सुरक्षा सावधानियों और एक (ए) में संचालन प्रक्रिया बीएसएल 4 प्रयोगशाला: 4. मेडिकल इमेजिंग प्रक्रियाओं

Immunology and Infection

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Byrum, R., Keith, L., Bartos, C., St. Claire, M., Lackemeyer, M. G., Holbrook, M. R., Janosko, K., Barr, J., Pusl, D., Bollinger, L., Wada, J., Coe, L., Hensley, L. E., Jahrling, P. B., Kuhn, J. H., Lentz, M. R. Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 4. Medical Imaging Procedures. J. Vis. Exp. (116), e53601, doi:10.3791/53601 (2016).

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Abstract

Introduction

नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ एलर्जी और संक्रामक रोग (NIAID) फ्रेडरिक एमडी (आईआरएफ-फ्रेडरिक) में फोर्ट Detrick पर समन्वित अनुसंधान सुविधा के मिशन के उभरते संक्रामक रोग अनुसंधान नैदानिक ​​रोग प्रक्रियाओं है कि की गंभीरता के साथ संबंध स्थापित समझने के लिए प्रदर्शन करने के लिए है माइक्रोबियल प्रेरित रोग। आईआरएफ-फ्रेडरिक एक ABSL -4 प्रयोगशाला 1 में उच्च परिणाम रोगजनकों के पशु मॉडल में मेडिकल इमेजिंग प्रदर्शन करने के लिए एक अद्वितीय क्षमता है। इमेजिंग तौर तरीकों जांचकर्ताओं के लिए उपलब्ध शामिल हैं: गणना टोमोग्राफी (सीटी), चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई), पोजीट्रान एमिशन टोमोग्राफी (पीईटी), एक फोटान गणना टोमोग्राफी (SPECT), अल्ट्रासाउंड, एक्स-रे, और प्रतिदीप्तिदर्शन। शोधकर्ताओं रोग प्रगति की निगरानी और मूल्यांकन ऐसी दवा उपचार और टीकाकरण के रूप में हस्तक्षेप की प्रभावकारिता, अनुदैर्ध्य अध्ययन में करने के लिए इमेजिंग क्षमताओं उपलब्ध का उपयोग करें।

आईआरएफ-फ्रेडरिक पर इमेजिंग तौर तरीकों विशेष रूप से थेउच्च रोकथाम 2,3 के बाहर उपकरण के मुख्य घटक रखने के लिए बनाया गया है और रखरखाव और मरम्मत के लिए सुलभ है। इस डिजाइन 'हॉट' (युक्त रोगज़नक़) और इमेजिंग में सूट अलग करती है "ठंड पक्षों।" इस जुदाई को प्राप्त करने के लिए, विशेष रूप से डिजाइन की नलियों प्रत्येक इमेजिंग साधन (चित्रा 1) के तंग करती में उच्च रोकथाम अंतरिक्ष विस्तार करने के लिए निर्माण किया गया। जैविक नियंत्रण प्रदान करने के अलावा, इन ट्यूबों गैसों और रसायनों उच्च रोकथाम प्रयोगशाला शुद्ध करने के लिए इस्तेमाल से इमेजिंग उपकरणों की रक्षा करना। इमेजिंग वैज्ञानिकों और प्रौद्योगिकीविदों "ठंड की ओर से" स्कैनर से संचालित है, जबकि तुलनात्मक चिकित्सा (मुख्यमंत्री) के कर्मचारियों के हैंडल और "गर्म पक्ष" पर जानवरों की निगरानी। चूंकि मुख्यमंत्री स्टाफ इमेजिंग वैज्ञानिकों के साथ मिलकर काम करना चाहिए इन प्रयोगों समन्वय करने के लिए, इस जुदाई संचार चुनौतियों में परिणाम कर सकते हैं।

उपलब्ध विकल्पों के मूल्यांकन के बाद, मुख्यमंत्री स्टाफ बाहर थेब्लूटूथ कान टुकड़े कि रोकथाम के बाहर इमेजिंग स्टाफ फोन करने के लिए इस्तेमाल किया फोन करने के लिए लघु तरंग दैर्ध्य अति उच्च आवृत्ति रेडियो तरंगों संचारित के साथ लगाया। सुविधा के डिजाइन के कारण, वायरलेस का उपयोग अंक कमरों में से प्रत्येक में स्थापित होने के लिए सीमेंट और के बीच 'हॉट' स्टील की परतों और "ठंड पक्षों" की वजह से संकेत हस्तक्षेप पर काबू पाने के लिए किया था। इस प्रकार, मुख्यमंत्री स्टाफ उच्च रोकथाम के बाहर शोर सकारात्मक दबाव सूट और इमेजिंग स्टाफ पहने के बीच संचार अब विश्वसनीय है। कैमरा भी इमेजिंग कर्मचारी "गर्म पक्ष" पर गतिविधि को देखने के लिए इमेजिंग कमरों गर्म पक्ष पर स्थापित किया गया है। कैमरों के साथ, इमेजिंग स्टाफ पशु स्थिति या इमेजिंग प्रोटोकॉल के लिए कोई अंतिम मिनट में परिवर्तन के साथ मुख्यमंत्री तकनीशियनों मार्गदर्शन कर सकते हैं।

आईआरएफ-फ्रेडरिक ABSL -4 सूट प्रयोगशाला में सभी काम सकारात्मक दबाव सूट 4 encapsulating पहनने के लिए स्टाफ की आवश्यकता है। इन सूट पहने हुए गतिशीलता कम कर देता है, और भारी देर सेएक्स दस्ताने सूट से जुड़ी प्लस दस्ताने की अप करने के लिए तीन अतिरिक्त परतों निपुणता समझौता। नतीजा यह है कि प्रक्रियाओं में लंबा समय लग को पूरा करने के लिए और कार्य है कि ठीक मोटर कौशल की आवश्यकता होती है और अधिक मुश्किल हो जाता है। जैव सुरक्षा स्तर बढ़ जाता है, जानवर से निपटने और जोड़तोड़ के रूप में अधिक चुनौतीपूर्ण और समय लेने वाली है, विशेष रूप से छोटे जानवरों के साथ हो जाते हैं। एक ABSL -4 प्रयोगशाला में प्रक्रियाओं एक ABSL -2 प्रयोगशाला की तुलना में 2-3 गुना ज्यादा समय तक का समय लग सकता है।

इस लेख का उद्देश्य नेत्रहीन एक उदाहरण के रूप में एक गिनी पिग की सीटी स्कैन प्रक्रिया का उपयोग कर एक ABSL -4 वातावरण में इमेजिंग पशु मॉडल के साथ जुड़े चुनौतियों का प्रदर्शन है।

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Protocol

इस प्रोटोकॉल के बाद जानवरों की देखभाल के दिशा-निर्देशों का पालन करता है। पशु सुविधा आकलन और प्रयोगशाला पशु केयर इंटरनेशनल के प्रत्यायन के लिए एसोसिएशन द्वारा मान्यता प्राप्त में रखे थे। सभी प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ एलर्जी और संक्रामक रोगों, क्लीनिकल रिसर्च की डिवीजन, पशु की देखभाल और उपयोग समिति ने मंजूरी दे दी है और पशु कल्याण अधिनियम के नियमों, सार्वजनिक स्वास्थ्य सेवा नीति के अनुपालन में थे, और देखभाल और उपयोग के लिए गाइड प्रयोगशाला पशु सिफारिशें की हैं।

1. सीटी स्कैनर तैयार ( "पर ठंड की ओर")

  1. शर्त एक्स-रे ट्यूब
    1. सत्यापित करें कि कोई स्टाफ सदस्य कमरे स्कैन में है और इस विषय तालिका खाली है।
    2. स्कैनर निर्माता विनिर्देशों के अनुसार ट्यूब कंडीशनिंग प्रक्रिया चलाएँ।
  2. एयर अंशांकन प्रदर्शन
    1. सुनिश्चित करें कि कोई वस्तु स्कैनिंग क्षेत्र में हैं। स्कैनर निर्माता विनिर्देशों के अनुसार हवा अंशांकन प्रक्रिया करते हैं। कई प्लेटफार्मों पर, इस अंशांकन ऑटो या अर्द्ध स्वचालित है।
  3. ( "पर गर्म पक्ष") गुणवत्ता नियंत्रण स्कैन प्रदर्शन
    1. पूरा ABSL -4 सूट प्रयोगशाला प्रवेश प्रक्रियाओं (संदर्भ 5 में विस्तार से रेखांकित) एक अतिरिक्त कदम के अलावा के साथ। अगर प्रक्रियाओं रेडियोधर्मी सामग्री के लिए जोखिम शामिल है, सुरक्षात्मक सूट के तहत स्क्रब करने के लिए एक माामापी क्लिप। माामापी में बारी विकिरण जोखिम की गणना के लिए हर 2 महीने।
    2. सीटी सिर और शरीर प्रेत, जो स्कैनिंग मेज पर उचित धारक में हवा, पानी और Teflon से बाहर कर दिया जाता है, जगह।
  4. ( "पर ठंड की ओर") गुणवत्ता नियंत्रण स्कैन प्रदर्शन
    1. ठंड की ओर से, बोर 6 के केंद्र में प्रेत अग्रिम।
    2. सत्ता के लिए प्रयोगशाला की गुणवत्ता नियंत्रण (QC) के मापदंडों का उपयोग कर एक स्कैन मोलUre स्कैनर निर्माता विनिर्देशों के भीतर है।
    3. प्रत्येक सामग्री के प्रकार (हवा, पानी या Teflon) निर्माता प्रोटोकॉल के अनुसार पर केंद्रित हित के क्षेत्रों के भीतर संकेत तीव्रता का मतलब है और मानक विचलन की गणना करने के लिए छवियों की क्यूसी कम्प्यूटरीकृत विश्लेषण करते हैं।
    4. मुख्यमंत्री के कर्मचारियों को सूचित करें कि सीटी स्कैनर में इस्तेमाल के लिए तैयार है।
    5. मुख्यमंत्री के कर्मचारियों के साथ पशु जानकारी (पहचान संख्या, वजन, जन्म की तारीख) की जाँच करें।
  5. रोगी डेटाबेस में इस विषय की जानकारी रजिस्टर।
    1. सीटी स्कैनर सांत्वना ( "ठंड की ओर" पर), स्कैनर के रेडियोलॉजी सूचना प्रणाली (आरआईएस) का उपयोग। जाँच करें कि आरआईएस स्कैनिंग अनुसूची के विवरण के साथ आबादी है।
    2. वर्तमान का विषय है और इस तरह के पहचान संख्या, उम्र, जन्म तिथि, और परीक्षा की तारीख के रूप में जनसांख्यिकी का चयन करें; फिर, परीक्षा प्रकार स्वचालित रूप से आबाद करना चाहिए।
    3. मैन्युअल विषय वजन दर्ज करें।
    4. का चयन सही सुसीटी गैन्ट्री में bject अभिविन्यास (जैसे, पहले सिर, पैर पहले, प्रवण, लापरवाह)।

2. ABSL -4 सूट प्रयोगशाला में काम क्षेत्रों को तैयार

  1. पशु प्रक्रिया कक्ष में द्वितीय श्रेणी जैव सुरक्षा कैबिनेट (बीएससी) या डाउनड्राफ्ट टेबल तैयार करें। बीएससी (या डाउनड्राफ्ट तालिका) को चालू कम से कम 10 मिन उपयोग करने से पहले।
    1. स्वच्छ और एक अनुमोदित कीटाणुनाशक इस तरह के रूप में 5% दोहरी चतुर्धातुक अमोनियम का उपयोग कर बीएससी या डाउनड्राफ्ट मेज के ऊपर की सतह के आंतरिक सतहों कीटाणुरहित (एन alkyl- डाइमिथाइल लोबान अमोनियम क्लोराइड, एन डाइमिथाइल alkyl एथिल लोबान अमोनियम क्लोराइड) कीटाणुनाशक समाधान। बीएससी या डाउनड्राफ्ट मेज के ऊपर की सतह के आंतरिक सतहों स्प्रे और पोंछ संपर्क समय के 10 मिनट के बाद सूखी सतहों। स्प्रे और पोंछ 70% इथेनॉल के साथ सतहों अवशिष्ट कीटाणुनाशक हटा दें।
    2. प्लेस उपकरण और आपूर्ति बीएससी या डाउनड्राफ्ट तालिका में की जरूरत है, संज्ञाहरण प्रेरण बॉक्स और पशु दस्ताने हैंडलिंग भी शामिल है।
    3. राजभाषा>
    4. सीटी स्कैनर बिस्तर तैयार करें।
      1. सीटी बिस्तर पर सेट-अप पशु पकड़े डिवाइस।
      2. सेट-अप महत्वपूर्ण संकेत दिल की दर और ऑक्सीजन संतृप्ति पता लगाने के लिए निगरानी। अगर स्कैनिंग सत्र अब से 10 मिनट, मॉनिटर तापमान है।
    5. संज्ञाहरण मशीन तैयार करें।
      1. vaporizer में isoflurane मात्रा की जाँच करें और अधिक isoflurane जोड़ने अगर जरूरत है।
      2. ऑक्सीजन के साथ संवेदनाहारी सांस लेने सर्किट पर दबाव, बच गैस के लिए जाँच, और नेत्रहीन लीक 1 के लिए संज्ञाहरण मशीन का निरीक्षण करके एक रिसाव परीक्षण प्रदर्शन करना।
        1. एक रिसाव का पता चला है, तो स्रोत निर्धारित करते हैं, इस समस्या को सही, और सुधार ठीक से लागू किया गया सत्यापित करने के लिए एक अनुवर्ती रिसाव परीक्षण प्रदर्शन करते हैं।
      3. डिस्पोजेबल सफाई कनस्तर है कि कब्जा अपशिष्ट संवेदनाहारी गैस वजन। कनस्तर कनस्तर की प्रारंभिक वजन से अधिक ≥50 जी है, तो कनस्तर 7 की जगह।
    शीर्षक "(गर्म पक्ष"> 3। पशु प्रक्रिया कक्ष और संज्ञाहरण प्रेरण की तैयारी सीटी स्कैनर कमरे में पर) से पशु परिवहन "

    1. द्वितीय श्रेणी बीएससी में कृंतक होल्डिंग कमरे इमेजिंग सूट से सटे में से एक से स्थानांतरण पिंजरे हाउसिंग गिनी पिग।
      1. पशु आईडी सत्यापित करें।
      2. पिंजरे कार्ड निकालें और जानवर के साथ रहते हैं।
    2. पिंजरे में ढक्कन खोलें और सकारात्मक दबाव सूट दस्ताने से अधिक पशु सुरक्षात्मक चमड़े के दस्ताने डॉन। धीरे, गिनी पिग लेने के संज्ञाहरण प्रेरण बॉक्स में जानवरों की जगह, और ढक्कन के साथ बॉक्स को कवर किया।
    3. द्वितीय श्रेणी बीएससी से संज्ञाहरण प्रेरण पशु युक्त बॉक्स निकालें और एक परिवहन गाड़ी पर जगह है।
    4. गाड़ी का उपयोग करना, सीटी स्कैनर कमरे के लिए पशु ले।
    5. सीटी स्कैनर कमरे में, तुरंत सफाई कनस्तर और प्रेरण बॉक्स के लिए संज्ञाहरण मशीन से कनेक्ट। प्रेरण बॉक्स के लिए ऑक्सीजन गैस पर मुड़ें और deliv को vaporizer सेटएर संज्ञाहरण 8 की प्रारंभिक प्रेरण के लिए 4% isoflurane।
    6. संज्ञाहरण की पर्याप्त गहराई के लिए संज्ञाहरण प्रेरण के दौरान पशु मॉनिटर (जैसे, बाहरी उत्तेजनाओं, मांसपेशियों टोन, स्थिर सांस और दिल की दर के लिए अनुत्तरदायी) 8।
    7. जब गिनी पिग पूरी तरह से anesthetized है प्रेरण बॉक्स के लिए संज्ञाहरण बंद कर दें।

    4. सीटी स्कैनर में इमेजिंग बिस्तर पर विषय की व्यवस्था (पर "गर्म पक्ष")

    1. प्रेरण बॉक्स से Anesthetized गिनी पिग निकालें और इमेजिंग बिस्तर पर रखें।
      1. पकड़े गद्दी पर गिनी पिग एक प्रवण स्थिति में रखें।
      2. दोनों आंखों में नेत्र मरहम लागू बाहर सुखाने से कार्निया उपकला की रक्षा के लिए।
    2. रखरखाव isoflurane संज्ञाहरण प्रशासन।
      1. गिनी पिग पर नाक शंकु की जगह और नाक शंकु 8 को 1 एल / मिनट ऑक्सीजन का उद्धार करने के लिए गैस पर बारी।
      2. vaporizer सेट का 2-3% वितरित करने के लिएनाक शंकु के माध्यम से करने के लिए गिनी पिग isoflurane।
      3. एक बार इस विषय संज्ञाहरण के वांछित विमान (कोई आंदोलन, ~ प्रति मिनट 60 श्वास) पर पहुंच गया है, vaporizer संज्ञाहरण के रखरखाव के लिए isoflurane की 1.0-1.5% देने के लिए सेटिंग को कम।
      4. शरीर का तापमान, हृदय गति, और श्वसन दर सहित महत्वपूर्ण संकेत मॉनिटर। सांस की दर में तेजी लाने के लिए या धीमा, वृद्धि या कमी isoflurane का प्रतिशत क्रमश: 9 शुरू होता है।
    3. एक अतिरिक्त गर्मी स्रोत 37 और 39 डिग्री के बीच सी, यदि आवश्यक हो, डाटा अधिग्रहण और संज्ञाहरण की गहराई की उम्मीद है और लंबाई के आधार पर बनाए रखा 8,9 गिनी पिग शरीर का तापमान बनाए रखने के लिए प्रदान करें।
    4. पकड़े तकिया के शीर्ष पर एक प्लास्टिक कवर सुरक्षित।
    5. रोकथाम ट्यूब में इमेजिंग बिस्तर अग्रिम।

    5. दृश्य की छवि क्षेत्र सेटिंग

    1. सीटी अनुसूचित जाति के "ठंड की ओर" पर लेजर प्रणाली (इमेजिंग स्टाफ) को सक्रिय करेंAnner कमरे सीटी स्कैन के लिए गिनी पिग की स्थिति है। लेजर क्रॉसहेयर के तहत ब्याज की शरीर रचना विज्ञान कवर करने के लिए और "बाहर" बटन "में" तालिका का उपयोग करें।
    2. देखने के क्षेत्र सेट करने के लिए ब्याज की शरीर रचना विज्ञान पर शुरू बिंदु निर्धारित करने के लिए लेजर बटन का उपयोग करें।
    3. "गर्म पक्ष" पर संपर्क मुख्यमंत्री स्टाफ खुद को और सीटी स्कैनर के बीच एक का नेतृत्व ढाल जगह है।

    6. मोल छवियाँ

    1. निर्माता प्रोटोकॉल के अनुसार सीटी अध्ययन छवियों के लिए टुकड़ा प्लेसमेंट के लिए सर्वेक्षण स्कैन मोल।
    2. सर्वेक्षण के चित्र पर सीटी अध्ययन छवियों के लिए टुकड़ा नियुक्ति को लिख।
    3. 'हॉट साइड "के कर्मियों के साथ समन्वय स्थापित करता है, तो इसके विपरीत इंजेक्शन का इस्तेमाल किया जा रहा है।
    4. निर्माता प्रोटोकॉल के अनुसार अध्ययन स्कैन मोल।
    5. निर्माता प्रोटोकॉल के अनुसार स्कैनर कंसोल पर सीटी छवियों पुनर्निर्माण किया।
    6. एक चित्र संग्रह और संचार प्रणाली के लिए छवियों को भेजें। आगे गुणात्मक और योग्यता के रूप में कार्य करेंntitative निर्माता प्रोटोकॉल के अनुसार इस संग्रह प्रणाली से विश्लेषण करती है।

    7. पोस्ट-स्कैन वसूली

    1. भोजन और व्यवहार के साथ एक साफ microisolator पिंजरे के लिए स्कैनर बिस्तर से गिनी पिग स्थानांतरण।
    2. गाड़ी का उपयोग करना, वापस अपने आवास क्षेत्र के लिए पशु के साथ पिंजरे परिवहन।
    3. पशु मॉनिटर जब तक पूरी तरह से संज्ञाहरण से बरामद किया।
    4. एक बार पूरी तरह से ठीक है, उच्च दक्षता कण हवा (HEPA) को पिंजरे लौटने के हवादार रैक -filtered।

    8. स्कैनर खाड़ी और उपकरण की कीटाणुशोधन

    1. स्कैनर खाड़ी क्षेत्र कीटाणुरहित (जैसे, सतहों कि पशु, स्कैनर बिस्तर, स्कैनर कमरे के फर्श, दरवाजे के हैंडल के साथ सीधे संपर्क में थे) 10 मिनट के साथ संपर्क समय के लिए एक 5% दोहरी चतुर्धातुक अमोनियम समाधान के साथ।
    2. कुल्ला दोहरी चतुर्धातुक अमोनियम समाधान के लिए एक 10 मिनट के प्रदर्शन के बाद एक 70% इथेनॉल समाधान के साथ सतहों।
    3. आइटम है कि सीधे छिड़काव नहीं किया जा सकता साफ कर लेंदोहरी चतुर्धातुक अमोनियम समाधान (प्रति संवेदनशील इलेक्ट्रॉनिक उपकरण) एक दोहरे चतुर्धातुक अमोनियम संतृप्त कपड़ा एक इथेनॉल संतृप्त कपड़े द्वारा पीछा के साथ साथ।

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Representative Results

जानवर से निपटने के लिए सभी सुरक्षा प्रक्रियाओं और मानक संचालन प्रक्रियाओं का कड़ाई से पालन एक ABSL -4 प्रयोगशाला में सुरक्षित रूप से काम करने के लिए आवश्यक है। इमेजिंग सूट करने के लिए पशु प्रक्रिया के कमरे से प्रेरण बॉक्स के भीतर संक्रमित पशुओं के हस्तांतरण आम गलियारों के संक्रमण के जोखिम को कम करता है। प्रक्रियाओं की आवश्यकता का पालन करके, कोई प्रयोगशाला का अधिग्रहण संक्रमण या पशु विषयों के पार संदूषण जबकि आईआरएफ-फ्रेडरिक पर ABSL -4 अनुसंधान कर दर्ज किया गया है।

ABSL -4 वायरल रोगजनकों फेफड़ों संबंधी विकृतियों 10,11 पैदा कर सकते हैं, और सीटी संक्रमण के पशु मॉडल में रोग प्रगति की निगरानी के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण है। सीटी छवियों के ऊतकों में एक्स-रे विकिरण के अवशोषण से बनाई गई हैं, और इमेजिंग प्रयोगों की आवश्यकता संज्ञाहरण की राशि को कम करने के लिए अपेक्षाकृत जल्दी से किया जा सकता है। सीटी में, अधिक से अधिक densiवस्तु की Ty जैसे हड्डी के रूप में, imaged, उज्जवल वस्तु (चित्रा 2) प्रकट होता है। अंग के ऊतकों का घनत्व, मध्यवर्ती तीव्रता (ग्रे) के हो जाते हैं, जबकि इस तरह के स्वस्थ फेफड़ों के रूप में हवा से भरा ऊतकों, काला दिखाई देते हैं। सीटी कि शरीर के एक 3-आयामी दृष्टिकोण में खंगाला है एक 360 डिग्री से अधिक दृश्य के कई रेडियोग्राफ प्राप्त कर लेता है। अंगों और संक्रामक रोग संबंधी विकृतियों के बीच अधिक से अधिक चित्रण के लिए, नसों में विपरीत एजेंटों का इस्तेमाल किया जा सकता है।

आकृति 1
चित्रा 1:। आईआरएफ-फ्रेडरिक पर इमेजिंग तौर तरीकों के उच्च रोकथाम डिजाइन इस डिजाइन "गर्म" और "ठंड" पक्षों में इमेजिंग सूट अलग करती है। विशेष ट्यूब "ठंड की ओर" पर एक स्कैनर की तंग करती में "गर्म पक्ष" के उच्च रोकथाम अंतरिक्ष का विस्तार बनाया गया है। इमेजिंग वैज्ञानिकों और प्रौद्योगिकीविदों से स्कैनर संचालित4;। ठंड की ओर गर्म पक्ष "" जबकि तुलनात्मक चिकित्सा (मुख्यमंत्री) के कर्मचारियों के हैंडल और जानवरों पर नजर रखने के लिए " कृपया यहां यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए क्लिक करें।

आकृति 1
चित्रा 2:। एक गिनी पिग की ऊपरी धड़ की सीटी छवि एक्स-रे अवशोषण हड्डी (ए) छवि में प्रतिभाशाली दिखाई देगा, और हवा (बी, फेफड़े के ऊतकों) अंधेरी दिखाई देगा, और नरम ऊतक की हड्डी में अधिक से अधिक है, इसलिए (सी: दिल, डी: जिगर)। इसके विपरीत मध्यवर्ती दिखाई देगा (ए) बीएसएल 4 वायरल रोगजनकों प्रेरित फेफड़ों संबंधी विकृति, सीटी संक्रमण के पशु मॉडल में निगरानी रोग प्रगति के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण बना रही है उसे क्लिक करेंई यह आंकड़ा का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए।

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Discussion

इस श्रृंखला में पिछले लेख व्यापक प्रशिक्षण, विस्तार, सुरक्षा प्रक्रियाओं, और एक अधिकतम रोकथाम प्रयोगशाला 12,13 में सुरक्षित रूप से काम करने के लिए आवश्यक अतिरिक्त इंजीनियरिंग नियंत्रण करने के लिए ध्यान देने की बात पर जोर दिया है। काम को सुरक्षित रूप से प्रदर्शन कर इन प्रयोगशालाओं में सर्वोच्च प्राथमिकता है। संक्रमित जानवरों के काटने या खरोंच दण्ड करने के लिए या एयरोसौल्ज़ 7 उत्पन्न करने के लिए इस दर्शन में इस तरह के संभावित खतरों के रूप में अतिरिक्त के कारण और भी अधिक महत्वपूर्ण है जब जीवित पशुओं के साथ काम कर रहा है। इन प्रक्रियाओं इमेजिंग के कमरे के लिए होल्डिंग कमरे से सुरक्षित हैंडलिंग और जानवरों के परिवहन पर जोर। संज्ञाहरण के दौरान पशु जोड़तोड़ और निगरानी जबकि एक ABSL -4 प्रयोगशाला में काम करने के लिए आवश्यक विस्तार और सुरक्षा कारणों के लिए दर्शक ध्यान की एक यथार्थवादी चित्रण देने के लिए प्रदर्शन कर रहे हैं।

हम एक गिनी पिग की एक सीटी स्कैन का उपयोग कर एक ABSL -4 प्रयोगशाला में गैर इनवेसिव मेडिकल इमेजिंग प्रदर्शन करने के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णनउदहारण के लिए। कई कदम बीएसएल 4 प्रयोगशाला में सफल इमेजिंग के लिए महत्वपूर्ण हैं। पहला महत्वपूर्ण कदम पुष्टि है कि सुरक्षा जाँच सुनिश्चित करने के लिए सभी सुरक्षा प्रणालियों लैब 5 में प्रवेश से पहले ठीक से काम कर रहे हैं पूरा कर रहे हैं शामिल। कर्मचारियों को सुनिश्चित करने के लिए वे बीएसएल 4 प्रयोगशाला में सुरक्षित रूप से काम कर रहे हैं उचित प्रवेश और निकास प्रक्रियाओं का पालन करना चाहिए। दूसरा महत्वपूर्ण कदम सत्यापित करने के लिए है कि कर्मचारियों को या तो कमरे स्कैन में मौजूद नहीं हैं या वे एक्स-रे ट्यूब और बाद में किसी भी स्कैन की कंडीशनिंग के दौरान एक पोर्टेबल नेतृत्व ढाल के पीछे हैं। यह निर्धारित करने के लिए कि सीटी स्कैनर तैयार है और anesthetizing और इमेजिंग के लिए जानवरों को तैयार करने से पहले ठीक से काम कर रहा है महत्वपूर्ण है। अगले महत्वपूर्ण कदम के लिए एक उपयुक्त प्रेत के साथ एक गुणवत्ता नियंत्रण स्कैन प्रदर्शन और पशु तकनीशियनों को सूचित करें जब सीटी स्कैनर परिचालन और उपयोग के लिए तैयार है के लिए है। स्पष्ट और प्रभावी संचार भी इमेजिंग प्रोटोकॉल पर अमल करने के रूप में जानवर से निपटने के कर्मचारियों को शारीरिक रूप से separ हैं महत्वपूर्ण हैइमेजिंग प्रौद्योगिकीविदों "ठंड की ओर" पर स्कैनर संचालन से पैदा।

एक बीएसएल 4 प्रयोगशाला में मेडिकल इमेजिंग सभी जानवर से निपटने प्रक्रियाओं के रूप में एक चुनौतीपूर्ण प्रक्रिया है, जबकि सकारात्मक दबाव सूट और दस्ताने के कई जोड़े, भारी सूट दस्ताने सहित पहने किया जाना चाहिए है। बेसिक जानवर से निपटने प्रक्रियाओं बीएसएल 4 प्रयोगशाला के सुरक्षा कारणों से फिट करने के लिए संशोधित कर रहे हैं। जाग जानवरों की हैंडलिंग और कम से कम के काटने या खरोंच की संभावना को कम करने के लिए संशोधित किया गया है। उदाहरण के लिए, चमड़े का काम-दस्ताने जब जाग गिनी सूअरों और अन्य बड़े मूषक उठा सूट दस्ताने की रक्षा के लिए पहने जाते हैं। चूहे केवल संदंश के साथ नियंत्रित किया जाता है और उन्हें intraperitoneal इंजेक्शन के लिए scruffing से पहले पहले anesthetized किया जाना चाहिए। इंजेक्शन तकनीक सुरक्षा के एक उच्च डिग्री सुनिश्चित करने के लिए संशोधित करने की आवश्यकता हो सकती है। संदंश और / या संयम उपकरणों बल्कि अकेले हाथ संयम का उपयोग करने से कृन्तकों में इंजेक्शन प्रदर्शन करने के लिए इस्तेमाल कर रहे हैं। जटिलता और समय perf करने की जरूरतORM इमेजिंग साधन चुना और इस्तेमाल किया प्रजातियों सहित कई कारकों पर निर्भर करता है। प्रदर्शन सीटी स्कैन के लिए सीमाएं निश्चित प्रयोगशाला जानवरों की प्रजातियों के विपरीत एजेंटों का प्रबंध करने में कठिनाई शामिल हैं। गिनी सूअर, विशेष रूप से, नसों के एक विपरीत एजेंट के प्रशासन के लिए आसानी से सुलभ नसों की जरूरत नहीं है। इस प्रशासन के साथ कठिनाई ठीक मोटर हेरफेर, जबकि व्यक्तिगत सुरक्षा उपकरण पहनने की कठिनाई से बढ़ रहा है। इसके अतिरिक्त, इसके विपरीत एजेंट इंजेक्शन का समय "ठंड की ओर" है कि स्कैनर काम कर रहे हैं पर कर्मचारियों के साथ समन्वय होना चाहिए।

इमेजिंग सुविधा के अद्वितीय डिजाइन चुनौतियों है कि इमेजिंग तकनीक के संशोधन की आवश्यकता पैदा करता है। एक चुनौती इमेजिंग प्रौद्योगिकीविदों जो स्कैनिंग उपकरणों और जानवर से निपटने और जानवरों की निगरानी के तकनीशियनों को चलाने के भौतिक जुदाई के कारण संचार के साथ मुश्किल था। अंदर पहना हेडसेट के साथ ब्लूटूथ फोनसूट में समन्वय और स्कैन प्रदर्शन करने के लिए इमेजिंग प्रौद्योगिकीविदों के साथ संवाद करने के लिए उपयोग किया जाता है। इस संचार विधि विफल रहता है, सफेद बोर्डों पर हाथ से लिखा संदेश प्रयोगशाला खिड़कियों के माध्यम से प्रदर्शित किया जा सकता है। प्रत्येक इमेजिंग साधन के डिजाइन एक विशेष ट्यूब जो प्रत्येक स्कैनर के बोर में उच्च रोकथाम सुविधा का विस्तार भी शामिल है। बाद प्रत्येक इमेजिंग विषय एक इमेजिंग बिस्तर पर तैनात है, विषयों तकनीशियनों जो उन पर नजर रखने, जबकि संज्ञाहरण के तहत करने से अधिक दूरी और कम दिखाई दे रहे हैं। लंबे समय तक संज्ञाहरण सर्किट, निगरानी केबल, और अर्क लाइनों इस डिजाइन में आवश्यक हैं।

आईआरएफ-फ्रेडरिक क्षमता nonhuman प्राइमेट के लिए चूहों से प्रयोगशाला पशुओं की एक किस्म में बायोमेडिकल इमेजिंग प्रदर्शन किया है। सीटी संक्रामक रोगों के पशु मॉडल की एक किस्म में रोग प्रगति पर नजर रखने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है। टीकों सहित संभावित उपचारात्मक उपायों, की प्रभावकारिता का मूल्यांकन, और disea के बायोमार्कर की पहचानएसई प्रक्रियाओं इस तकनीक के भविष्य के आवेदन कर रहे हैं।

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Materials

Name Company Catalog Number Comments
Micro-Chem Plus National Chemical Laboratories 255
CT scanner Philips Healthcare
CT phantom Philips Healthcare
Isovue-300 (CT contrast reagent) Bracco Diagnostics NDC 0270-1315-30
Ventilated rack Lab Products
Micro-isolator cage Lab Products
Biosafety cabinet Nuaire
Anesthesia machine SurgiVet WWV9000
Anesthesia induction box VetEquip
Anesthesia mask Henry Schein
Isoflurane Henry Schein
Waste gas scavenging canister Fisher F/AIR
Holding cushion
Ophthalmic ointment
Vital signs monitor Bionet BM3Vet
Mobile phone Spectralink 8440
Blue Tooth ear piece
Wireless access points
Sperian positive-pressure suit Honeywell Safety Products BSL 4-2
Outer suit gloves (latex, Ansell Canners and Handlers) Fisher 19-019-601
Outer suit gloves (nitrile/rubber, MAPA) Fisher 2MYU1
Scrubs Cintas 60975/60976
Socks Cintas 944
Duct tape Pack-N-Tape 51131069695
Towels Cintas 2720
Zip lube Amazon B000GKBEJA

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References

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