הדמיה לא פולשנית של דחיית שתל חריפה לאחר השתלת כליה באמצעות חולדה * These authors contributed equally

Medicine
 

Summary

אנחנו בזאת להציג מודל חולדה להשתלת כליה הלא פולשני להעריך דחיית שתל אקוטית באמצעות טומוגרפיה פליטת פוזיטרונים עם 18F-fluorodeoxyglucose.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Grabner, A., Kentrup, D., Schnöckel, U., Gabriëls, G., Schröter, R., Pavenstädt, H., Schober, O., Schlatter, E., Schäfers, M., Reuter, S. Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET. J. Vis. Exp. (74), e4240, doi:10.3791/4240 (2013).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

מספר החולים עם מחלת הכליה סופנית, ומספר מקבלי שתל בכליות מגדילים ברציפות. פרקים של דחיית שתל תאית חריפה (AR) הם גורם מנבא שלילי להישרדות שתל לטווח ארוך, ובמועד האבחנה שלו היא קריטית לתפקוד שתל 1. נכון לעכשיו, AR ניתן בהחלט מאובחן רק על ידי ליבת מחט ביופסיה, שכשיטה פולשנית, חושפת סיכון משמעותי של פגיעת שתל או אפילו הפסד. יתר על כן, ביופסיות הן לא ריאלי בחולי נוטלי תרופות נוגדות קרישה ואתר הדגימה המוגבלת של טכניקה זו עלולה לגרום לתוצאות שליליות שגויות אם AR הוא מוקד או בלתי סדיר. כתוצאה מכך, זה שהוליד את חיפוש מתמשך לשיטות זיהוי AR החדשים, אשר לעתים קרובות צריכה להיעשות בבעלי חיים, כולל שימוש במודלים שונים להשתלה.

מאז תחילת שנות ה -60 עכברוש השתלת הכליה היא שיטה ניסיונית מבוססת היטב לexamination וניתוח של AR 2. אנו מציגים בזאת בנוסף פליטת פוזיטרונים חיה קטנה פוזיטרונים (PET) באמצעות 18-F-fluorodeoxyglucose (FDG) כדי להעריך את AR במודל השתלה אלוגנאית uninephrectomized חולדת כליות ולהציע הדמיה FDG-PET שתל כאפשרות חדשה עבור לא פולשנית, ספציפית והאבחון המוקדם של א.ר. גם למצב האנושי 3. יתר על כן, בשיטה זו ניתן ליישם לצורך המעקב כדי לשפר את הניטור של דחיית השתלת 4.

Protocol

1. שחזור איברים תורם

  1. להגדיר את המיקרוסקופ stereotactic, שיא המשקל של העכברוש הזקן 8-10 השבוע (תורם ומשקל גוף נמען צריך להתאים).
  2. הרדימי עכברוש התורם (לואיס בראון נורבגיה F1, LBN F1) תוך שימוש בחמצן / שאיפת isoflurane (4% / / חמצן isoflurane 2 ליטר דקות). לשמור על הרדמה על ידי הורדת isoflurane ל2-2.5%.
  3. מניחים את החולדה מורדמת על כרית הניתוח. תקן את הגפיים של העכברוש עם דבק על הכרית ולהחיל משחת עיניים (Bepanthen, באייר) לעיניו של העכברוש.
  4. לגלח ולחטא את הבטן של החולדה ולבצע חתך קו האמצע הגחון מהחיק לגבול הזנב של הכבד. לחשוף את הכליה השמאלית וכליו על ידי העברת המעי בזהירות לצד ימין. מניחים יריעה דקה של גזה על הכליה השמאלית וללחלח אותו עם תמיסת מלח איזוטוני חימם כדי למנוע התייבשות.
  5. בזהירות לנתח את רקמת השומן עם מלקחיים קצה בזווית דומון (SS-דומוןמלקחיים 45 Inox רפואי, כלים מדע פיין, cat.no. 11,203-25) העוטף את השופכן השמאלי. הימנע מכל מגע ישיר עם שופכן, במקום זאת, לגייס אותו עם רקמת שומן סביב מספיק.
  6. הפרד את וריד הכליה השמאלי מעורק הכליה באמצעות מלקחיים עצה בזווית דומונט. הסר את כל רקמות שומן וחיבור משני כלי ולצרוב את כלי יותרת הכליה ואשכים.
  7. לנתח אב העורקים ווריד נבוב נחות (IVC) מעל ומתחת לצומת עם עורק הכליה השמאלי ווריד, בהתאמה, ולצרוב את כל העורקים היוצאים.
  8. הצמד את אב העורקים suprarenal עם מהדק microsurgical (המייקר Serrefines, כלים מדע פיין, cat.no. 18,055-04) מעל לעורק הכליה השמאלי, קרוב ככל האפשר לעורק mesenteric מעולה. ולקשור את אב העורקים באמצעות infrarenal משי כירורגית (5-0, Vömel, לא אמנות. 14739) כ 5 מ"מ מתחת לעורק הכליה השמאלי.
  9. לקשור IVC infrarenal עם משי כירורגית (5-0, Vömel), ומהדק את IVC suprarenalעם מהדק microsurgical (Serrefines מיקרו, כלים מדע פיין, cat.no. 18,055-03).
  10. חותכים את וריד הכליה קרוב ככל האפשר לIVC באמצעות מספריים עדינים (איריס מספריים - 11.5 ס"מ ToughCut סטרייט, כלים מדע פיין, cat.no. 14,058-11).
  11. לאט perfuse הכליות באתרו עם פתרון 2 מ"ל קר כקרח HTK זלוף (CUSTODIOL HTK, ד"ר פרנץ קוהלר Chemie) על ידי החדרת canula (Microlance 3 27G ¾, BD, cat.no. 302,200) באב עורקי infrarenal. ודא ששינויי צבע הכליות (עכשיו שחמחם).
  12. ראשית, transect אב העורקים suprarenal, ולאחר מכן אב העורקים infrarenal ולבסוף שופכן הקרוב ככל האפשר לשלפוחית ​​השתן.
  13. הסר את הכליות ואספקת הדם שלו, יחד עם השופכן והחנות בפתרון זלוף HTK על קרח.
  14. להרדים את עכברוש התורם על ידי הסרת את מהדק של כלי הדם והכריתה ברציפות של הלב תחת הרדמה.

2. נמען הכנה וTransplantation

  1. להגדיר את המיקרוסקופ stereotactic, שיא המשקל של החולדה.
  2. הרדימי עכברוש הנמען (לואיס) באמצעות 4% isoflurane. לשמור על הרדמה על ידי הורדת isoflurane ל2-2.5%.
  3. מניחים את החולדה מורדמת על כרית הניתוח. תקן את הגפיים של העכברוש עם דבק על הכרית ולהחיל משחת עיניים לעיני עכברוש `s. טמפרטורת גוף ליבה לפקח ולשלוט באמצעות חיישן טמפרטורה רקטלית וכרית חימום. במהלך ניתוח שוב ושוב לשלוט בטמפרטורה, נשימה וקצב לבו של בעל החיים.
  4. לגלח ולחטא את הבטן ולבצע חתך קו האמצע הגחון מהחיק לגבול הזנב של הכבד. השתמש forcutting אזמל העור על מנת למזער טראומת עור. לחשוף את הכליה השמאלית וכליו על ידי הזזת המעי לצד ימין.
  5. להסיר את הקפסולה הכליות באמצעות מלקחיים עצה בזווית דומון וצמר גפן בזהירות.
  6. לחסום את עורק הכליה השמאלי, ושופכן וריד בסמוך לכליותhilum עם שתי ligations באמצעות חוט כירורגית (Mersilene 4-0, Ethicon, חתול. לא. EH6732H). בלו חלק גדול יותר של הכליות, ומשאיר רק את hilum הכליות. נקה את פני השטח החתך עם צמר גפן ולבדוק לדימום. הוסף מייתר אחר במידת צורך.
  7. זהירות לנתח בוטות דרך רקמת חיבור המכסה את אב העורקים ווריד הנבוב infrarenal באתר הזנב עם צמר גפן.
  8. הפרד כל עצבים גלויים מאב העורקים ווריד הנבוב infrarenal באמצעות מלקחיים עצה בזווית דומונט.
  9. לנתח בזהירות מבעד לסדין רקמת חיבור בין אב העורקים ווריד הנבוב infrarenal, ויצר שני פתחים באורך 2-4 מ"מ: הראשונה מתחת להסתעפות של כלי האשכים, והשני מעל ההסתעפות של כלי הכסל המשותפים. לצרוב את העורקים וורידי iliolumbar שביניהם.
  10. צייר חוט כירורגית אחת (Mersilene 0;. Ethicon, חתול no.EH6665E) דרך כל אחד משני הפתחים. שימוש בנושאים אלה למשוך infrarenalאב העורקים ווריד נבוב בעדינות לצד ימינו של בעל החיים כדי לקבל גישה לכלי ההסתעפות באתר הגבי. לצרוב כל אחד מהכלים האלה בין שני הפתחים ולהסיר את החוטים כירורגית לאחר מכן.
  11. בשלב בא, אב העורקים ולחסום IVC על ידי יישום השעון של ארבעה מלחציים microsurgical (המייקר Serrefines, כלים מדע פיין, cat.no. 18,055-04) מתחילים בפתיחה העליונה עם אב העורקים וכלה בווריד הנבוב העליונה בפתיחה (המייקר Serrefines , כלי מדע פיין, cat.no. 18,055-03).
  12. לאחר מכן בזהירות פירס הסוף העליון של חלק המבודד של אב העורקים עם מחט (Microlance 3 27G ¾, BD, cat.no. 302,200), להכניס את הלהב התחתון של מספריים אביב נאה (מספריים אביב Vannas - 3 להבי מ"מ, פיין מדע כלים, cat.no 15,000-00) דרך הפתח לנקב ולבצע חתך אורכי קצר. לשטוף את אב העורקים מבודדים עם פתרון זלוף HTK קר כקרח כדי להסיר כל דם שנותר.
  13. כמו כן, בזהירות פירסהסוף התחתון של חלק המבודד של הווריד נבוב עם מחט, הכנס את הלהב התחתון של מספריים אביב נאה דרך הפתח לנקב ולבצע חתך אורכי שהסתיימו זמן קצר מתחת לחתך אב העורקים. שוב, שטוף את הכלי כדי להסיר כל דם שנותר.
  14. הסר את שתל הכליה מפתרון האחסון. הנח אותו מתחת לעמדה לשעבר של הכליה השמאלית, ולוודא שהיא מונחת בכיוון נכון.
  15. בדוק את הכיוון של עורק הכליה השתלים ולהבטיח שאין פיתולים. לאחר מכן הנח שכבה דקה של גזה על השתל וללחלח אותו עם פתרון זלוף HTK קר כקרח כדי לקרר אותו, ועל מנת למנוע התייבשות.
  16. לקבע את פתיחת חלק suprarenal של יצירת אב העורקים שבעורק הכליה של השתל פותח לעם חוט כירורגית (Ethilon 9-0, Ethicon, חתול לא 2809G..) - הראשונה בבית העליון, ולאחר מכן בקצה התחתון של חתך אב העורקים. סגירה החתך בכיוון השעון עם תפר מתמשך באמצעות חוט כירורגית(Ethilon 9-0), מלקחיים דומון בזווית עצה ובעל מחט Castroviejo מעוגל (כלים מדע פיין, חתול. לא. 12,061-01). לאחר מכן, לכסות את התפר הראשון עם רקמת חיבור דרך תפר מתמשך שני נגד כיוון השעון. עכשיו, רק את החלק התחתון של פיסת אב העורקים של השתל נותר סגור. באופן קבוע לקרר את השתל עם קר כקרח פתרון זלוף HTK.
  17. Perfuse השתל עם 1 מ"ל של קר כקרח פתרון זלוף HTK באמצעות מחט בוטה מוכנסת לתוך הקצה הפתוח של אב העורקים שתלי חתיכת אימות אטימות והיושרה של התפר, כמו גם הסרת דם שנותר בשתל. לאחר מכן, לקשור את הקצה הפתוח של אב העורקים עם חתיכת משי כירורגית (5-0, Vömel).
  18. בדוק את הכיוון של עורק הכליה שתלים ולהבטיח שאין פיתולים.
  19. לקבע את פתיחת הווריד של השתל עם חוט כירורגית (Ethilon 9-0) - ראשון בבית העליון, ולאחר מכן בקצה התחתון של החתך בווריד הנבוב. סגירה החתךבכיוון השעון עם תפר מתמשך באמצעות חוט כירורגית (Ethilon 9-0), מלקחיים עצה בזווית דומון ובעל מחט Castroviejo מעוקל. באופן קבוע לקרר את השתל עם קר כקרח פתרון זלוף HTK.
  20. נגד כיוון השעון להסיר את מהדק microsurgical, החל במהדק הווריד הנבוב העליון. לאחר הסרת מהדק אב העורקים שעבר, לעצור בזהירות סופו של דבר דימום קל עם צמר גפן. לאחר מספר שניות את השתל יהפוך ורודה כהה, והתכווצויות uretric אמורות להופיע.
  21. להחדרה שתלי של השופכן לתוך שלפוחית ​​השתן של נמען ג `להסיר תיקון קטן של השרירים בזהירות בחלק העליון של שלפוחית ​​השתן באמצעות מספריים אביב Vannas (כלים מדע פיין סטודנטים מספריים אביב Vannas ישר,, cat.no. 91,500-09 ). לאחר מכן, להסיר רקמות (בעיקר שומן) משופך השתל באמצעות מלקחיים עצה בזווית דומונט. לכן, בזהירות לתפוס את הקצה של השופכן ובעדינות להפריד את רקמת השומן, חיבור המקיף הלוך ושוב את כלי המשובציםמ 'אותו על ידי משייכתם בכיוון ההפוך. לקבע את קצה uretric בסוף חוט כירורגית (Prolene 6-0, Ethicon, חתול. לא. 8697H) ולנקב העליון הכין בעבר של שלפוחית ​​השתן עם המחט המצורפת. משוך את השופכן דרך שלפוחית ​​השתן ולצאת אותו בבסיס דרך נקב שני.
  22. לקבע בעבר מהשופכן מופרד רקמה בחלק העליון של שלפוחית ​​השתן עם חוט כירורגית (Ethilon 9-0). חותכים את הקצה של השופכן עם החוט כירורגית המצורף ולמשוך בחזרה השופכן לתוך שלפוחית ​​השתן על ידי בעדינות דוחף מלמטה. לאחר מכן, סגור את ניקור שלפוחית ​​השתן השני עם חוט כירורגית (Ethilon 9-0).
  23. סגור את הקיר ועור הבטן על ידי שני תפרים רצופים אך נפרדים באמצעות חוט תפירה כירורגית (Mersilene 0). לחטא את הפצע בעזרת יוד Pividon ולנהל עצירות (0.1 מ"ג לכל ק"ג / BW / הצעה) SC במשך שלושה ימים לאחר ניתוח כדי לשלוט בכאב פצע.

3. דחיית שתל הדמיה

  1. הרדימי עכברוש ללא צום באמצעות 2-2.5% isoflurane.
  2. 30 MBq FDG (30 MBq FDG ב0.1 מ"ל של 0.9% NaCl) מנוהל IV דרך catheterizing וריד זנב לרוחב באמצעות 24 G קטטר (בראון, Introcan, 4,252,500-01). לאחר מכן, לטהר את הקטטר עם פתרון NaCl 0.9% 0.9 מ"ל.
  3. השאר את העכברוש בעוצר ללא הרדמה עד תחילת הסריקה ומימה בעלי החיים על ידי הזרקת IV של 1 מ"ל של 0.9% NaCl פתרון לפי שעה.
  4. עכברוש מחדש הרדם באמצעות 2% isoflurane מייד לפני הסריקה מתחילה.
  5. הנח עכברוש הרדים ברזולוציה גבוהה המבוסס על תא מרובה חוט חי המחמד המצלמה quadHIDAC (אוקספורד פוזיטרונים מערכות בע"מ, אוקספורד, אנגליה). הרזולוציה מרחבית של סורק PET היא 1.0 מ"מ, והוא קבוע לאורך כל FOV (קוטר, 165 מ"מ, אורך צירי, 280 מ"מ). טמפרטורת גוף לפקח ולשלוט במהלך הסריקה באמצעות חיישן טמפרטורה רקטלית והרדמת שליטה עם oxymeter דופק.
  6. התחל רכישה דינמית עבור 60 מ 'בהתחלת 180 דקות לאחר הזרקת FDG-להפחית הצטברות נותב בכליות שנגרמו על ידי הפרשת כליות של FDG.
  7. החל 5 MBq של 18-F-IV פלואוריד ולבצע סריקת PET אחרת מייד לאחר הזרקת ה-F-18 פלואוריד למשך 60 דקות מבלי להזיז את מיקומו של העכברוש בסורק לזיהוי הכליות parenchyma ולחישוב ה-F-18 אישור 5. לשחזר תמונות משני הסריקות. מעקב באופן ידני נפח של עניין (VOI) על תמונות משוחזרות 2 דקות לאחר הזרקת ה-F-18 פלואוריד (זלוף שלב) סביב קליפת כליה ולהעביר את התמונות לVOI FDG. להוציא את אגן הכליה מVOI בזהירות. לשחזר תמונות משני הסריקות ולאתר באופן ידני נפח של עניין (VOI) סביב קליפת כליה. נתונים רשימה של מצב שוחזרו לתוך תמונות עם גודל voxel של 0.4 × 0.4 × 0.4 מ"מ 3. להוציא את אגן הכליה מVOI בזהירות.
  8. לחשב ספיגת FDG לפי היחס Of ספירה כלל ונפח ולחשב את אחוז החומר מוזרק (% ID). אנחנו השתמשנו MATLAB (גרסת R2011b, MathWorks, Natick, מסצ'וסטס, ארה"ב) והדמיה טומוגרפית גרסה (TIM) 2.8 לניתוח תמונה.

Representative Results

היסטולוגיה

במהלך לויקוציטים AR, כלומר בעיקר לימפוציטים מגויסים להשתלה, ואילו את חומרת הדחייה מתבטאת במידה המסוימת של דלקת. בצביעה (PAS) תקופתית, חומצה שיף המתוארת כאן (איור 1), שתל הכליה מראה סימנים היסטולוגית משמעותיים של AR, כלומר glomerulitis, tubulitis, endothelialitis וחדירת השתל (איור 1, ATX POD4) (POD = יום לאחר ניתוח) בעוד סימנים של דחייה נעדרים בכליות שליטת ילידים (איור 1, שק"ל), תאים שחדרו שתל הם תאים פעילים מטבולית מאוד אשר צורכים כמויות גדולות של גלוקוז. עם זאת, אם באפשרות השנייה הוא להחליף עם FDG, זה יצטבר בתאים וניתן למדוד ולכמת על ידי חיית המחמד.

תמונות PET

תמונות חיות מחמד נציג של כל רכישות גוף דינמיות של סדרה של אלהושתל logeneically עכברוש לאחר הזרקה לוריד זנב של 30 MBq FDG (מקסימום היטל מפה אחורי, 180 דקות pi) (איור 2). הפצת FDG טיפוסית נמצאת עם הצטברות פיזיולוגית מובחנת במוח, לב, מוח עצם ובלוטות harderian. יתר על כן, ללא תשלום filtrated FDG מצטבר בדרכי השתן. בשתלי כליה שעברו AR parenchyma (העיגול צהוב, כליה שמאלית) מאוד מצטבר FDG עם מקסימום על POD4, ואילו כליות ילידים (העיגול ירוק, כליה ימנית) לא מראות שום הצטברות בכלל. מאז אגן הכליה יכול להכיל FDG בוטל בחינם, זה לא נכלל במדידות נוספות. איור נלקח מ3.

הערכה כמותית

להערכה כמותית תמונות שוחזרו, כרכים של עניין נעוצים באופן ידני סביב הכליות פי 18 זלוף F-פלואוריד ומוקרנים על תמונות FDG. לאחר ההרחקה של PE הכליותlvis מתכוון ספיגת FDG בparenchyma הכליות הייתה מחושבת על ידי היחס בין הספירות כלל לעוצמת קול (% מזהה ± SEM). כליות המתפתחות AR הראו FDG גדל באופן משמעותי על הצטברות POD4 (0.8 ± 0.06%) בהשוואה לקבוצת ביקורת (0.2 ילידי ± 0.02%) או כליות המושתלות syngeneically (0.37 ± 0.04%). יתר על כן, שתי אבחנות עיקריות דיפרנציאלית של AR, נימק אבובית כלומר אקוטית כמו באיסכמיה / פגיעת reperfusion (IRI) (0.31 ± 0.02%) ואקוטית calcineurin מעכב רעילות (CSA) (0.16 ± 0.01%) לא הראו הצטברות מוגבהת וFDG לכן ניתן להבחין בין AR (איור 3 נלקח מ 3).

איור 1
איור 1. היסטולוגיה. סימנים של דחייה חריפה, כלומר glomerulitis, tubulitis, endothelialitis, וחדירת שתל, נמצאו בקבוצת השתל (ATX) ונעדר לחלוטין בכליות שליטה (CTR).

איור 2
איור 2. תמונת FDG-PET. נציג PET-תמונות של כל רכישות גוף דינמיות של סדרה של עכברוש allogeneically מושתל. בהשוואה לכליות בקרה (עיגולים ירוקים) מצטבר parenchyma של allografts כליות (עיגולים צהובים) FDG עם מקסימום על POD4. מאז אגן הכליה יכול להכיל FDG בוטל חופשי זה לא נכלל במדידות. איור נלקח מ3.

איור 3
איור 3. הערכה כמותית. איתור של דחייה חריפה על ידי מדידה של% זיהוי של FDG. allografts כליות (ATX) מפגין F גבוה יותר משמעותיהצטברויות DG מכליות שליטה (CTR), syngeneically allografts (STX), כליות עם נמק חריף אבובית (ATN) או כליות עם רעילות מעכב חריפה calcineurin (CSA) עם מקסימום על POD4 (ATX: 0.8 ± 0.06% CTR: 0.2 ± 0.02 %, STX: 0.37% ± 0.04%, ATN: 0.31% ± 0.02%, CSA: 0.16 ± 0.01%). איור נלקח מ3.

Discussion

FDG-PET הדמיה היא אופציה חדשה לאבחון של דחייה חריפה. בגלל האופי פולשני וספציפי שלה, FDG-PET הוא יתרונות בהשוואה לאבחון על ידי הקלסיים ליבת מחט ביופסיה. בניגוד לגודל המדגם המצומצם של ביופסיה, ניתוח FDG-PET כל השתל. יתר על כן, ניתן להחיל אותו על מטופלים בתרופה נוגדת קרישה, ואחד יכול לבצע צעדי PET גו שוב ושוב כדי לפקח על יעילות טיפול 4. בנוסף, יש לנו כבר הראה כי שתיים אבחנה מבדלת עיקרית של AR, נמק אבובית כלומר חריף הנגרם על ידי פגיעת reperfusion איסכמיה ורעילות מעכב calcineurin חריפה, יכולה להיות מובחנת מAR באמצעות FDG-PET 3. מאז FDG-PET הדמיה דורשת כמויות נמוכות יחסי של פעילות והדמיה של או חולים ו / או בחולים עם תפקוד כלייתי לקוי השתלה אינה קשור לעלייה בסיכון לסיבוכים חמורים ניתן להעביר את הגישה הזו בקלותבשגרה קלינית יומיומית.

עם זאת, יש לזכור כי FDG הוא נותב ולא שאינם ספציפי להערכת פעילות המטבולית אזורית. לכן, זיהום או גידולי שתל עשוי להוביל לתוצאות חיוביות כוזבות גם כן. ניקוז של FDG לתוך אגן הכליה יכול להיות בעיה כאשר להערכת ספיגת FDG בparenchyma הכליות. לכן, בחרתי בזמן רכישה באיחור של שלוש שעות לאחר הזרקה כדי להפחית את ההצטברות נותב בכליות שנגרמו על ידי הפרשת כליות של FDG. בנוסף, יש לו את אגן הכליה שלא להיכלל בזהירות כאשר כימותי ספיגת FDG הכליות. לדברי PET פרוטוקול זה יכול לשמש כדי לזהות הלא פולשני AR, כדי להבדיל אותו מATN וCSA, ולבצע חקירות סדרתי למעקב או להערכת יעילות טיפול 3, 4, 6. PET באמצעות F-18 פלואוריד שימושי גם להעריך (פיצול) בתפקוד הכלייתי על ידי חישוב אישור פלואוריד הכליות כנץ שפורסםעפרות 5.

מודל השתלת הכליה אלוגנאית באמצעות LBN F1 התורם ולואיס נמען חולדות הוא מודל אידיאלי לחקירה של דחיית שתל תאית חריפה. בהעדרו של דיכוי חיסוני כליות השתל לפתח סימנים היסטולוגית טיפוסיים של AR לפי סיווג אנף 7. יתר על כן, בהתאם לשיטה שנבחרה (חד לעומת binephrectomized 3 השתלה, 8-10) ניתן להעריך נתונים מטבוליים, כמו גם לפקח על תפקוד שתל. בשל העדר הטיפול לדיכוי המערכת החיסונית, פצע או זיהומים מערכתיים של החולדות הם נדיר ביותר. סיבוכים כירורגיים נפוצים של מודל זה כוללים היצרות כלי שיט, נראות בעיקר בנקודות הכניסה של כלי השתל לתוך אב העורקים או ICV של הנמען. הדבר זה עלול לגרום לאיסכמיה או פקקת שתל. אפשר להימנע מסיבוך זה על ידי שימוש בחתכים ארוכים יותר באב העורקים וIVC. לפעמים uremia נמצא בשל כישלון שתל או uדליפת reter נגרמת על ידי נמק השופכן או ניתוק של השופכן משלפוחית ​​השתן. אם סימנים של uremia אדישות, אובדן תיאבון או למשל עלייה במשקל מתרחשים ספונטנית, צריכים להיות מורדמים את בעלי החיים באופן מיידי.

Disclosures

אין ניגודי האינטרסים הכריזו.

Acknowledgments

עבודה זו נתמכה על ידי Forschungsgemeinschaft דויטשה (656 SFB, מינסטר, גרמניה, פרויקטים וC7 C6) ומינסטר IZKF (Core היחידה SMAP). המחברים מודים לTruc ואן לה, אן Kanzog, אוטה Neugebauer, יבקה Gottschlich וPriebe הרומי לקבלת סיוע טכני ומצוין לדניאל Burkert וסוון Fatum לייצור radiotracers.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Equipment
Mathieu Needle Holder - 14 cm Fine Science Tools 12010-14
Castroviejo Micro Needle Holder - 9 cm Fine Science Tools 12061-01
Surgical Scissors - Sharp_Blunt Fine Science Tools 14001-12
Iris Scissors - ToughCut Straight 11.5 cm Fine Science Tools 14058-11
Student Vannas Spring Scissors Fine Science Tools 91500-09
Vannas Spring Scissors - 3 mm Blades Fine Science Tools 15000-00
Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm Fine Science Tools 91121-12
Dumont SS-45 Forceps - Inox Medical Fine Science Tools 11203-25
Micro-Serrefine Clip Applicator with Lock Fine Science Tools 18056-14
Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm Fine Science Tools 18055-03
Micro-Serrefine 4 mm x 0.75 mm Fine Science Tools 18055-04
Reagent
Isoflurane (e.g. Forene 100% v/v) Abott
cutane antiseptic (e.g. Octeniderm) Schülke
Povidone Iodine (e.g. Betaisodona) Mundipharma
ophthalmic ointment (e.g. Bepanthen) Bayer
Buprenorphin (e.g. Temgesic) RB Pharmaceuticals
HTK perfusion solution (e.g. CUSTODIOL HTK) Dr. Franz Köhler Chemie
surgical thread Mersilene 0 Ethicon EH6665E
surgical thread Mersilene 4-0 Ethicon EH6732H
surgical thread Prolene 6-0 Ethicon 8697H
surgical thread Ethilon 9-0 Ethicon 2809G
surgical silk 5-0 Vömel 14739
Canula (e.g. Microlance 3, 27G ¾) BD 302200

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature. Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).
  2. Miller, B. F., Gonzales, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. Kidney transplantation in the rat. Nature. 194, 309-310 (1962).
  3. Reuter, S., Schnöckel, U., Schröter, R., Schober, O., Pavenstädt, H., Schäfers, M., Gabriëls, G., Schlatter, E. Non-invasive imaging of acute renal allograft rejection in rats using small animal F-FDG-PET. PLoS. One. 4, e5296 (2009).
  4. Reuter, S., Schnöckel, U., Edemir, B., Schröter, R., Kentrup, D., Pavenstädt, H., Schober, O., Schlatter, E., Gabriëls, G., Schäfers, M. Potential of noninvasive serial assessment of acute renal allograft rejection by 18F-FDG PET to monitor treatment efficiency. J. Nucl. Med. 51, 1644-1652 (2010).
  5. Schnöckel, U., Reuter, S., Stegger, L., Schlatter, E., Schäfers, K. P., Hermann, S., Schober, O., Gabriëls, G., Schäfers, M. Dynamic 18F-fluoride small animal PET to noninvasively assess renal function in rats. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 35, 2267-2274 (2008).
  6. Grabner, A., Schnöckel, U., Kentrup, D., Schäfers, M., Reuter, S. Strategies for Non-Invasive Molecular Imaging of Acute Allograft Rejection by Gamma Scintigraphy and Positron Emission Tomography. Curr. Radiopharm. 4, 10-23 (2011).
  7. Racusen, L. C., Solez, K., Colvin, R. B., Bonsib, S. M., Castro, M. C., Cavallo, T., Croker, B. P., Demetris, A. J., Drachenberg, C. B., Fogo, A. B., et al. The Banff 97 working classification of renal allograft pathology. Kidney Int. 55, 713-723 (1999).
  8. Edemir, B., Reuter, S., Borgulya, R., Schröter, R., Neugebauer, U., Gabriëls, G., Schlatter, E. Acute rejection modulates gene expression in the collecting duct. J. Am. Soc. Nephrol. 19, 538-546 (2008).
  9. Velic, A., Gabriëls, G., Hirsch, J. R., Schröter, R., Edemir, B., Paasche, S., Schlatter, E. Acute rejection after rat renal transplantation leads to downregulation of Na+ and water channels in the collecting duct. Am. J. Transplant. 5, 1276-1285 (2005).
  10. Reuter, S., Velic, A., Edemir, B., Schröter, R., Pavenstädt, H., Gabriëls, G., Bleich, M., Schlatter, E. Protective role of NHE-3 inhibition in rat renal transplantation undergoing acute rejection. Pflugers Arch. 456, 1075-1084 (2008).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics