Un modelo neonatal de inyección venosa retroorbitaria en roedores

La inyección retroorbitaria es un método de inyección especializado que se utiliza para administrar compuestos en la circulación venosa. La investigación con animales es un paso importante hacia el trabajo clínico. Como parte de la investigación con animales, existe la necesidad de administrar diferentes tipos de compuestos a través de diferentes vías.

Algunas de estas vías son la subcutánea, la intraperitoneal y la intravenosa. La inyección intravenosa es la vía más utilizada en los recién nacidos que se encuentran en la unidad de cuidados intensivos neonatales. Sin embargo, en la investigación con roedores, particularmente en roedores adultos, las inyecciones intravenosas se realizan de forma rutinaria en la vena de la cola.

En los recién nacidos, es extremadamente difícil realizar una inyección en la vena de la cola con éxito y de forma reproducible. Por lo tanto, la ruta retroorbital se puede utilizar como una alternativa más fácil. En primer lugar, demostraremos el uso de un tinte, el azul de tripano, para que el espectador pueda ver claramente el tinte que entra en la circulación venosa.

La rata neonata se coloca bajo anestesia completa, con la cabeza apoyada de lado, descansando sobre una fuente de luz, de modo que el ojo y la vasculatura lateral queden expuestos y visibles. La aguja se inserta en la parte frontal de la cuenca del ojo, el equivalente al canto medial. Inyecte la solución con un movimiento suave, suave y fluido.

Para reproducir mejor este procedimiento, es importante comprender la anatomía venosa orbitaria. En la rata, hay una red de varias venas justo debajo del ojo, que permiten un acceso fácil y directo al plexo venoso. En ratas albinas neonatas, también es visible tanto en las venas temporales superficiales como en las faciales.

Este procedimiento se puede realizar exactamente de la misma manera. En ratones neonatos. Utiliza una aguja con un calibre de 29 a 31 de alrededor de 0,30 milímetros.

Para obtener volúmenes precisos, extraiga la solución que se va a inyectar a partir de un volumen pipeteado. Coloque a los animales sobre una superficie plana en decúbito lateral. Inducir anestesia con isoflurano en todo el cuerpo.

5% de inducción, 3% de mantenimiento. Verifique la profundidad de la anestesia utilizando el método del reflejo de extracción de tracción. Con la cabeza hacia la derecha, administrar la inyección en el seno retroorbitario derecho.

Inserte el bisel de la aguja hacia abajo en la parte delantera de la cuenca del ojo, el equivalente al canto central, en un ángulo de aproximadamente 40 grados. Este ángulo permite que la aguja se dirija a la parte posterior de la órbita del ojo. Inyecte con un movimiento suave, suave y fluido.

Espere un breve momento antes de retirar la aguja, lentamente, para evitar el reflujo. Utilice una jeringa estéril nueva para cada animal para evitar la contaminación. Coloque al cachorro en la caja de recuperación, descansando sobre un dispositivo de calentamiento protegido, alrededor de 35 a 37 grados centígrados.

Espere a que se recupere y verifique si hay signos de angustia antes de devolver al cachorro a la madre. Esta técnica se utilizó para administrar el trazador biotina-dextrano en la vasculatura del cerebro de animales que habían sufrido hemorragia de matriz germinal. Los animales que recibieron una inyección de solución salina como control no muestran tinción visible de la vasculatura dentro del cerebro.

La inyección retroorbitaria exitosa del trazador de biotina-dextrano permitió evaluar su presencia en la vasculatura cerebral dentro de los 10 minutos posteriores a la administración retroorbitaria. Esta técnica se utilizó para detectar la fuga vascular del trazador a nivel de los vasos sanguíneos individuales en los animales lesionados por GMH. Este resultado permite, por ejemplo, cuantificar la lesión cuantificando la cantidad de vasos sanguíneos que tienen fugas después de una lesión cerebral GMH.

Además, este procedimiento también se puede realizar sin una fuente de luz, lo que lo convierte en una técnica simple, directa y reproducible que permite la administración de compuestos directamente en la circulación venosa de ratas y ratones neonatos. Cuando se realiza correctamente, este procedimiento no debería provocar ningún efecto adverso. Esta raíz de administración permite inyecciones de anticuerpos, células y otros compuestos directamente en la circulación venal de los animales neonatos.

Esta vía es de mayor relevancia clínica en comparación con otras vías, como las inyecciones intraperitoneales o subcutáneas.