PCR-Techniken

Dieses Video zeigt die Rolle der digitalen Tröpfchenpolymerase-Kettenreaktion bei der Identifizierung von Indel-Mutationen in einer DNA-Probe. Die hohe Präzision und Empfindlichkeit der ddPCR ermöglicht einen genauen und konsistenten Nachweis seltener Mutationen, die in einer Probe vorhanden sind, selbst bei geringen Konzentrationen. Es kann Indel-Mutationen in verschiedenen Regionen des Genoms identifizieren und quantifizieren und liefert wertvolle Einblicke in die Mechanismen der Mutation und...

Dieses Video zeigt die Gradientenpolymerase-Kettenreaktion zur Optimierung der Glühtemperatur von Primern, die die Gradientenglühtemperatur entlang der Vertiefungen einstellt. Die Wirkung unterschiedlicher Glühtemperaturen wird durch die Ausbeute an amplifizierten Produkten bestimmt, die zur Optimierung des Reaktionszustands beitragen.

In diesem Video demonstrieren wir die Duplex-Digital-PCR (ddPCR)-Technik — eine Modifikation der traditionellen PCR-Technik, die nützlich ist, um zwei verschiedene genetische Marker gleichzeitig zu detektieren. Eine einzelne PCR-Reaktion wird in nanolitergroße emulgierte Tröpfchen aufgeteilt, die unabhängig voneinander amplifiziert werden, und der Nachweis verschiedenfarbiger Fluoreszenzamplifikationssignale aus der Tröpfchenfraktion wird verwendet, um die Anfangskonzentration der Zielsequenzen...

Dieses Video demonstriert eine quantitative Methode zum Nachweis von Virusinfektionen mittels real-time reverse Transkriptions-PCR. Der reverse Transkriptionsschritt wandelt die RNA in cDNA um, die dann über PCR-Zyklen amplifiziert wird. Das Vorhandensein von viraler RNA in der Probe wird durch die Analyse der Amplifikations- und Dissoziationskurven der aus der PCR gewonnenen DNA bestätigt.

Dieses Video beschreibt die Wildtyp-blockierende Polymerase-Kettenreaktion (WTB-PCR), die somatische Mutationen nachweist. Bei der PCR-basierten Technik wird eine gesperrte Nukleinsäure (LNA) verwendet, ein Oligonukleotid, das an sein komplementäres Wildtyp-Allel bindet und dessen Elongation blockiert. Die Blockierung ermöglicht selektiv die Amplifikation von niedrig mutierten Allelen über ihre Wildtyp-Varianten in der Probe.

In diesem Video diskutieren wir die quantitative Polymerase-Kettenreaktion, qPCR, zur Aufzählung von T7-Bakteriophagen durch DNA-Quantifizierung. Der Fluoreszenzfarbstoff in der PCR-Mischung bindet an die neu synthetisierten DNA-Stränge und emittiert Fluoreszenz, die gemessen wird.

Dieses Video beschreibt die Technik zur Amplifikation einzelsträngiger DNA unter Verwendung von Oligonukleotid-beschichteten Polymer-Mikrosphären in einer Einzelrohrreaktion. Bei diesem Verfahren entsteht reine einzelsträngige DNA, die für die DNA-Sequenzierung und Microarray-Analyse weiterverwendet werden kann.

Dieses Video beschreibt die verschachtelte Polymerase-Kettenreaktion, eine Technik, die aus zwei sequentiellen PCR-Amplifikationsprozessen mit zwei Primer-Sets besteht. Der erste Satz von Primern ist dazu bestimmt, an Sequenzen vor dem zweiten Satz zu annealieren, was zu einer selektiven Amplifikation spezifischer Gensequenzen führt. Diese PCR ist sensitiver und spezifischer als eine normale PCR und wird häufig als Nachweistechnik für verschiedene Krankheiten eingesetzt.

In diesem Video beschreiben wir eine hochauflösende Schmelz-PCR-Technik zur Bestimmung des Längenpolymorphismus von DNA-Fragmenten unterschiedlicher Sequenzlängen, basierend auf einer Schmelztemperaturanalyse.

Dieses Video demonstriert die Multiplex-Tröpfchenpolymerase-Kettenreaktionstechnik zur gleichzeitigen Quantifizierung von methylierten DNA-Regionen in verschiedenen Populationen weißer Blutkörperchen als frühen Biomarker für die klinische Diagnose und Prognose.

Dieses Video demonstriert die Nützlichkeit der digitalen PCR in einem Chip-in-a-Tube-Format für den Nachweis von Einzelnukleotidvariationen in DNA-Proben. Eine einzelne PCR-Reaktion wird in Kammern aufgeteilt, die als unabhängige PCR-Reaktionen fungieren, und die Detektion von Fluoreszenzsignalen von den amplifizierten Zielen in den Kammern wird verwendet, um die Häufigkeit des varianten Allels in der Probe zu berechnen.

Dieses Video demonstriert die chipbasierte digitale PCR — eine Variation der digitalen PCR-Technik, die bei der Erkennung seltener Transkriptvarianten nützlich ist. Die PCR-Reaktion wird in die Kammern eines nanofluidischen Chips aufgeteilt, von denen jede als unabhängige Reaktion wirkt. Die Detektion von Fluoreszenzsignalen aus den Kammern mit amplifizierten Targets bestätigt das Vorhandensein seltener Transkriptvarianten in der Probe.