Un modèle murin efficace de lésion unilatérale d’ischémie rénale-reperfusion

La lésion de l’ischémie rénale-reperfusion est la principale cause d’insuffisance rénale aiguë. Ce modèle est très utile pour comprendre les changements physiopathologiques qui se produisent dans le rein après une insulte ischémique. Ce modèle est rapide et rentable et fournit des données hautement reproductibles.

En plus de cela, ce modèle unilatéral d’ischémie rénale permet au chercheur de travailler avec des temps ischémiques plus longs tout en maintenant un taux de survie élevé. Pour commencer, placez la souris anesthésiée sur la table d’opération. Après avoir stérilisé la zone chirurgicale, utilisez une lame de scalpel pour faire une incision chirurgicale latérale dorsale d’environ un centimètre sur le flanc droit derrière la côte et continuez à dorloter d’environ un centimètre parallèlement à la ligne médiane lombaire.

Transectez la musculature abdominale à l’aide de ciseaux pour visualiser l’espace rétropéritonéal. Utilisez un coton-tige stérile pour enlever les petites quantités de sang produites lors de la section des muscles. Ensuite, poussez le rein droit hors de la cavité abdominale.

Exposez lentement et soigneusement le rein avec une pince grise et identifiez le pédicule rénal. Ensuite, retirez soigneusement le tissu adipeux autour du pédicule. Utilisez un Halsted Mosquito Hemostat pour manipuler la pince vasculaire.

Pour induire l’ischémie, placez la pince vasculaire sur l’artère rénale et la veine présentes dans le pédicule rénal en évitant de serrer l’uretère adjacent. Couvrez le rein serré avec de la gaze stérile imbibée de solution saline pour éviter la dessiccation. Laissez les reins sur la gaze pendant 30 minutes et surveillez périodiquement la profondeur de l’anesthésie et l’humidité de la gaze.

Peu de temps avant la fin de la période d’ischémie, découvrez le rein et tenez le Halsted Mosquito Hemostat, prêt pour le retrait de la pince. À la fin de la période d’ischémie, ouvrez la pince vasculaire avec l’hémostat et retirez la pince pour permettre la perfusion du rein. Pour les animaux témoins simulés, effectuez la chirurgie démontrée sans serrer le pédicule rénal.

Après avoir vérifié le changement de couleur des reins, retournez le rein dans la cavité abdominale. Fermez les muscles abdominaux en croisé avec une suture résorbable 5-0. Fermez la peau dans un motif de matelas horizontal avec une suture résorbable 5-0.

Nettoyez la plaie avec une solution de povidone-iode. Après la lésion de perfusion de l’ischémie, une réduction du poids corporel a été observée chez certaines souris avec moins de 10% du poids corporel initial. Cependant, la plupart des souris ont récupéré leur poids corporel initial entre les jours 4 et 7 après la chirurgie.

Les souris témoins n’ont montré aucun changement de poids corporel après la chirurgie. Plusieurs changements dans la morphologie rénale après la chirurgie ont été identifiés en utilisant l’hématoxyline-éosine, l’acide périodique de Schiff et la coloration trichrome de Masson. La présence de coulée protéique dans la lumière tubulaire a été observée après quatre heures.

Une dilatation tubulaire a été détectée à huit heures et une fonte tubulaire ainsi qu’une nécrose cellulaire dans les segments médullaires ont été remarquées 16 heures après la chirurgie IRI. Après 24 heures de la chirurgie, une dilatation tubulaire a été observée. L’infiltration de lymphocytes et de macrophages et de noyaux cellulaires élargis a été détectée après 48 heures.

Au jour 4, des cellules tubulaires mitotiques ont été observées et au jour 7 après la chirurgie IRI, une fibrose focale a été détectée. Le cortex rénal des souris au début de la reperfusion a été surveillé à l’aide d’une coloration PAS et une atténuation progressive de la bordure de la brosse était visible. Les zones de fibrose interstitielle au jour 7 après la chirurgie ont été visualisées à l’aide de la coloration Trichome de Masson.

Un système de notation des blessures tubulaires a été développé pour catégoriser les dommages au fil du temps. Les scores de lésion tubulaire les plus élevés ont été obtenus entre 8 heures et 24 heures après l’IRI rénal. Certaines des étapes les plus critiques sont le placement correct de la pince vasculaire dans le pédicule rénal et le maintien d’une température corporelle constante pendant la chirurgie.