احتياطات السلامة وإجراءات التشغيل في (A) BSL-4 مختبر: 4. إجراءات التصوير الطبية

Immunology and Infection

Your institution must subscribe to JoVE's Immunology and Infection section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

 

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Byrum, R., Keith, L., Bartos, C., St. Claire, M., Lackemeyer, M. G., Holbrook, M. R., Janosko, K., Barr, J., Pusl, D., Bollinger, L., Wada, J., Coe, L., Hensley, L. E., Jahrling, P. B., Kuhn, J. H., Lentz, M. R. Safety Precautions and Operating Procedures in an (A)BSL-4 Laboratory: 4. Medical Imaging Procedures. J. Vis. Exp. (116), e53601, doi:10.3791/53601 (2016).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

Introduction

بعثة من المعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية مرفق البحوث المتكاملة في فورت ديتريك في فريدريك MD (IRF-فريدريك) هو إجراء بحوث الأمراض المعدية الناشئة على فهم العمليات المرض السريرية التي ترتبط شدة الميكروبية التي يسببها مرض. وIRF-فريدريك لديه قدرة فريدة على أداء التصوير الطبي في النماذج الحيوانية من مسببات الأمراض عالية نتيجة في لABSL-4 مختبر 1. طرائق التصوير المتاحة للمحققين ما يلي: التصوير المقطعي (CT) والتصوير بالرنين المغناطيسي (MRI)، التصوير المقطعي بالإصدار البوزيتروني (PET)، واحد الفوتون التصوير المقطعي (SPECT) والموجات فوق الصوتية، والأشعة السينية، والتنظير. يستخدم الباحثون قدرات التصوير المتاحة لمراقبة تطور المرض وتقييم فعالية التدخلات، مثل العلاج من تعاطي المخدرات والتطعيم، في الدراسات الطولية.

وكانت طرائق التصوير في IRF-فريدريك تحديدامصممة للحفاظ على المكونات الأساسية للمعدات خارج احتواء ارتفاع 2،3 ويمكن الوصول للصيانة والإصلاح. هذا التصميم يفصل جناح التصوير في "الساخنة" (التي تحتوي على العوامل المسببة للأمراض) و"الجانبين الباردة." لتحقيق هذا الفصل، تم إنشاء أنابيب مصممة خصيصا لتوسيع مساحة عالية الاحتواء في المملون من كل طريقة التصوير (الشكل 1). وبالإضافة إلى توفير الاحتواء البيولوجي، هذه الأنابيب تحمي معدات التصوير من الغازات والمواد الكيميائية المستخدمة لتطهير المختبر عالية الاحتواء. العلماء والتكنولوجيين التصوير تشغيل الماسحات الضوئية من "الجانب البارد" في حين الطب المقارن (CM) التعامل مع الموظفين ومراقبة الحيوانات في "الجانب الساخنة". منذ الموظفين CM يجب أن تعمل بشكل وثيق مع العلماء التصوير لتنسيق هذه التجارب، يمكن لهذا الفصل يؤدي إلى تحديات الاتصالات.

بعد تقييم الخيارات المتاحة، كان موظفو CM خارجمزودة قطع الأذن بلوتوث التي تنقل الطول الموجي القصير تردد فائقة موجات الراديو لهواتف تستخدم لاستدعاء الموظفين التصوير خارج الاحتواء. ويرجع ذلك إلى تصميم المنشأة، كان لا بد من تثبيتها في كل من الغرف للتغلب على تدخل إشارة الناجمة عن طبقات من الاسمنت والصلب بين "الساخنة" و "الجانبين الباردة" نقطة وصول لاسلكية. وبالتالي، التواصل بين الموظفين سم يرتدي صاخبة الدعاوى الضغط الإيجابي والموظفين التصوير خارج عالية الاحتواء هو الآن يمكن الاعتماد عليها. كما تم تركيب كاميرات على الجانب الساخن من الغرف التصوير لتصوير الموظفين للاطلاع على النشاط على "الجانب الساخنة". مع الكاميرات، يمكن للموظفين التصوير توجيه الفنيين سم مع وضع الحيوان أو أي تغييرات في اللحظة الأخيرة لبروتوكول التصوير.

كل عمل في IRF-فريدريك ABSL-4 دعوى المختبر يتطلب الموظفين لارتداء إيجابي الضغط التغليف الدعاوى 4. ارتداء هذه الدعاوى يقلل من التنقل، والثقيلة في وقت متأخرس قفازات المرفقة في الدعوى إلى جانب ما يصل إلى ثلاث طبقات إضافية من القفازات التنازلات البراعة. والنتيجة هي أن الإجراءات تستغرق وقتا أطول لاستكمال والمهام التي تتطلب المهارات الحركية الدقيقة أكثر صعوبة بكثير. كما يزيد مستوى السلامة الحيوية، التعامل مع الحيوانات والتلاعب تصبح أكثر صعوبة وتستغرق وقتا طويلا، لاسيما مع الحيوانات الصغيرة. الإجراءات في مختبر ABSL-4 يمكن أن يستغرق ما يصل إلى 2-3 مرات أطول من مختبر ABSL-2.

والغرض من هذه المقالة هو لإظهار بصريا التحديات المرتبطة نماذج التصوير الحيوان في بيئة ABSL-4 باستخدام التصوير المقطعي إجراء المسح الضوئي للخنزير غينيا على سبيل المثال.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

يلتزم هذا البروتوكول إلى المبادئ التوجيهية رعاية الحيوان التالية. وتم إيواء الحيوانات في منشأة معتمدة من قبل رابطة للتقويم والاعتماد في مختبر رعاية الحيوان الدولية. وقد وافق جميع الإجراءات التجريبية من قبل المعهد الوطني للحساسية والأمراض المعدية، قسم البحوث السريرية، رعاية الحيوان واستخدام اللجنة وكان في الامتثال للوائح قانون رعاية الحيوان، سياسة دائرة الصحة العامة، ودليل لرعاية واستخدام توصيات الحيوانات المختبرية.

1. إعداد ماسح الصور المقطعية المحوسبة (على "الجانب الباردة")

  1. تشترط وجود أنبوب الأشعة السينية
    1. تحقق من عدم وجود الموظف في غرفة المسح والجدول الموضوع فارغ.
    2. تشغيل الإجراء تكييف أنبوب وفقا لمواصفات الشركة المصنعة الماسح الضوئي.
  2. أداء الهواء المعايرة
    1. تأكد من أن أي الكائنات في مجال المسح الضوئي. تنفيذ الإجراء معايرة الهواء وفقا لمواصفات الشركة المصنعة الماسح الضوئي. على العديد من المنصات، هذه المعايرة هي صناعة السيارات في أو نصف آلية.
  3. أداء التحكم تفحص الجودة (على "الجانب الساخن")
    1. إتمام إجراءات الدخول ABSL-4 دعوى مختبر (المبينة بالتفصيل في إشارة 5) مع إضافة خطوة إضافية. إذا إجراءات تنطوي على التعرض للمواد المشعة، لقطة لقياس الجرعات الاشعاعية لالدعك تحت دعوى وقائية. بدوره الجرعات كل 2 أشهر لحساب التعرض للإشعاع.
    2. وضع CT الرأس والجسم الوهمية، والتي تتم من الهواء والماء وتفلون، في حامل المناسب على طاولة الفحص.
  4. أداء التحكم تفحص الجودة (على "الجانب الباردة")
    1. من الجانب البارد، ودفع الوهمية في وسط تجويف 6.
    2. الحصول على المسح الضوئي باستخدام جهاز تحكم مختبر موحدة جودة المعلمات (QC) إلى ENSلدى عودتهم الماسح الضوئي ضمن مواصفات الشركة الصانعة.
    3. أداء QC تحليل محوسب من الصور لحساب الانحرافات متوسط ​​ومستوى كثافة إشارة في المناطق ذات الاهتمام تركز على كل نوع مادية (الهواء أو الماء أو تفلون) وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة.
    4. إبلاغ الموظفين CM أن ماسح التصوير المقطعي جاهز للاستخدام.
    5. التحقق من المعلومات الحيوان (رقم الهوية، والوزن، وتاريخ الميلاد) مع الموظفين سم.
  5. تسجيل معلومات الموضوع إلى قاعدة بيانات المرضى.
    1. في وحدة التحكم CT الماسح الضوئي (على "الجانب البارد")، والوصول إلى نظام معلومات الأشعة الماسح الضوئي (RIS). تأكد من أن RIS يتم ملؤها مع تفاصيل الجدول الزمني للمسح.
    2. اختيار موضوع والتركيبة السكانية مثل رقم الهوية والعمر وتاريخ الميلاد، وتاريخ الامتحان الحالي. ثم، يجب على نوع الامتحان تعبئة تلقائيا.
    3. يدويا إدخال الوزن يخضع.
    4. اختيار الصحيح سوالتوجه bject في CT العملاقة (على سبيل المثال، أول رئيس والقدمين أولا، عرضة، ضعيف).

2. إعداد مجالات العمل في مختبر البدلة ABSL-4

  1. إعداد الدرجة الثانية للسلامة الأحيائية مجلس الوزراء (BSC) أو التيار المنخفض الجدول في الغرفة الإجراءات الحيوان. تشغيل ش.م.ب (أو التيار المنخفض الجدول) على الأقل 10 دقيقة قبل الاستخدام.
    1. (ميثيل ايثيل البنزيل كلوريد الأمونيوم ن alkyl- كلوريد الأمونيوم ثنائي ميثيل البنزيل، ن ألكيل) محلول مطهر نظيفة وتطهير الأسطح الداخلية للBSC أو السطح العلوي من الجدول اسفل باستخدام مطهر وافق مثل 5٪ ثنائي الأمونيوم الرباعية. رش الأسطح الداخلية للBSC أو السطح العلوي من الجدول اسفل ومسح الأسطح الجافة بعد 10 دقيقة من وقت الاتصال. الرش ومسح الأسطح مع الايثانول 70٪ لإزالة مطهر المتبقية.
    2. المعدات مكان والإمدادات اللازمة في الجدول BSC أو اسفل، بما في ذلك المربع التخدير تحريض والحيوانية معالجة قفازات.
    3. رأ>
    4. إعداد سرير ماسح الصور المقطعية المحوسبة.
      1. انشاء الجهاز عقد الحيوان على السرير CT.
      2. انشاء العلامات الحيوية مراقبة للكشف عن معدل ضربات القلب وتشبع الأكسجين. إذا جلسة المسح أطول من 10 دقيقة، ومراقبة درجة الحرارة.
    5. إعداد آلة التخدير.
      1. تحقق من حجم الأيزوفلورين في المرذاذ وإضافة المزيد من الأيزوفلورين إذا لزم الأمر.
      2. إجراء اختبار تسرب من الضغط على الدائرة التنفس التخدير مع الأكسجين، والتحقق من الغاز هرب، والتفتيش بصريا آلة التخدير لتسرب 1.
        1. إذا تم الكشف عن تسرب، وتحديد المصدر، تصحيح المشكلة، وإجراء اختبار تسرب المتابعة للتحقق من تم تنفيذها بشكل صحيح التصحيحات.
      3. وزن العلبة الكسح المتاح الذي يلتقط غاز مخدر النفايات. إذا العلبة هي ≥50 ز على الوزن الأولي من العلبة، استبدال علبة 7.
    عنوان "> 3. نقل الحيوان من غرفة الحيوان الإجرائية وإعداد التخدير التعريفي في غرفة الماسح الضوئي CT (على" الجانب الساخن ")

    1. نقل قفص الإسكان غينيا خنزير من واحدة من غرف القوارض القابضة المجاورة لجناح التصوير في الدرجة وش.م.ب الثاني.
      1. التحقق من هوية الحيوان.
      2. إزالة بطاقة قفص والحفاظ مع الحيوان.
    2. فتح غطاء للقفص وارتداء قفازات جلد واقية الحيوانية على قفازات دعوى الضغط الإيجابي. اختيار برفق خنزير غينيا، وضع الحيوان في المربع التخدير التعريفي، وتغطية مربع مع غطاء.
    3. إزالة مربع التخدير تحريض تحتوي على الحيوان من ش.م.ب الدرجة الثانية ووضعه على عربة النقل.
    4. باستخدام عربة، واتخاذ الحيوان إلى غرفة ماسح التصوير المقطعي.
    5. في غرفة الماسح الضوئي CT، الاتصال فورا العلبة الكسح وآلة التخدير إلى مربع الاستقراء. بدوره على غاز الأكسجين إلى مربع تحريض وتعيين المرذاذ إلى delivإيه 4٪ الأيزوفلورين لتحريض الأولي التخدير 8.
    6. مراقبة الحيوانات خلال تحريض التخدير لعمق كاف من التخدير (على سبيل المثال، لا يستجيب للمؤثرات الخارجية، لهجة العضلات والجهاز التنفسي مستقر ومعدل ضربات القلب) 8.
    7. إيقاف التخدير إلى مربع الاستقراء عند تخدير خنزير غينيا تماما.

    4. ترتيب الموضوع على التصوير سرير في ماسح الصور المقطعية المحوسبة (على "الجانب ساخن")

    1. إزالة تخدير خنزير غينيا من صندوق الحث ومكان على السرير التصوير.
      1. وضع خنزير غينيا على وسادة عقد في وضعية الرقود.
      2. تطبيق مرهم للعين في كلتا العينين لحماية ظهارة القرنية من الجفاف.
    2. إدارة الصيانة الأيزوفلورين التخدير.
      1. وضع مخروط الأنف على خنزير غينيا وتشغيل الغاز لتقديم 1 لتر / دقيقة من الأكسجين إلى مخروط الأنف 8.
      2. تعيين المرذاذ لتسليم 2-3٪ منالأيزوفلورين إلى خنزير غينيا عبر مخروط الأنف.
      3. مرة واحدة هذا الموضوع قد وصلت الطائرة المطلوب من التخدير (عدم الحركة، و~ 60 نفسا في الدقيقة)، والحد من المرذاذ الإعداد لتقديم 1،0-1،5٪ من الأيزوفلورين لصيانة التخدير.
      4. مراقبة العلامات الحيوية بما في ذلك درجة حرارة الجسم ومعدل ضربات القلب، ومعدل التنفس. إذا بدأ معدل التنفس لتسريع أو إبطاء، زيادة أو نقصان في المئة من الأيزوفلورين على التوالي 9.
    3. توفير مصدر حرارة إضافية للحفاظ على خنزير غينيا درجة حرارة الجسم بين 37 و 39 درجة مئوية، وإذا لزم الأمر، اعتمادا على طول المتوقع من الحصول على البيانات وعمق التخدير الحفاظ 8،9.
    4. تأمين غطاء من البلاستيك على الجزء العلوي من وسادة عقد.
    5. تقدم السرير التصوير في أنبوب الاحتواء.

    5. وضع حقل صورة مشاهدة

    1. تفعيل نظام ليزر (الموظفين التصوير) على "الجانب البارد" للالشوري CTanner الغرفة لوضع خنزير غينيا لالفحص بالاشعة المقطعية. استخدم الجدول "في" أزرار و "الخروج" لتغطية التشريح الفائدة في ظل مرمى الليزر.
    2. لضبط مجال الرؤية، استخدم زر ليزر لتحديد نقطة انطلاق على تشريح الفائدة.
    3. موظفو الاتصال سم على "الجانب الساخن" لوضع درع الرصاص بينهم وبين ماسح التصوير المقطعي.

    6. الحصول على صور

    1. الحصول على فحص مسح لوضع شريحة للصور الدراسة المقطعية وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة.
    2. وصف وضع شريحة للصور دراسة CT على صور المسح.
    3. التنسيق مع موظفي "جانب الساخنة" إذا حقن المقابل لاستخدامه.
    4. الحصول على فحص الدراسة وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة.
    5. إعادة بناء الصور المقطعية في وحدة الماسح الضوئي وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة.
    6. إرسال الصور إلى أرشفة الصور ونظام الاتصالات. أداء مزيد من النوعية وغنى عنهntitative تحليلات من هذا النظام الأرشفة وفقا لبروتوكول الشركة المصنعة.

    7. بعد المسح الانتعاش

    1. نقل خنزير غينيا من الماسح الضوئي إلى قفص microisolator نظيفة مع الطعام ويعامل.
    2. عن طريق العربة، نقل القفص مع الحيوان إلى منطقة السكن فيها.
    3. مراقبة الحيوانات حتى تعافى تماما من التخدير.
    4. مرة واحدة تعافى تماما، والعودة القفص إلى ذات الكفاءة العالية جسيمات الهواء (HEPA) -filtered رفوف التهوية.

    8. تطهير خليج الماسح الضوئي ومعدات

    1. تطهير منطقة الخليج الماسح الضوئي (على سبيل المثال، السطوح التي كانت على تماس مباشر مع الحيوان، الماسح الضوئي، أرضية غرفة الماسح الضوئي، مقابض الأبواب) بمحلول الامونيا 5٪ ثنائي رباعي لفترة الاتصال من 10 دقيقة.
    2. شطف السطوح مع حل الإيثانول 70٪ بعد التعرض لمدة 10 دقيقة إلى حل الأمونيوم الرباعية المزدوج.
    3. مسح العناصر التي لا يمكن رشها مباشرةمع حل ثنائي الأمونيوم الرباعية (المعدات الإلكترونية الحساسة) بقطعة قماش مشبعة ثنائي رباعي الأمونيوم، تليها قطعة قماش مشبعة الإيثانول.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

الالتزام الصارم لجميع إجراءات السلامة وإجراءات التشغيل الموحدة للتعامل مع الحيوان هو ضروري للعمل بأمان في مختبر ABSL-4. نقل الحيوانات المصابة داخل مربع تحريض من الغرفة إجراء الحيوان إلى جناح التصوير يقلل من خطر تلوث الممرات المشتركة. وذلك باتباع الإجراءات المطلوبة، وقد تم تسجيل أية العدوى المكتسبة من المختبر أو انتقال التلوث من الموضوعات الحيوان أثناء إجراء البحث ABSL-4 في IRF-فريدريك.

يمكن ABSL-4 مسببات الأمراض الفيروسية تحفز الأمراض ذات الصلة الرئة 10،11، والتصوير المقطعي هو أداة قيمة لرصد تطور المرض في النماذج الحيوانية للعدوى. يتم إنشاء الصور المقطعية من امتصاص الأشعة السينية في الأنسجة، وتجارب التصوير لا يمكن أن يؤديها بسرعة نسبيا، والتقليل من كمية التخدير المطلوبة. في CT، وزيادة densiتاي من وجوه تصوير، مثل العظام، وأكثر إشراقا الكائن يظهر (الشكل 2). كثافة أنسجة الجهاز تميل إلى أن تكون كثافة المتوسطة (الرمادي)، في حين أن الأنسجة مليئة بالهواء مثل الرئتين صحية، تظهر سوداء. CT تستحوذ على الصور الشعاعية متعددة على مدى 360 درجة التي أعيد بناؤها في طريقة عرض 3 الأبعاد من الجسم. لمزيد من ترسيم بين الأجهزة والأمراض ذات الصلة الأمراض المعدية، ويمكن استخدام عوامل التباين في الوريد.

شكل 1
الشكل 1: تصميم الاحتواء عالية من طرائق التصوير في IRF-فريدريك هذا التصميم يفصل جناح التصوير في الجانبين "الباردة" "الساخنة" و. المصممة خصيصا أنابيب تمتد على مساحة الاحتواء عالية من "الجانب الساخن" في المملون من كل الأطياف في "الجانب البارد". العلماء والتكنولوجيين التصوير تشغيل الماسحات الضوئية من(4)؛ الجانب البارد "في حين الطب المقارن (CM) التعامل مع الموظفين ومراقبة الحيوانات في" الجانب الساخنة " الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

شكل 1
الشكل 2: صورة CT من الجذع العلوي من خنزير غينيا امتصاص الأشعة السينية أكبر في العظام، وبالتالي العظام (A) سوف تظهر ألمع في الصورة، والهواء (B، أنسجة الرئة) سوف تظهر أحلك، والأنسجة الرخوة (C: القلب، D: الكبد). ستظهر وسيطة في المقابل (A) BSL-4 مسببات الأمراض الفيروسية تحفز علم الأمراض ذات الصلة الرئة، مما يجعل CT أداة قيمة لمراقبة تقدم المرض في النماذج الحيوانية للعدوى الرجاء انقر لهاالبريد لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

وقد أكد المواد السابقة في هذه السلسلة على تدريب مكثف، والاهتمام بالتفاصيل، وإجراءات السلامة، والضوابط الهندسية الإضافية المطلوبة للعمل بأمان في أقصى 12،13 احتواء المختبر. أداء العمل بأمان هو أولوية قصوى في هذه المختبرات. هذه الفلسفة هي أكثر أهمية عند التعامل مع الحيوانات الحية نظرا للمخاطر إضافية مثل إمكانية للحيوانات المصابة لإلحاق العض أو الخدش أو لتوليد الهباء 7. وتؤكد هذه الإجراءات في التعامل الآمن ونقل الحيوانات من غرفة الاحتجاز إلى غرف التصوير. وأظهر التلاعب الحيوانية ومراقبة أثناء التخدير لإعطاء المشاهد صورة واقعية من الاهتمام بالتفاصيل واعتبارات السلامة المطلوبة أثناء العمل في مختبر ABSL-4.

نحن تصف بروتوكول لأداء التصوير الطبي غير الغازية في مختبر ABSL-4 باستخدام الاشعة المقطعية للخنزير غينياكمثال. عدة خطوات حاسمة لنجاح التصوير في المختبر BSL-4. الخطوة الأولى الحاسمة يشمل بالتحقق أن يتم الانتهاء من قوائم السلامة لضمان سلامة جميع الأنظمة تعمل بشكل صحيح قبل الدخول إلى المختبر 5. يجب أن الموظفين متابعة إجراءات الدخول والخروج المناسبة للتأكد من أنها تعمل بأمان في المختبر BSL-4. الخطوة الثانية الحاسمة هي للتحقق من أن الموظفين هم إما غير موجود في غرفة المسح أو هم وراء درع الرصاص المحمولة خلال تكييف للأنبوب الأشعة السينية وأي اجراء الفحوصات اللاحقة. من المهم تحديد أن ماسح التصوير المقطعي جاهز ويعمل بشكل صحيح قبل التخدير وإعداد الحيوانات للتصوير. الخطوة الهامة التالية هي إجراء فحص مراقبة الجودة مع الوهمية المناسب وإخطار الفنيين الحيوان عندما ماسح التصوير المقطعي جاهز للعمل وجاهزة للاستخدام. اتصال واضح وفعال مهم أيضا لتنفيذ بروتوكولات التصوير كموظفين التعامل مع الحيوانات وsepar جسدياATED من التكنولوجيين التصوير تشغيل الماسحات الضوئية على "الجانب البارد".

التصوير الطبي في مختبر BSL-4 هو إجراء صعبة حيث أن جميع إجراءات التعامل مع الحيوانات يجب القيام به في حين يرتدي بدلة الضغط الإيجابية وأزواج متعددة من القفازات، بما في ذلك القفازات دعوى الثقيلة. يتم تعديل إجراءات التعامل مع الحيوانات الأساسية لتتناسب مع اعتبارات السلامة في المختبرات BSL-4. يتم التقليل من التعامل مع الحيوانات المستيقظة وتعديلها لتقليل فرص لدغات أو الخدوش. على سبيل المثال، والجلود العمل قفازات يتم ارتداء القفازات لحماية دعوى عند التقاط خنازير غينيا مستيقظا وغيرها من القوارض الكبيرة. يتم التعامل مع الفئران فقط مع ملقط ويجب تخدير أولا قبل scruffing منهم لحقن داخل الصفاق. قد تحتاج إلى تعديل لضمان درجة أعلى من السلامة تقنيات الحقن. يتم استخدام ملقط و / أو أجهزة ضبط النفس لأداء الحقن في القوارض بدلا من استخدام ضبط النفس يد وحده. تعقيد والوقت اللازم لPERFالتصوير مكتب إدارة السجلات يعتمد على عدة عوامل، بما في ذلك طريقة اختيار والأنواع المستخدمة. وتشمل القيود على أداء المقطعية صعوبة في إدارة عوامل التباين لبعض أنواع الحيوانات المختبرية. خنازير غينيا، على وجه الخصوص، لا تملك الأوردة يمكن الوصول إليها بسهولة لإدارة وكيل النقيض من ذلك عن طريق الوريد. وتتفاقم صعوبة مع هذه الإدارة التي كتبها صعوبة التلاعب الحركية الدقيقة في حين ارتداء معدات الوقاية الشخصية. بالإضافة إلى ذلك، فإن توقيت حقن عامل تباين يجب أن تكون منسقة مع الموظفين على "الجانب البارد" التي تعمل الماسح الضوئي.

تصميم فريد من مرفق التصوير يخلق تحديات التي تتطلب إدخال تعديلات على تقنيات التصوير. ومن بين التحديات صعوبة في التواصل بسبب الفصل المادي بين التكنولوجيين التصوير الذين يديرون أجهزة المسح الضوئي والحيوان الفنيين المناولة ومراقبة الحيوانات. هواتف بلوتوث مع سماعات ترتديه داخلتستخدم دعوى للتواصل مع التكنولوجيين التصوير لتنسيق وتنفيذ أعمال المسح. إذا فشل هذا الأسلوب الاتصالات، ويمكن أن يتم عرض رسالة مكتوبة بخط اليد على لوحات بيضاء من خلال نوافذ المختبر. تصميم كل طريقة التصوير ويشمل أنبوب خاص والتي تمتد منشأة الاحتواء عالية في تحمل كل الماسح الضوئي. بعد يتم وضع كل موضوع التصوير على السرير والتصوير، والموضوعات هي مسافة أكبر من وأقل وضوحا إلى الفنيين الذين يراقبون لهم في حين تحت التخدير. مطلوبة أطول الدوائر التخدير، كابلات المراقبة، وخطوط ضخ في هذا التصميم.

وIRF-فريدريك لديها القدرة على أداء والتصوير الطبي الحيوي في مجموعة متنوعة من الحيوانات المختبرية من الفئران لالرئيسات من غير البشر. CT يمكن استخدامها لمراقبة تطور المرض في مجموعة متنوعة من النماذج الحيوانية من الأمراض المعدية. تقييم فعالية التدخلات العلاجية المحتملة، بما في ذلك اللقاحات، وتحديد المؤشرات الحيوية للdiseaالعمليات حد ذاتها هي التطبيقات المستقبلية لهذه التقنية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Micro-Chem Plus National Chemical Laboratories 255
CT scanner Philips Healthcare
CT phantom Philips Healthcare
Isovue-300 (CT contrast reagent) Bracco Diagnostics NDC 0270-1315-30
Ventilated rack Lab Products
Micro-isolator cage Lab Products
Biosafety cabinet Nuaire
Anesthesia machine SurgiVet WWV9000
Anesthesia induction box VetEquip
Anesthesia mask Henry Schein
Isoflurane Henry Schein
Waste gas scavenging canister Fisher F/AIR
Holding cushion
Ophthalmic ointment
Vital signs monitor Bionet BM3Vet
Mobile phone Spectralink 8440
Blue Tooth ear piece
Wireless access points
Sperian positive-pressure suit Honeywell Safety Products BSL 4-2
Outer suit gloves (latex, Ansell Canners and Handlers) Fisher 19-019-601
Outer suit gloves (nitrile/rubber, MAPA) Fisher 2MYU1
Scrubs Cintas 60975/60976
Socks Cintas 944
Duct tape Pack-N-Tape 51131069695
Towels Cintas 2720
Zip lube Amazon B000GKBEJA

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Jahrling, P. B., et al. The NIAID Integrated Research Facility at Frederick, Maryland: a unique international resource to facilitate medical countermeasure development for BSL-4 pathogens. Pathog Dis. (2014).
  2. de Kok-Mercado, F., Kutlak, F. M., Jahrling, P. B. The NIAID Integrated Research Facility at Fort Detrick. Appl Biosafety. 16, 58-66 (2011).
  3. Keith, L., et al. Preclinical imaging in BSL-3 and BSL-4 envrionments: imaging pathophysiology of highly pathogenic infectious diseases. Moyer, B. R., Cheruvu, N. P. S., Hu, T. Springer-Verlag. New York, NY. (2014).
  4. Chosewood, L. C., Wilson, D. E. Biosafety in microbiological and biomedical laboratories. 5th, U.S. Dept. of Health and Human Services. Washington, D.C. . Accessed Sept. 4, 2014 (2009) http://www.cdc.gov/biosafety/publications/bmbl5/. (2009).
  5. Janosko, K., et al. Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 1. Laboratory suite entry and exit procedures. J Vis Exp. (2016).
  6. Diagnostic Radiology Committee Task Force on CT Scanner Phantoms. Phantoms for evaluation and quality assurance of CT scanners. American Association of Physicists in Medicine. Chicago, IL. (1977).
  7. Collins, B. ACUP 712.01 Waste anesthetic gas scavenging systems. Institutional Animal Care and Use Committee. Cornell University. Ithaca, NY. Available from: http://www.research.cornell.edu/care/documents/ACUPs/ACUP712.pdf (2013).
  8. Gargiulo, S., et al. Mice anesthesia, analgesia, and care, Part I: anesthetic considerations in preclinical research. ILAR J. 53, E55-E69 (2012).
  9. Office of the Press Secretary. Executive order 13546. Optimizing the security of Biological Select Agents and Toxins in the United States. The White House. Washington, DC. Available from: http://www.whitehouse.gov/the-press-office/executive-order-optimizing-security-biological-select-agents-and-toxins-united-stat (2010).
  10. Escaffre, O., Borisevich, V., Rockx, B. Pathogenesis of Hendra and Nipah virus infection in humans. J Infect Dev Ctries. 7, 308-311 (2013).
  11. Sueblinvong, V., et al. Critical care for multiple organ failure secondary to Ebola virus disease in the United States. Crit Care Med. (2015).
  12. Mazur, S., et al. Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 2. General practices. J Vis Exp. (2016).
  13. Bohannon, J. K., et al. Safety precautions and operating procedures in an (A)BSL-4 laboratory: 3. Aerobiology. J Vis Exp. (2016).

Comments

0 Comments


    Post a Question / Comment / Request

    You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

    Usage Statistics