Sıçan Böbrek Nakli sonra Akut Allogreft Reddi non-invaziv Görüntüleme Kullanımı * These authors contributed equally

Medicine
 

Summary

Biz burada non-invaziv 18F-florodeoksiglukoz ile pozitron emisyon tomografisi kullanılarak akut allogreft reddi değerlendirmek için bir sıçan böbrek nakli modeli sunuyoruz.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations | Reprints and Permissions

Grabner, A., Kentrup, D., Schnöckel, U., Gabriëls, G., Schröter, R., Pavenstädt, H., Schober, O., Schlatter, E., Schäfers, M., Reuter, S. Non-invasive Imaging of Acute Allograft Rejection after Rat Renal Transplantation Using 18F-FDG PET. J. Vis. Exp. (74), e4240, doi:10.3791/4240 (2013).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Son dönem böbrek hastalığı olan hasta sayısı ve böbrek allogreft alıcı sayısı sürekli artmaktadır. Akut hücresel allogreft rejeksiyon (AR) atakları uzun süreli allogreft hayatta kalmak için olumsuz bir prognostik faktördür, ve zamanında tanı allogreft fonksiyonu 1 için çok önemlidir. Şu anda, AR sadece kesinlikle invaziv bir yöntem olarak, greft yaralanmaya ve hatta kaybı önemli bir risk bares, çekirdek iğne biyopsisi ile teşhis edilebilir. Ayrıca, biyopsi AR odak veya yamalı ise yanlış negatif sonuçlar neden olabilir antikoagülan ilaçlar ve bu tekniğin sınırlı örnekleme sitesi alan hastalarda mümkün değildir. Bunun bir sonucu olarak, bu genellikle çeşitli nakil modellerin kullanımı da dahil olmak üzere hayvanlarda yapılması gereken yeni AR tespit yöntemleri için süregelen bir araştırma yol açtı.

60'lı sıçan böbrek nakli Examin için köklü bir deneysel yöntem olduğu içinAR 2 tirme ve analizi. Ayrıca küçük hayvan pozitron emisyon tomografisi (PET) allojenik uninephrectomized sıçan böbrek nakli modelinde AR değerlendirmek ve bir non-invaziv, özel için yeni bir seçenek olarak greft FDG-PET görüntüleme teklif 18 F-florodeoksiglukoz (FDG) kullanarak Biz burada mevcut insan durum 3 için de AR ve erken tanı. Ayrıca, bu yöntem, transplant reddi 4 ölçümünün düzeltilmesi için takibi için uygulanabilir.

Protocol

1. Donör Organ Kurtarma

  1. Stereotaktik mikroskop, 8-10 haftalık sıçan (verici ve alıcı vücut ağırlığı aynı olmalıdır) rekor ağırlık ayarlayın.
  2. Donör sıçan (Lewis Brown Norveç F1, İbni F1) oksijen / izofluran inhalasyon (izofluran% 4/2 L / dk oksijen) kullanarak anestezisi. 2-2.5% için izofluran düşürerek anestezi koruyun.
  3. Ameliyat yastığı anestezi sıçan yerleştirin. Ped üzerine yapışkan bant ile sıçan ekstremite düzeltmek ve sıçan gözleri oftalmik merhem (Bepanthen, Bayer) geçerlidir.
  4. Tıraş ve sıçan karın dezenfekte ve pubis gelen karaciğer kaudal sınırına bir ventral orta hat kesi yapmak. Dikkatli bir şekilde sağ tarafa bağırsak hareket ettirerek sol böbrek ve damarları Açığa. Sol böbrek üzerinde gazlı bez ince bir tabaka yerleştirin ve kuruma önlemek için ısıtılmış izotonik serum fizyolojik ile nemlendirin.
  5. Dikkatle (Dumont Açılı İpucu Forseps ile yağ dokusu incelemek Dumont SS-45 Forseps Inox Tıp, Güzel Bilim Araçları, Sip 11203-25) sol üreter saran. Üreter ile doğrudan temastan kaçının, bunun yerine, yeterli çevre yağ dokusu ile seferber.
  6. Dumont Açılı İpucu forseps kullanarak renal arter sol renal ven ayırın. Her iki gemi tüm yağ ve bağ dokusu çıkarın ve adrenal ve testis damarları dağlamak.
  7. Sırasıyla, sol renal arter ve ven yukarıda ve kavşak altında aorta ve inferior vena kava (IVC) incelemek ve tüm giden arterler dağlamak.
  8. Superior mezenterik arter yakın mümkün olduğunca, sol renal arter üzerinde bir mikrocerrahi kelepçe (Mikro Serrefines, Güzel Bilim Araçları, Sip 18055-04) ile böbreküstü aort Kelepçe. Cerrahi ipek kullanarak infrarenal aorta (5-0, Vömel, sanat yok. 14739) sol renal arter altında yaklaşık 5 mm Arter.
  9. Cerrahi ipek ile infrarenal IVC (5-0, Vömel) Arter ve böbreküstü IVC kelepçebir mikrocerrahi kelepçe ile (Mikro Serrefines, Güzel Bilim Araçları, Sip 18055-03).
  10. Ince makas (- ToughCut Düz 11.5 cm, Güzel Bilim Araçları, Sip 14058-11 Iris Makas) kullanarak mümkün olduğunca yakın IVC için renal ven kesin.
  11. Yavaş yavaş ekleyerek 2 ml buz gibi soğuk HTK perfüzyon solüsyonu (CUSTODIOL HTK, Dr Franz Köhler Chemie) ile yerinde böbrek serpmek bir kanül (Microlance 3 27G ¾, BD, Sip 302.200) infrarenal aort. Onaylayın böbrek renk değişiklikleri (şimdi zeytin renkli).
  12. İlk olarak, daha sonra, infrarenal aorta böbreküstü aort transect ve mümkün olduğunca yakın mesane nihayet üreter.
  13. Buz üzerinde HTK perfüzyon çözüm üreter ve mağaza ile birlikte böbrek ve damar kaynağını çıkarın.
  14. Vasküler kelepçeler ve anestezi altında kalbin üst üste eksizyon kaldırarak donör sıçan Euthanize.

2. Alıcı hazırlanması ve naklition

  1. Stereotaktik mikroskop, sıçan rekor ağırlık ayarlayın.
  2. Izofluran% 4 ile alıcı sıçan (Lewis) anestezisi. 2-2.5% için izofluran düşürerek anestezi koruyun.
  3. Ameliyat yastığı anestezi sıçan yerleştirin. Ped üzerine yapışkan bant ile sıçan ekstremite düzeltmek ve sıçan `ın Gözleri oftalmik merhem uygulayın. Bir rektal sıcaklık sensörü ve bir ısınma takımını kullanarak Monitör ve kontrol çekirdek vücut sıcaklığı. Ameliyat sırasında tekrar tekrar sıcaklık, solunum ve hayvanın kalp hızı kontrol.
  4. Tıraş ve karın dezenfekte ve pubis gelen karaciğer kaudal sınırına bir ventral orta hat kesi yapmak. Deri travma en aza indirmek için bir neşter forcutting deri kullanın. Sağ tarafa bağırsak hareket ettirerek sol böbrek ve damarları Açığa.
  5. Dikkatle Dumont Açılı İpucu forseps ve pamuklu kullanarak böbrek kapsülü kaldırın.
  6. Böbrek yakın sol renal arter, ven ve üreter tıkamakcerrahi iplik (4-0 Mersilen, Ethicon, kedi. yok. EH6732H) kullanarak iki ligasyonu ile hilusu. Sadece böbrek hilusu bırakarak böbrek tüketim büyük bir kısmı,. Pamuklu çubukla kesim yüzeyi temiz ve kanama kontrol edin. Gerekirse başka bir bağ ekleyin.
  7. Dikkatlice pamuklu çubukla kuyruk sitede infrarenal aorta ve vena kava kapsayan bağ dokusu ile açık açık incelemek.
  8. Dumont Açılı İpucu forseps kullanarak infrarenal aorta ve vena kava herhangi bir görünür sinir ayırın.
  9. İlk testis damarlarının dallanma altında ve ortak iliak damarların dallanma Yukarıdaki ikinci bir: dikkatlice iki 2-4 mm uzunlukta açıklıklar oluşturan, infrarenal aort ve vena kava arasındaki bağ dokusu sayfası aracılığıyla incelemek. Arasında iliolumbar arter ve venler dağlamak.
  10. Iki açıklık her ile, tek bir cerrahi iplik (Ethicon, kedi no.EH6665E. Mersilen 0) çizin. Bu konuları infrarenal çekin kullanmahafifçe dorsal sitede dallanma gemilere erişmek için hayvanın sağ tarafına aort ve vena kava. Iki açıklık arasında bu kapların her yakmak ve daha sonra cerrahi konuları çıkarın.
  11. Daha sonra, aort ile üst açılışında başlayan ve üst açılış (Mikro Serrefines de vena kava ile biten dört mikrocerrahi kelepçeleri (Mikro Serrefines, Güzel Bilim Araçları, Sip 18055-04) saat yönünde uygulama tarafından aorta ve IVC tıkamak , Güzel Bilim Araçları, Sip 18055-03).
  12. Daha sonra dikkatli bir şekilde delmek bir iğne ile aort izole kısmının üst biten (Microlance 3 27G ¾, BD, Sip 302.200), ince bir yay makas (Vannas Bahar Makas alt bıçak takın - 3 mm Bıçak, Güzel Bilim delinme açıklıktan Araçları, cat.no 15000-00) ve kısa boyuna kesi yapmak. Herhangi bir geri kalan kan kaldırmak için buz soğukluğunda HTK perfüzyon çözeltisi ile izole aort yıkayın.
  13. Aynı şekilde, dikkatli bir şekilde delmekbir iğne ile vena kava izole kısmının alt biten, delinme açıklıktan ince bir bahar makas alt bıçak yerleştirin ve kısa bir süre aort kesi altında biten uzunlamasına bir kesi yapmak. Yine, kalan kan kaldırmak için gemi yıkayın.
  14. Depolama çözümü gelen böbrek greft çıkarın. Sol böbrek eski konumunu altına yerleştirin ve doğru yönde olduğundan emin olun.
  15. Greft renal arter yönünü kontrol edin ve herhangi bir bükülme olmadığından emin olmak. Daha sonra greft üzerine gazlı bez ince bir sayfa koyun ve soğumaya buz HTK perfüzyon çözümü ile nemlendirin ve kuruma önlemek için.
  16. Üst ilk önce, daha sonra alt ucunda - greft renal arter cerrahi iplik (.. Ethilon 9-0, Ethicon, kedi hiçbir 2809G) ile içine açıldığı aort parçasının suprarenal kısmının açılması sabitleştirmek aort insizyon yapıldı. Cerrahi iplik kullanarak sürekli bir dikiş ile saat yönünde kesi kapatın(Ethilon 9-0), Dumont Açılı İpucu forseps ve kavisli bir Castroviejo iğne tutucu (Güzel Bilim Araçları, kedi. Yok. 12061-01). Daha sonra, bir saatin ikinci sürekli dikiş ile bağ dokusu ile ilk dikiş kapsamaktadır. Şimdi, greft aort parçasının sadece alt kısmı kapalı kalır. Düzenli buz HTK perfüzyon çözeltisi ile greft serin.
  17. Dikiş sızdırmazlık ve bütünlüğünü doğrulamak yanı sıra, greft kalan kan kaldırma aort greft parçasının açık olan ucuna takılan, kör bir iğne ile buz soğukluğunda HTK perfüzyon çözeltisi 1 ml greft serpmek. Daha sonra, cerrahi ipek ile aort parçası (5-0, Vömel) açık olan ucuna ligate.
  18. Greft renal ven yönünü kontrol edin ve herhangi bir bükülme olmadığından emin olmak.
  19. Vena kava de kesi alt ucunda sonra, üst birinci - cerrahi diş (Ethilon 9-0) ile greft damarın açılması sabitleşmek. Kesi kapatıncerrahi iplik (Ethilon 9-0), Dumont Açılı İpucu forseps ve kavisli bir Castroviejo iğne tutucu kullanarak sürekli bir dikiş ile saat yönünde. Düzenli buz HTK perfüzyon çözeltisi ile greft serin.
  20. En üst vena kava kelepçe ile başlayan, mikrocerrahi kelepçeleri sökün tersine. Son aort kelepçe çıkardıktan sonra, dikkatlice pamuklu çubukla sonunda hafif kanamayı durdurmak. Birkaç saniye sonra greft pembe renkli dönecek ve uretric kasılmaları görünmelidir.
  21. Alıcı `nın mesane içine greft üreter ekleme dikkatli bir Vannas Bahar Makas (Öğrenci Vannas Bahar Makas düz, Güzel Bilim Araçları, Sip 91500-09 kullanarak mesane üstündeki kas küçük bir düzeltme ekini kaldırmak için .) Daha sonra, Dumont Açılı İpucu forseps kullanarak greft üreter çevreleyen doku (çoğunlukla yağ) çıkarın. Bu nedenle, dikkatle üreter ucu kapmak ve yavaşça çevreleyen yağ, bağ dokusu ayrı ve gömülü gemileri sağa solaters yönde çekerek bunu m. Bir cerrahi iplik (Prolen 6-0, Ethicon, kedi. Yok. 8697H) sonunda uretric ucu sabitleşmek ve ekli iğne ile mesane önceden hazırlanmış üst perfore. Mesane ile üreter çekin ve ikinci bir perforasyon ile tabanında bunu çıkın.
  22. Cerrahi iplik (Ethilon 9-0) ile mesane üstündeki doku ayrılmış üreter gelen daha önce sabitleşmek. Ekli cerrahi iplik ile üreter ucu kesilmiş ve hafifçe aşağıdan iterek mesane içine geri üreter çekin. Daha sonra, cerrahi iplik (Ethilon 9-0) ile ikinci mesane delinme kapatın.
  23. Cerrahi dikiş ipliğinin (Mersilen 0) kullanarak iki sürekli ama ayrı dikişlerle karın duvarı ve cilt kapatın. Pividon İyot kullanarak yara dezenfekte ve yara ağrı kontrolü için ameliyat sonrası üç gün buprenorfin (kg / BW / teklif başına 0.1 mg) sc yönetmek.

3. Görüntüleme Allogreft Reddetme

  1. Izofluran 2-2.5% kullanarak Tokluk sıçan anestezisi.
  2. 30 MBq FDG (0.1 ila 30 MBq FDG ml% 0.9 NaCl), bir 24 G kateter (Braun, Introcan, 4.252.500-01) kullanılarak, yanal kuyruk damarı yoluyla kateterizasyonu IV tatbik edilir. Daha sonra, 0.9 ml% 0.9 NaCl çözeltisi ile kateter tasfiye.
  3. Saatte% 0.9 NaCl çözeltisi, 1 ml IV enjeksiyonu ile tarama ve hidrat da hayvan başlangıcına kadar anestezi olmadan bir süzgeç, sıçan bırakın.
  4. Tarama başlamadan önce hemen izofluran% 2 kullanılarak yeniden anestezisi sıçan.
  5. Yüksek çözünürlükte anestezi sıçan yerleştirin çok telli oda-tabanlı hayvan PET kamera quadHIDAC (Oxford Pozitron Systems Ltd, Oxford, UK). PET tarayıcı uzaysal çözünürlüğü 1,0 mm ve tüm FOV (çap, 165 mm; aksiyel uzunluk, 280 mm) üzerinde sabittir. Bir pulse oksimetre ile bir rektal sıcaklık sensörü ve kontrol anestezi kullanarak tarama sırasında Monitör ve kontrol vücut ısısı.
  6. 60 m için dinamik satın alma başlayınFDG böbrek atılımı nedeniyle böbreklerde izleyici birikimini azaltmak için FDG-enjeksiyon sonrası 180 dakika başlangıç.
  7. Renal parankim belirlenmesi için ve 18 F-boşluk 5 hesaplanması için tarayıcı içinde sıçan konumunu taşımadan 18 F-florür iv 5 MBq uygulayın ve 60 dakika hemen sonra 18 F-florür enjeksiyon başka bir PET taraması gerçekleştirin. Her iki tarama görüntüleri yeniden. 2 dakika böbrek korteks yaklaşık 18 F-florür enjeksiyon (perfüzyon-faz) sonra yeniden görüntülerde elle ilgi hacmi (VOI) iz ve FDG görüntülere VOI aktarın. Dikkatlice VOI gelen renal pelvis dahil değildir. Her iki tarama görüntüleri yeniden ve elle böbrek korteks çevresinde ilgi bir hacim (VOI) iz. Listesi mod veri 0.4 × 0.4 × 0.4 mm 3 bir voksel boyutu ile görüntü içine yeniden inşa edildi. Dikkatlice VOI gelen renal pelvis dahil değildir.
  8. Oranı o tarafından FDG tutulumu hesaplamakf toplam sayısı ve hacmi ve enjekte doz (% ID) yüzdesini hesaplar. Biz görüntü analizi için MATLAB (Sürüm R2011b, MathWorks, Natick, MA, ABD) ve tomografik görüntüleme (TİM) Sürüm 2.8 kullanılır.

Representative Results

Histoloji

Ret şiddeti inflamasyon derecesi ile yansıtılır ise AR lökosit sırasında, yani özellikle T-lenfositler, nakli içine alınırlar. Burada tasvir Periyodik Asit-Schiff (PAS) boyama (Şekil 1), renal allogreft AR, yani glomerülit, tübülit saptandı, endothelialitis ve greft infiltrasyon (Şekil 1, atx POD4) (POD = günde) önemli histolojik belirtileri gösterir ret belirtileri yerli kontrolü böbrek (Şekil 1, TO) de yok iken, Greft infiltre hücrelerin glikoz büyük miktarlarda tüketmek son derece metabolik olarak aktif hücrelerdir. Ikinci FDG ile ikame edilir, ancak bu hücreler birikebilir ve ölçülür ve PET ile tayin edilebilir.

PET Görüntüler

Bir el bir dizi dinamik tüm vücut satın Temsilcisi PET görüntülerilogeneically 30 MBq FDG (maksimum posterior MAP projeksiyon, 180 dakika pi) (Şekil 2) kuyruk ven enjeksiyon sonrası sıçan nakledilen. Tipik bir FDG dağılımı beyin, kalp, kemik iliği ve Harder bezinde farklı fizyolojik birikimi ile bulunur. Ayrıca, ücretsiz filtre edilmiş FDG idrar yollarında birikir. Yerli böbrek (yeşil daire, sağ böbrek) hiç bir birikimi göstermez ise AR parankim (sarı daire, sol böbrek) altında olan böbrek greft son derece, POD4 üzerinde maksimum FDG birikir. Renal pelvis ücretsiz ortadan FDG içerebilir bu yana, daha fazla ölçüm çıkarılmıştır. 3 alınan Şekil.

Kantitatif değerlendirme

Nicel değerlendirme görüntüler yeniden edildi, faiz hacimleri 18 F-florür perfüzyon göre böbrek etrafında manuel takip ve FDG görüntülerde tahmin edildi. Böbrek pe dışlanması sonraMVI böbrek parankiminde FDG tutulumu hacmi (% ID ± SEM) toplam sayıları oranı hesaplanmıştır anlamına gelir. Yerli kontrolleri (0.2 ± 0.02%) veya syngeneically nakledilen böbrekler (0.37 ± 0.04%) göre AR gelişmekte olan böbrekler POD4 üzerinde önemli ölçüde artmıştır FDG birikimi (0.8 ± 0.06%) gösterdi. Ayrıca, AR iki önemli ayırıcı tanı, iskemi / reperfüzyon hasarı (IRI) (0.31 ± 0.02%) ve akut kalsinörin inhibitörü toksisitesi (CSA) (0.16 ± 0.01%) gibi yani akut tübül nekrozu bir yüksek FDG birikimi ve göstermedi Bu nedenle AR (3 alınan Şekil 3) ayırt edilebilir.

Şekil 1
Şekil 1. Akut yani ret, glomerülit, tübülit saptandı, endothelialitis ve greft sızma, Histoloji. İşaretler (allogreft grubunda bulunduve ATX) kontrolü böbrekler (TO) tamamen yoktu.

Şekil 2,
Şekil 2. Bir allogeneically nakledilen sıçan bir dizi dinamik tüm vücut satın almaların FDG-PET görüntüsü. Temsilcisi PET-görüntüler. Kontrolü böbrekler (yeşil daireler) ile karşılaştırıldığında POD4 üzerinde maksimum böbrek allogreft (sarı daireler) FDG parankimi birikir. Renal pelvis ücretsiz ortadan FDG içerebilir bu yana ölçümleri çıkarılmıştır. 3 alınan Şekil.

Şekil 3,
Şekil 3,. FDG% ID ölçümü ile akut ret nicel değerlendirmesi. Algılama. Böbrek allogreftler (ATX) anlamlı olarak daha yüksek F sergi0.8 ± 0.06% TO: 0.2 ± 0.02 syngeneically kontrolü böbrekler (TO), allogreftler (STX), POD4 üzerinde en fazla (ATX ile akut kalsineurin inhibitörü toksisitesi (CSA) ile akut tübül nekroz (ATN) veya böbrek ile böbrek daha DG birikimleri %, STX: 0.37 ± 0.04%%, S: 0.31 ± 0.02%%, CSA: 0.16 ± 0.01%). 3 alınan Şekil.

Discussion

FDG-PET görüntüleme akut rejeksiyon tanısı için yeni bir seçenektir. Nedeniyle non-invaziv ve özel doğa, FDG-PET iğne biyopsisi ile klasik teşhis göre avantajları. Biyopsi, FDG-PET analizi tüm greft sınırlı örneklem büyüklüğü aksine. Ayrıca, bir antikoagülan tedavisi hastalara uygulayabilirsiniz, ve bir tekrar tekrar tedavi etkinliği 4 izlemek için örneğin PET önlemler gerçekleştirebilirsiniz. Buna ek olarak, biz zaten AR, iskemi reperfüzyon hasarı ve akut kalsinörin inhibitörü toksisitesi neden yani akut tübül nekroz, iki önemli ayırıcı tanısında FDG-PET 3 kullanarak AR ayırt edilebilir olduğunu göstermiştir. FDG-PET görüntüleme nispeten düşük aktivite miktarda ve transplant hastalarında ve / veya böbrek fonksiyon bozukluğu olan hastalarda ya görüntüleme gerektirdiğinden ciddi komplikasyon riski bu yaklaşım kolayca transfer edilebilir ile ilişkili değildiriçine günlük klinik rutin.

Bununla birlikte, bir FDG bölgesel metabolik aktivite değerlendirilmesi oldukça spesifik olmayan izleyici olduğunu akılda tutmak zorunda. Böylece, greft enfeksiyonu veya tümörler de yanlış pozitif sonuçlara yol açabilir. Böbrek parankiminde FDG tutulumu değerlendirirken renal pelvis içine FDG drenaj bir sorun olabilir. Bu nedenle, üç saat FDG böbrek atılımı nedeniyle böbreklerde izleyici birikimini azaltmak için enjeksiyon sonrası bir geç alma süresi seçtiniz. Buna ek olarak, renal pelvis, renal FDG miktarının zaman dikkatli bir şekilde hariç olmak zorundadır. Bu protokol PET göre non-invaziv, AR tespit ATN ve CSA ayırmak için ve takip için veya tedavi verimlilik 3, 4, 6 değerlendirilmesi için seri araştırmalar gerçekleştirmek için kullanılabilir. 18 F-florür kullanılarak PET yayınlanan BEF olarak böbrek florür boşluk hesaplanması ile (split) böbrek fonksiyonu değerlendirmek için de yararlıdırcevher 5.

İbni F1 verici ve Lewis alıcı fareler kullanarak allojenik böbrek nakli modeli akut hücresel allogreft reddi incelenmesi için ideal bir modeldir. Immünosupresyon yokluğunda allogreft böbrek BANFF sınıflandırma 7'ye göre AR tipik histolojik belirtiler geliştirirler. Ayrıca, seçilen yöntem (tek-vs nakli 3, 8-10 binephrectomized) bağlı olarak metabolik veri allogreft fonksiyonu izlemek için de değerlendirilebilir. Immunsupresif tedavi olmaması nedeniyle, yara ya da sıçanların sistemik enfeksiyonları son derece nadirdir. Bu modeli yaygın cerrahi komplikasyonlar çoğunlukla alıcının aort veya ICV içine greft damarlarının ekleme noktaları görülen damar stenoz, içerir. Bu iskemi veya greft trombozu neden olabilir. Bir aorta ve IVC daha uzun kesiler kullanarak bu komplikasyon önleyebilirsiniz. Bazen üremi bağlı greft hatası veya u bulunmuşturReter kaçak mesaneden üreter üreter nekrozu veya kopukluk neden. Iştah ya da kendiliğinden kilo üremi gibi ilgisizlik, kaybı belirtileri ortaya çıkarsa, hayvanlar hemen ötenazi edilmelidir.

Disclosures

Çıkar çatışması ilan etti.

Acknowledgments

Bu çalışma, Deutsche Forschungsgemeinschaft (SFB 656, Münster, Almanya, projeler C7 ve C6) ve IZKF Münster (Çekirdek birim SMAP) tarafından desteklenmiştir. Yazarlar Truc Van Le, Anne Kanzog, Ute Neugebauer, Wiebke Gottschlich ve radyo-üretmek için mükemmel bir teknik yardım ve Daniel Burkert ve Sven Fatum için Roma Priebe minnettarız.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Equipment
Mathieu Needle Holder - 14 cm Fine Science Tools 12010-14
Castroviejo Micro Needle Holder - 9 cm Fine Science Tools 12061-01
Surgical Scissors - Sharp_Blunt Fine Science Tools 14001-12
Iris Scissors - ToughCut Straight 11.5 cm Fine Science Tools 14058-11
Student Vannas Spring Scissors Fine Science Tools 91500-09
Vannas Spring Scissors - 3 mm Blades Fine Science Tools 15000-00
Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm Fine Science Tools 91121-12
Dumont SS-45 Forceps - Inox Medical Fine Science Tools 11203-25
Micro-Serrefine Clip Applicator with Lock Fine Science Tools 18056-14
Micro-Serrefine 6 mm x 1 mm Fine Science Tools 18055-03
Micro-Serrefine 4 mm x 0.75 mm Fine Science Tools 18055-04
Reagent
Isoflurane (e.g. Forene 100% v/v) Abott
cutane antiseptic (e.g. Octeniderm) Schülke
Povidone Iodine (e.g. Betaisodona) Mundipharma
ophthalmic ointment (e.g. Bepanthen) Bayer
Buprenorphin (e.g. Temgesic) RB Pharmaceuticals
HTK perfusion solution (e.g. CUSTODIOL HTK) Dr. Franz Köhler Chemie
surgical thread Mersilene 0 Ethicon EH6665E
surgical thread Mersilene 4-0 Ethicon EH6732H
surgical thread Prolene 6-0 Ethicon 8697H
surgical thread Ethilon 9-0 Ethicon 2809G
surgical silk 5-0 Vömel 14739
Canula (e.g. Microlance 3, 27G ¾) BD 302200

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Wu, O., Levy, A. R., Briggs, A., Lewis, G., Jardine, A. Acute rejection and chronic nephropathy: a systematic review of the literature. Transplantation. 87, 1330-1339 (2009).
  2. Miller, B. F., Gonzales, E., Wilchins, L. J., Nathan, P. Kidney transplantation in the rat. Nature. 194, 309-310 (1962).
  3. Reuter, S., Schnöckel, U., Schröter, R., Schober, O., Pavenstädt, H., Schäfers, M., Gabriëls, G., Schlatter, E. Non-invasive imaging of acute renal allograft rejection in rats using small animal F-FDG-PET. PLoS. One. 4, e5296 (2009).
  4. Reuter, S., Schnöckel, U., Edemir, B., Schröter, R., Kentrup, D., Pavenstädt, H., Schober, O., Schlatter, E., Gabriëls, G., Schäfers, M. Potential of noninvasive serial assessment of acute renal allograft rejection by 18F-FDG PET to monitor treatment efficiency. J. Nucl. Med. 51, 1644-1652 (2010).
  5. Schnöckel, U., Reuter, S., Stegger, L., Schlatter, E., Schäfers, K. P., Hermann, S., Schober, O., Gabriëls, G., Schäfers, M. Dynamic 18F-fluoride small animal PET to noninvasively assess renal function in rats. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 35, 2267-2274 (2008).
  6. Grabner, A., Schnöckel, U., Kentrup, D., Schäfers, M., Reuter, S. Strategies for Non-Invasive Molecular Imaging of Acute Allograft Rejection by Gamma Scintigraphy and Positron Emission Tomography. Curr. Radiopharm. 4, 10-23 (2011).
  7. Racusen, L. C., Solez, K., Colvin, R. B., Bonsib, S. M., Castro, M. C., Cavallo, T., Croker, B. P., Demetris, A. J., Drachenberg, C. B., Fogo, A. B., et al. The Banff 97 working classification of renal allograft pathology. Kidney Int. 55, 713-723 (1999).
  8. Edemir, B., Reuter, S., Borgulya, R., Schröter, R., Neugebauer, U., Gabriëls, G., Schlatter, E. Acute rejection modulates gene expression in the collecting duct. J. Am. Soc. Nephrol. 19, 538-546 (2008).
  9. Velic, A., Gabriëls, G., Hirsch, J. R., Schröter, R., Edemir, B., Paasche, S., Schlatter, E. Acute rejection after rat renal transplantation leads to downregulation of Na+ and water channels in the collecting duct. Am. J. Transplant. 5, 1276-1285 (2005).
  10. Reuter, S., Velic, A., Edemir, B., Schröter, R., Pavenstädt, H., Gabriëls, G., Bleich, M., Schlatter, E. Protective role of NHE-3 inhibition in rat renal transplantation undergoing acute rejection. Pflugers Arch. 456, 1075-1084 (2008).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics