쥐 신장 이식 후 급성 동종 이식 거부의 비 침습 이미징 사용 * These authors contributed equally

Medicine
 

Summary

우리는 여기에서 비 침습적 18F-fluorodeoxyglucose와 양전자 방출 단층 촬영을 이용하여 급성 이식 거부 반응을 평가하기 위해 쥐의 신장 이식 모델을 제시한다.

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Grabner, A., Kentrup, D., Schnöckel, U., Gabriëls, G., Schröter, R., Pavenstädt, H., Schober, O., Schlatter, E., Schäfers, M., Reuter, S. Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET. J. Vis. Exp. (74), e4240, doi:10.3791/4240 (2013).

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Abstract

말기 신장 질환 환자의 수, 신장 이식 수혜자의 수는 지속적으로 증가한다. 급성 세포 동종 이식 거부 (AR)의 에피소드 장기 이식 생존을위한 부정적인 예후 인자이며, 적시에 진단 이식 기능 1 중요합니다. 현재, AR은 확실히 침략 방법으로, 이식 부상 또는 손실이 상당한 위험을 드러낸다, 코어 생검에 의해 진단 할 수 있습니다. 또한, 생검은 AR이 초점 또는 누덕 누덕 기운 경우 위음성 결과를 초래할 수 있습니다 항응고제 약물과이 기술의 제한된 샘플링 사이트를 복용하는 환자에서 가능하지 않습니다. 결과적으로, 이것은 종종 다양한 이식 모델의 사용을 포함하여 동물에서 수행해야하는 새로운 AR 탐지 방법에 대한 지속적인 검색에 상승했다.

60 년대 쥐의 신장 이식 대해 조사를 위해 잘 확립 된 실험 방법이기 때문에AR 2 ATION 및 분석. 또한 작은 동물 양전자 방출 단층 촬영 (PET)은 동종 uninephrectomized 쥐의 신장 이식 모델에서 AR을 평가하고 비 침습, 특정의 새로운 옵션으로 이식 FDG-PET 영상을 제안하는 18 F-fluorodeoxyglucose (FDG)를 사용하여에 우리는 여기에 존재 인간의 상황을 3도 AR과 조기 진단. 또한,이 방법은 이식 거부 4 모니터링을 개선하기 위해 후속 적용 할 수 있습니다.

Protocol

1. 기증자의 장기 복구

  1. 정위 현미경, 8-10 주 된 쥐 (기증자와받는 사람의 체중이 일치해야합니다)의 기록 중량을 설정합니다.
  2. 기증자 쥐 (루이스 브라운 노르웨이 F1, LBN F1)은 산소 / isoflurane을 흡입 (isoflurane을 4 % / 2 L / 분 산소)를 사용하여 마취. 2-2.5 %로 isoflurane을 낮추는 방법으로 마취를 유지합니다.
  3. 수술 패드에 마취 쥐를 놓습니다. 패드에 접착 테이프를 가진 쥐의 사지를 고정하고 쥐의 눈에 안과 연고 (Bepanthen, 바이엘)을 적용합니다.
  4. 면도 쥐의 복부를 소독하고 치골에서 간 꼬리 국경 복부 정중선 절개를 수행합니다. 주의 깊게 오른쪽으로 대장으로 이동하여 왼쪽 신장과 혈관을 노출합니다. 왼쪽 신장에 거즈의 얇은 시트를 배치하고 건조를 방지하기 위해 예열 등장 식염수로 적시십시오.
  5. 조심스럽게 (뒤몽 각도 팁 집게로 지방 조직을 해부 몬트 SS-45 집게 이녹스 의료, 파인 과학 도구, cat.no. 11203-25) 좌측 요관을 포위. 요관과의 직접적인 접촉을 피 대신에, 충분한 주변의 지방 조직으로 동원.
  6. 뒤몽 각도 팁 집게를 사용하여 신장 동맥에서 좌측 신장 정맥을 분리합니다. 두 선박의 모든 지방과 결합 조직을 제거하고 부신과 고환 혈관을 부식.
  7. 각각 왼쪽 신장 동맥과 정맥에 이상과 접합 아래의 대동맥과 하대 정맥 (IVC)를 해부하고, 모든 나가는 동맥을 부식.
  8. 장간막 동맥 근처에 최대한의 왼쪽 신장 동맥 위에 미세 클램프 (마이크로 Serrefines, 파인 과학 도구, cat.no. 18055-04)와 부신 대동맥 클램프. 수술 실크를 사용하여 infrarenal 대동맥 (5-0, Vömel, 예술 아니오. 14739) 왼쪽 신장 동맥 아래 약 5mm를 결찰.
  9. 수술 실크 infrarenal IVC (5-0, Vömel)을 결찰하고, 부신 IVC 클램프미세 클램프 (마이크로 Serrefines, 파인 과학 도구, cat.no. 18055-03).
  10. 좋은 가위 (- ToughCut 스트레이트 11.5 cm, 파인 과학 도구, cat.no. 14058-11 아이리스 가위)를 사용하여 가능한 한 가깝게 IVC에 신장 정맥을 잘라.
  11. 천천히 삽입하여 2 ㎖ 얼음처럼 차가운 HTK 관류 용액 (CUSTODIOL HTK, 프란즈 쾰러 케미)와 현장에서 신장을 붓는다 canula (Microlance 3 27G ¾, BD, cat.no. 302200) infrarenal 대동맥합니다. 확인하는 신장 색상 변경 (현재 올리브 색을 칠한).
  12. 먼저, 다음, infrarenal 대동맥 부신 대동맥을 절개하고 최대한 가까이 방광에 마지막으로 요관.
  13. 얼음 HTK 관류 용액에 요관 및 저장과 함께 신장과 혈관 공급 장치를 제거합니다.
  14. 혈관 클램프 및 마취 마음의 연속 절단을 제거하여 기증자의 쥐를 안락사.

2. 받는 사람 준비 및 이식을TION

  1. 정위 현미경, 쥐의 기록 중량을 설정합니다.
  2. isoflurane을 4 %를 사용하여받는 사람 쥐 (루이스)를 마취. 2-2.5 %로 isoflurane을 낮추는 방법으로 마취를 유지합니다.
  3. 수술 패드에 마취 쥐를 놓습니다. 패드에 접착 테이프를 가진 쥐의 사지를 고정하고 쥐의 눈에 안과 연고를 적용합니다. 직장 온도 센서와 온난화 패드를 사용하여 모니터 및 제어 체온. 수술하는 동안 반복적으로 온도, 호흡과 동물의 심장 박동을 제어합니다.
  4. 면도 복부를 소독하고 치골에서 간 꼬리 국경 복부 정중선 절개를 수행합니다. 피부 외상을 최소화하기 위해 메스 forcutting에게 피부를 사용합니다. 오른쪽에 소장을 이동하여 왼쪽 신장과 혈관을 노출합니다.
  5. 조심스럽게 뒤몽 각도 팁 집게와 면봉을 사용하여 신장 캡슐을 제거합니다.
  6. 신장에 가까운 왼쪽 신장 동맥, 정맥과 요관을 막다수술 실 (4-0 Mersilene, ETHICON, 고양이. 아니. EH6732H)를 사용하여 두 ligations와 종자의 배꼽. 만 신장 종자의 배꼽을 떠나는 신장의 소비세 큰 부분. 면봉 잘라 표면을 청소하고 출혈을 확인합니다. 필요한 경우 다른 합자를 추가합니다.
  7. 조심스럽게 면봉 꼬리 사이트에 infrarenal 대동맥과 하대의 맥을 덮고있는 결합 조직을 통해 퉁명스럽게 해부.
  8. 뒤몽 각도 팁 집게를 사용 infrarenal 대동맥과 대정맥에서 눈에 띄는 신경을 분리합니다.
  9. 먼저 고환 혈관의 분기 아래에, 그리고 일반적인 장골 혈관의 분기 위의 두 번째 하나를 조심스럽게 두 2-4mm 길이 구멍을 형성 infrarenal 대동맥과 대정맥 사이의 결합 조직 시트를 해부. 사이 iliolumbar 동맥과 정맥을 부식.
  10. 두 구멍의 각을 통해, 하나의 수술 실 (ETHICON, 고양이 no.EH6665E. Mersilene 0)를 그립니다. 이 스레드 infrarenal 당겨 사용부드럽게 지느러미 사이트에 분기 혈관에 대한 액세스를 얻을 수있는 동물의 우측 대동맥과 대정맥. 두 구멍 사이의 이러한 혈관 중 하나를 부식하고 이후 수술 스레드를 제거합니다.
  11. 다음으로, 대동맥과 상 오프닝에서 시작하여 상부 개구부 (마이크로 Serrefines에서 대정맥으로 끝나는 개의 미세 클램프 (마이크로 Serrefines, 파인 과학 도구, cat.no. 18055-04)의 방향으로 응용 프로그램에 의해 대동맥과 IVC를 막다 , 파인 과학 도구, cat.no. 18055-03).
  12. 그 후 조심스럽게 피어스 바늘 대동맥의 고립 된 부분의 위쪽 끝 (Microlance 3 27G ¾, BD, cat.no. 302200)는 고급 스프링 가위 (Vannas 봄 가위의 아래쪽 블레이드를 삽입 - 3mm 블레이드, 미세 과학 천자 구멍을 통해 도구 cat.no 15000-00)과 짧은 세로 절개를 수행합니다. 남아있는 혈액을 제거하는 얼음처럼 차가운 HTK 관류 용액으로 격리 된 대동맥을 세척합니다.
  13. 마찬가지로,주의 깊게 관통바늘로 대정맥의 절연 부분의 하단 끝은 천자 구멍을 통해 좋은 봄 가위의 아래쪽 블레이드를 삽입하고 곧 대동맥 절개 아래에 끝나는 세로 절개를 수행합니다. 다시 남아있는 혈액을 제거하는 용기를 세척하십시오.
  14. 스토리지 솔루션에서 신장 이식을 제거합니다. 왼쪽 신장의 이전 위치를 아래에 배치하고 방향이 올바른지 확인합니다.
  15. 이식 신장 동맥의 방향을 확인하고 꼬임이 없는지 확인합니다. 다음 이식에 거즈의 얇은 시트를 배치하고 냉각하는 얼음처럼 차가운 HTK 관류 솔루션을 적시고 건조를 방지 할 수 있습니다.
  16. 위의 첫 번째, 다음의 하단에 - 이식 신장 동맥 수술 실 (.. Ethilon 9-0, ETHICON, 고양이없이 2809G)와에 열립니다하는 대동맥 조각의 부신 부분의 구멍을 흥분시키는 대동맥 절개. 수술 스레드를 사용하여 연속 봉합 시계 방향으로 절개를 닫습니다(Ethilon 9-0), 뒤몽 각도 팁 포셉과 곡선 Castroviejo 바늘 홀더 (파인 과학 도구, 고양이. No. 12061-01). 그 후, 시계 반대 방향으로 두 번째 연속 봉합을 통해 결합 조직에 첫 번째 봉합사를 다룹니다. 지금 이식의 대동맥 부분 만 아래 부분 폐쇄 남아 있습니다. 정기적으로 얼음처럼 차가운 HTK 관류 솔루션 이식을 냉각.
  17. 봉합의 압박감과 무결성을 검증뿐만 아니라 이식에 남아있는 혈액을 제거 이식 대동맥 조각의 오픈 엔드에 삽입 무딘 바늘을 통해 얼음처럼 차가운 HTK 관류 용액 1 ㎖로 이식을 붓는다. 그 후, 수술 실크 대동맥 조각 (5-0, Vömel)의 열린 끝을 결찰.
  18. 이식 신장 정맥의 방향을 확인하고 꼬임이 없는지 확인합니다.
  19. 대정맥의 절개의 하단에 다음, 상단의 첫 번째 - 외과 실 (Ethilon 9-0)와 이식 혈관의 개통을 흥분시키는. 절개를 닫습니다수술 실 (Ethilon 9-0), 뒤몽 각도 팁 포셉과 곡선 Castroviejo 바늘 홀더를 사용하여 연속 봉합으로 시계 방향으로 돌립니다. 정기적으로 얼음처럼 차가운 HTK 관류 솔루션 이식을 냉각.
  20. 맨 대정맥 클램프로 시작, 미세 클램프를 제거 반대. 마지막 대동맥 클램프를 제거한 후 조심스럽게 면봉 결국 가벼운 출혈을 중지합니다. 몇 초 후에 이식은 장미 빛 착색 설정하고, uretric 수축이 나타납니다.
  21. 받는 사람`의 방광에 이식의 요관 삽입 신중 Vannas 봄 가위로 자른다 (학생 Vannas 봄 가위 직선, 파인 과학 도구, cat.no. 91500-09를 사용하여 방광의 상단에있는 근육의 작은 패치를 제거한다 ). 그런 다음 뒤몽 각도 팁 집게를 사용하여 이식 요관에서 주변 조직을 (주로 지방)를 제거합니다. 따라서 신중하게 요관의 끝을 잡고 조심스럽게 주변의 지방, 결합 조직을 분리하고 내장 혈관 아프로반대 방향으로 잡아 당겨 m. 수술 실 (Prolene으로 6-0, ETHICON, 고양이. No. 8697H)의 끝에 uretric 끝을 흥분시키는과 연결된 바늘로 방광의 이전 준비 상단을 관통. 방광을 통해 요관을 당겨 두 번째 천공을 통해 기지를 종료합니다.
  22. 수술 실 (Ethilon 9-0)와 방광의 상단에 조직을 분리 요관에서 이전을 흥분시키는. 첨부 외과 스레드와 요관의 끝을 잘라 조심스럽게 아래에서 밀어 방광에 다시 요관을 당깁니다. 그 후, 수술 실 (Ethilon 9-0)와 두 번째 방광 천자를 닫습니다.
  23. 수술 봉합 실 (Mersilene 0)를 사용하여 두 개의 연속하지만 별도의 봉합하여 복벽과 피부를 닫습니다. Pividon 요오드를 사용하여 상처를 소독하고 상처의 통증을 제어하기 위해 수술 후 3 일 동안 부 프레 노르 핀 (㎏ / BW / 입찰 당 0.1 밀리그램) SC를 관리 할 수​​ 있습니다.

3. 영상 동종 이식 거부

  1. isoflurane을 2-2.5 %를 사용하여 공복 쥐를 마취.
  2. 30 MBq FDG (0.1에서 30 MBq FDG ML 0.9 % 염화나트륨)는 24 G 카테터를 (브라운, Introcan, 4252500-01)를 사용하여 측면 꼬리 정맥을 catheterizing을 통해 IV를 관리하고 있습니다. 그 후, 0.9 ML 0.9 % 염화나트륨 용액으로 카테터를 제거.
  3. 시간당 0.9 % 염화나트륨 용액 1 ㎖의 정맥 주사로 스캔 수화물 동물의 시작할 때까지 마취없이 고정 장치에서 쥐를 남겨주세요.
  4. 스캔이 시작되기 전에 즉시 isoflurane을 2 %를 사용하여 다시 마취 쥐.
  5. 높은 해상도 마취 쥐를 놓고 멀티 와이어 챔버 기반의 동물 PET 카메라 quadHIDAC (옥스포드 양전자 시스템 주식 회사, 옥스포드, UK). PET 스캐너의 공간 분해능은 1.0 mm이며, 전체 FOV (직경 165 mm의 축 방향 길이 280 ㎜)에 상수이다. 펄스 맥박 산소와 직장 온도 센서 및 제어 마취를 사용하여 스캔하는 동안 모니터 및 제어 체온.
  6. 60m에 대해 동적 획득을 시작FDG의 신장 배설로 인해 신장의 추적 축적을 줄이기 위해 FDG 주입 후 180 분을 시작합니다.
  7. 신장 실질의 식별을 위해 18 F-클리어런스 5의 계산을위한 스캐너에 쥐의 위치를 이동하지 않고 18 F-불소 IV 5 MBq을 적용하고 60 분 후 즉시 18 F-불소 주입 다른 PET 스캔을 수행합니다. 두 검사에서 이미지를 재구성. 2 분 신장 피질의 주위에 18 F-불소 주입 (관류 상) 한 후 재구성 된 이미지를 수동으로 관심 볼륨 (VOI)을 추적하고 FDG의 이미지에 VOI를 전송합니다. 조심스럽게 VOI에서 신장 골반이 제외 된 금액입니다. 두 검사에서 이미지를 재구성하고 수동 신장 피질 주변 관심 볼륨 (VOI)을 추적. 목록 모드 데이터는 0.4 × 0.4 × 0.4 mm 3 복셀 크기의 이미지로 재구성 하였다. 조심스럽게 VOI에서 신장 골반이 제외 된 금액입니다.
  8. 비 O 님의 FDG 섭취를 계산F 총 수와 볼륨 및 주입 용량 (% ID)의 비율을 계산합니다. 우리는 이미지 분석을위한 MATLAB (R2011b 버전, 매스 웍스, 틱, MA, USA)와 단층 영상 (TIM) 버전 2.8을 사용했다.

Representative Results

조직학

거절의 심각도는 염증의 정도에 의해 반영되는 반면 AR 백혈구 동안, 즉, 주로 T 림프구가 이식으로 모집하고 있습니다. 여기에 묘사주기 - 산성 - 쉬프 (PAS) 염색에 (그림 1), 신장 이식은 AR, 즉 사구 체 신염, tubulitis, endothelialitis 및 이식 침투 (그림 1, ATX POD4) (POD = 수술 일) 상당한 조직 학적 흔적을 보여줍니다 거부의 징후 기본 컨트롤 신장 (그림 1, CTR)에 결석하는 동안, 이식 침투 세포는 포도당의 대량 소비 높은 대사 활성 세포 수 있습니다. 후자는 FDG로 대체되는 경우,이 세포에 축적되며, 측정 및 PET로 정량화 할 수있다.

PET 이미지

알 시리즈의 동적 전신 인수의 대표 PET 영상logeneically 30 MBq FDG (최대 사후지도 투영, 180 분 파이) (그림 2)의 꼬리 정맥 주사 후 쥐를 이식. 일반적인 FDG 분포는 뇌, 심장, 골수 harderian 분비 뚜렷한 생리적 축적으로 발견된다. 또한, 무료 여과 된 FDG는 요로에 축적. 네이티브 신장 (녹색 원, 오른쪽 신장) 전혀 축적을 보여주지 않습니다 반면, AR 실질 (노란색 원, 왼쪽 신장)받은 신장 이식에 매우, POD4에 최대 FDG를 누적합니다. 신우 무료 제거 FDG를 포함 할 수 있기 때문에, 그것은 더 측정에서 제외 하였다. 3에서 가져온 그림.

정량적 평가

양적 평가 이미지가 재구성 한 경우, 그 볼륨은 18 F-불소 관류에 따라 신장 주위에 수동 추적 및 FDG 이미지에 투영되었다. 신장 PE의 배제 후lvis는 신장 실질의 FDG 섭취가 양 (% ID ± SEM)로 총 횟수의 비율에 의해 계산 된 의미한다. 기본 컨트롤 (0.2 ± 0.02 %) 또는 syngeneically 이식 신장 (0.37 ± 0.04 %)에 비해 AR을 개발 신장 POD4에 크게 증가 FDG 축적 (0.8 ± 0.06 %)했다. 또한, AR의 두 가지 주요 차동 진단, 허혈 / 재관류 손상 (IRI) (0.31 ± 0.02 %), 급성 칼시 뉴린 억제제 독성 (CSA) (0.16 ± 0.01 %)에서 같은 즉, 급성 세뇨관 괴사가 높은 FDG의 축적을 보여주지 않았다 따라서 AR (3에서 가져온 그림 3)과 구별 할 수 있습니다.

그림 1
그림 1. 급성 즉, 거부, 사구 체 신염, tubulitis, endothelialitis 및 이식 침투의 조직학. 징후 (이식 군에서 발견되었다와 ATX)는 제어 신장 (CTR)에 완전히 결석.

그림 2
그림 2. allogeneically 이식 쥐의 일련의 동적 전신 인수 FDG-PET 이미지. 대표 PET-이미지. 제어 신장 (녹색 원)에 비해 POD4에 최대 신장 이식 (노란색 동그라미) FDG의 실질을 누적합니다. 신우 무료 제거 FDG를 포함 할 수 있기 때문에 그것은 측정에서 제외 하였다. 3에서 가져온 그림.

그림 3
그림 3. FDG의 %의 ID를 측정하여 급성 거부 반응의 정량적 평가는. 감지. 신장 이식 (ATX)는 상당한 높은 F 전시0.8 ± 0.06 %의 CTR : 0.2 ± 0.02 syngeneically 제어 신장 (CTR), 이식 (STX), POD4에 최대 (ATX 급성 칼시 뉴린 억제제 독성 (CSA)과 급성 세뇨관 괴사 (ATN) 또는 신장과 신장보다 DG 축적 %, STX : 0.37 ± 0.04 %의 %, ATN : 0.31 ± 0.02 %의 %, CSA : 0.16 ± 0.01 %). 3에서 가져온 그림.

Discussion

FDG-PET 영상은 급성 거부 반응의 진단을위한 새로운 옵션입니다. 때문에 비 침습적 특정 성격, FDG-PET 코어 생검에 의한 고전적인 진단에 비해 장점이다. 생검, FDG-PET 분석은 전체 이식의 제한된 샘플 크기는 대조적으로. 또한, 하나의 항 응고 치료에 환자에 적용 할 수 있습니다, 하나는 반복 처리 효율 4를 모니터링하는 예를 들어 PET 조치를 수행 할 수 있습니다. 또한, 우리는 이미 AR, 허혈 재관류 손상 및 급성 칼시 뉴린 억제제의 독성에 의한 즉, 급성 세뇨관 괴사의 두 가지 주요 감별 진단은 FDG-PET 3를 사용하여 AR 구별 할 수있는 것으로 나타났습니다. FDG-PET 영상은 상대적으로 낮은 활동의 금액과 이식 환자 및 / 또는 신기능 장애 환자 중 하나의 영상을 필요로하기 때문에 심각한 합병증의 위험이 증가 이러한 접근 방식을 쉽게 전송할 수 있습니다와 연결되어 있지 않습니다에 매일 임상 일과.

그럼에도 불구하고, 하나는 FDG이 지역의 신진 대사 활동을 평가보다는 비 특정 추적 것을 염두에두고있다. 따라서, 이식 감염이나 종양뿐만 아니라 거짓 긍정적 인 결과로 이어질 수 있습니다. 신장 실질의 FDG 섭취를 평가할 때 신장 골반에 FDG의 배수에 문제가있을 수 있습니다. 그러므로, 우리는 삼시간 FDG의 신장 배설로 인해 신장의 추적 축적을 줄이기 위해 주사 후 늦게 획득 시간을 선택했습니다. 또한, 신장 골반 신장 FDG 섭취를 정량화 할 때 신중하게 제외 할 수 있습니다. 이 프로토콜 PET에 따라 비 침습적, AR을 감지 ATN과 CSA 구별하고, 후속 또는 처리 효율 3, 4, 6의 평가를위한 순차적으로 조사를 수행하는 데 사용할 수 있습니다. 18 F-불소를 사용하여 PET가 게시 BEF로 신장 불소 정리의 계산에 의해 (분할) 신장 기능을 평가하기 위해 유용합니다광석 5.

LBN F1 기증자와 루이스받는 사람 쥐를 사용하여 동종 신장 이식 모델은 급성 세포 동종 이식 거부 반응의 조사를위한 이상적인 모델입니다. 면역이없는 상태에서 이식 신장 BANFF 분류에 따라 7 AR의 전형적인 조직 학적 징후를 개발할 수 있습니다. 또한, 선택한 양상 (UNI-대 이식 3, 8-10 binephrectomized)에 따라 신진 대사 데이터를 이식 기능을 모니터링 할뿐만 아니라 평가할 수 있습니다. 면역 치료의 부재로 인해, 상처 나 쥐의 전신 감염은 매우 드물다. 이 모델의 일반적인 수술 합병증은 주로받는 사람의 대동맥 또는 ICV에 이식 혈관의 삽입 지점에서 보이는 혈관 협착 등이 있습니다. 이 허혈 또는 이식 혈전증이 발생할 수 있습니다. 하나는 대동맥과 IVC에서 더 이상 절개를 사용하여이 합병증을 방지 할 수 있습니다. 때때로 요독증 인해 이식 실패 또는 u를 찾을 수 있습니다reter 누설 방광 요관 요관 괴사 또는 분리에 의해 발생. 식욕 자연 체중 증가의 요독증 예를 들어, 무관심, 손실의 징후가 발생하면, 동물은 즉시 안락사되어야한다.

Disclosures

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

Acknowledgments

이 작품은 독일 Forschungsgemeinschaft (SFB 656, 뮌스터, 독일, 프로젝트 C7 & C6)와 IZKF 뮌스터 (코어 단위 SMAP)에 의해 지원되었다. 저자는 트룩 반 르, 앤 Kanzog, 유트 NEUGEBAUER, Wiebke Gottschlich 및 radiotracers 생산을위한 우수한 기술 지원과 다니엘 BURKERT와 스벤 Fatum에 대한 로마 Priebe에 감사합니다.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Equipment
Mathieu Needle Holder - 14 cm Fine Science Tools 12010-14
Castroviejo Micro Needle Holder - 9 cm Fine Science Tools 12061-01
Surgical Scissors - Sharp_Blunt Fine Science Tools 14001-12
Iris Scissors - ToughCut Straight 11.5 cm Fine Science Tools 14058-11
Student Vannas Spring Scissors Fine Science Tools 91500-09
Vannas Spring Scissors - 3 mm Blades Fine Science Tools 15000-00
Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm Fine Science Tools 91121-12
Dumont SS-45 Forceps - Inox Medical Fine Science Tools 11203-25
Micro-Serrefine Clip Applicator with Lock Fine Science Tools 18056-14
Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm Fine Science Tools 18055-03
Micro-Serrefine 4 mm x 0.75 mm Fine Science Tools 18055-04
Reagent
Isoflurane (e.g. Forene 100% v/v) Abott
cutane antiseptic (e.g. Octeniderm) Schülke
Povidone Iodine (e.g. Betaisodona) Mundipharma
ophthalmic ointment (e.g. Bepanthen) Bayer
Buprenorphin (e.g. Temgesic) RB Pharmaceuticals
HTK perfusion solution (e.g. CUSTODIOL HTK) Dr. Franz Köhler Chemie
surgical thread Mersilene 0 Ethicon EH6665E
surgical thread Mersilene 4-0 Ethicon EH6732H
surgical thread Prolene 6-0 Ethicon 8697H
surgical thread Ethilon 9-0 Ethicon 2809G
surgical silk 5-0 Vömel 14739
Canula (e.g. Microlance 3, 27G ¾) BD 302200

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References

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