Técnicas de PCR

Este video demuestra el papel de la reacción en cadena de la polimerasa por gota digital en la identificación de la mutación indel en una muestra de ADN. La alta precisión y sensibilidad de la ddPCR permite una detección precisa y consistente de mutaciones raras presentes en una muestra, incluso a niveles bajos. Puede identificar y cuantificar mutaciones de indel en diferentes regiones del genoma, proporcionando información valiosa sobre los mecanismos de mutación y las consecuencias...

Este video muestra la reacción en cadena de la polimerasa en gradiente para la optimización de la temperatura de recocido de los cebadores, que establece la temperatura de recocido en gradiente a lo largo de los pocillos. El efecto de las diferentes temperaturas de recocido está determinado por el rendimiento de los productos amplificados que ayuda a optimizar la condición de reacción.

En este video, demostramos la técnica de PCR digital dúplex (ddPCR), una modificación de la técnica de PCR tradicional que es útil para detectar dos marcadores genéticos diferentes simultáneamente. Una sola reacción de PCR se divide en gotas emulsionadas del tamaño de un nanolitro que se amplifican de forma independiente, y la detección de señales de amplificación de fluorescencia de diferentes colores a partir de la fracción de gotas se utiliza para calcular la concentración inicial de las...

Este video muestra un método cuantitativo para detectar infecciones virales utilizando PCR con transcripción inversa en tiempo real. El paso de transcripción inversa convierte el ARN en ADNc, que luego se amplifica a través de ciclos de PCR. La presencia de ARN viral en la muestra se confirma mediante el análisis de las curvas de amplificación y disociación del ADN obtenidas de la PCR.

Este video describe la reacción en cadena de la polimerasa bloqueadora de tipo salvaje, o WTB-PCR, que detecta mutaciones somáticas. La técnica basada en PCR utiliza un ácido nucleico bloqueado, o LNA, un oligonucleótido que se une a su alelo complementario de tipo salvaje y bloquea su elongación. El bloqueo permite selectivamente la amplificación de alelos mutantes de bajo nivel sobre sus variantes de tipo salvaje en la muestra.

En este video, discutimos la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa, qPCR, para enumerar bacteriófagos T7 a través de la cuantificación de ADN. El colorante fluorescente de la mezcla de PCR se une a las hebras de ADN recién sintetizadas y emite fluorescencia, que se mide.

Este video describe la técnica de amplificación de ADN monocatenario utilizando microesferas de polímero recubiertas de oligonucleótidos en una reacción de un solo tubo. Este proceso produce ADN monocatenario puro, que puede utilizarse posteriormente para la secuenciación de ADN y el análisis de microarrays.

Este video describe la reacción en cadena de la polimerasa anidada, una técnica que consiste en dos procesos secuenciales de amplificación de PCR utilizando dos conjuntos de cebadores. El primer conjunto de cebadores está destinado a recocer secuencias aguas arriba del segundo conjunto, lo que resulta en la amplificación selectiva de secuencias de genes específicos. Esta PCR es más sensible y específica que una PCR normal y es muy utilizada como técnica de detección de diversas enfermedades.

En este video, describimos una técnica de PCR de fusión de alta resolución para determinar el polimorfismo de longitud de fragmentos de ADN de diferentes longitudes de secuencia, basada en el análisis de la temperatura de fusión.

Este video demuestra la técnica de reacción en cadena de la polimerasa por gotas multiplex para la cuantificación simultánea de regiones de ADN metiladas en diferentes poblaciones de glóbulos blancos como biomarcador temprano para el diagnóstico clínico y el pronóstico.

Este video demuestra la utilidad de la PCR digital en formato de chip en un tubo para la detección de variaciones de un solo nucleótido en muestras de ADN. Una sola reacción de PCR se divide en cámaras que actúan como reacciones de PCR independientes, y la detección de señales de fluorescencia de los objetivos amplificados en las cámaras se utiliza para calcular la frecuencia del alelo variante en la muestra.

Este video muestra la PCR digital basada en chip, una variación de la técnica de PCR digital que es útil para detectar variantes raras de transcripción. La reacción de PCR se divide en las cámaras de un chip nanofluido, cada una de las cuales actúa como una reacción independiente. La detección de señales de fluorescencia de las cámaras con objetivos amplificados confirma la presencia de variantes raras de transcripción en la muestra.