去细胞化乳腺脂肪垫：从乳腺脂肪垫中去除细胞外矩阵水凝胶

首先，将乳腺脂肪垫或 MFP 放在带有 Trypsin-EDTA 溶液的菜中，并在所需的持续时间内孵育，以打破细胞基质粘附。用除离子水清洗最惠国待遇，并通过过滤器应变。将纸巾放在带搅拌棒的烧嘴中，然后加入 Triton X-100。搅拌到解冻细胞，而不影响组织细胞外基质中的生长因子。

应变最惠国待遇，用除离子水冲洗。将组织传回烧嘴，并加入脱氧胆酸来解化剩余的细胞。接下来，应变的MFP和放置在一个烧嘴含有除离子水与青霉素链霉素，以防止污染。在4摄氏度的夜间孵化烧嘴。

应变MFP，并把它们放入含有乙醇和乙酸的烧瓶中。永久性酸增加组织细胞外基质的刚度。搅拌一段时间，重复紧张的步骤。用 PBS 清洗 MFP，然后用除离子水清洗。将紧张的 MFP 转移到含有丙烷-1-ol 的烧杯中。

搅拌一段时间，拉紧内容，用除离子水清洗MFP。干燥最惠国待遇，储存在零下80摄氏度。在下列协议中，我们将执行穆林乳腺脂肪垫的去细胞化。

首先，将最惠国待遇放在六厘米的菜肴中，并配有五毫升的特里普辛-EDTA溶液。用70%的乙醇喷洒和擦拭盘子，在37摄氏度下孵育一小时。使用 0.7 毫米滤网通过将水倒在组织上三次，用去离子水清洗 MFP。使用钳子手动按摩洗涤之间的组织。

接下来，在细腻的任务上短暂干燥组织，擦拭并称重。将干燥的组织放在含有适当大小的搅拌棒的预高压烧瓶中，每克组织含有 60 毫升 3% t-八氯氧聚氧乙醇。在室温下搅拌一小时。然后，将烧嘴内装物倒入过滤器中。

用除离子水冲洗烧嘴，并倒入组织。再重复两次冲洗过程，确保使用钳子手动按摩冲洗之间的组织。在此之后，在细腻的任务上短暂干燥组织擦拭和称重。将组织和搅拌棒放回同一个烧嘴中，每克组织含有 60 毫升 4% 脱氧胆酸。在室温下搅拌一小时。

接下来，将烧嘴的内容倒入网状过滤器中。用除离子水冲洗烧嘴，并倒入组织。再重复两次冲洗过程，确保使用钳子手动按摩冲洗之间的组织。在细腻的任务上短暂干燥冲洗的组织，擦拭并称重。

将干燥的组织与新鲜的除离子水一起放入同一个烧嘴中，并补充 1% 青霉素链霉素。用石蜡膜紧紧盖住烧嘴，在4摄氏度下过夜。第二天，将烧嘴内装物排入过滤器中。在细腻的任务上短暂干燥组织擦拭并称重。然后，将最惠国待遇放在同一个烧嘴与适当大小的搅拌棒。

用含有4%乙醇和每克组织0.1%永久酸的溶液的60毫升溶液覆盖组织。在室温下搅拌两小时。将烧嘴的内含物倒入 0.7 毫米滤网中。使用钳子手动按摩组织，并将内容放回烧嘴中。用每克组织 60 毫升 1X PBS 来清洗组织。

在室温下搅拌15分钟。再重复一次整个洗涤过程。接下来，将烧嘴的内容倒入 0.7 毫米滤网中。使用钳子，手动按摩组织，并将内容放回烧嘴中。用每克组织60毫升的除离子水覆盖组织进行清洗。

在室温下搅拌15分钟。再重复一次整个洗涤过程。在细腻的任务上短暂干燥洗涤的组织，擦拭并称重。将组织和内含物倒入过滤器中，并使用钳子手动按摩组织。将内容放回烧嘴中，用每克组织 100% n-丙醇的 60 毫升覆盖组织。

在室温下搅拌一小时。然后，在细腻的任务上短暂干燥组织，擦拭并称重。将组织和内含物倒入 0.7 毫米滤网中，并使用钳子手动按摩组织。将内含物放回烧嘴中，用每克组织60毫升的除离子水覆盖，清洗组织。

在室温下搅拌15分钟。重复此洗涤过程三次。在此之后，在细腻的任务上短暂干燥组织擦拭并称重。将组织转移到标有15毫升的管子上，并在负80摄氏度下冷冻过夜。