watanabe, S., Al Omran, A., Shao, A. S., Liang, J. Social Isolation Model: A Noninvasive Rodent Model of Stress and Anxiety. J. Vis. Exp. (189), e64567, doi:10.3791/64567 (2022).
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