Encyclopedia of Experiments: Cancer Research
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एक शल्य चिकित्सा बिस्तर पर एक इच्छामृत्यु माउस वेंट्रल साइड रखकर और जानवर के अंगों को सुरक्षित करके शुरू करें। कैंची का उपयोग करना, लार ग्रंथियों तक रिब पिंजरे के माध्यम से मिडलाइन के साथ काटा। इसे ऊंचा करने और अलग करने के लिए श्वासनली के नीचे एक पिपेट टिप रखें। सर्जिकल बेड को 180 डिग्री घुमाएं। एक सिरिंज सुई जिसमें श्वासनली में भारत की स्याही का दाग होता है और स्याही को फेफड़ों में इंजेक्ट करें जब तक आप प्रतिरोध महसूस नहीं करते।
कैंसर कोशिकाएं बड़ी मात्रा में लैक्टिक एसिड को स्रावित करती हैं जो कोशिका की सतह पर एक मजबूत नकारात्मक आवेश उत्पन्न करती है। जब इन कोशिकाओं को भारत स्याही, एक अम्लीय दाग के साथ दाग रहे हैं, कोशिका की सतह दाग पीछे हटाना और दाग रहते हैं ।
श्वासनली को काटने के लिए कैंची का उपयोग करें और फेफड़ों के नीचे चिमटी की एक जोड़ी स्लाइड करें। धीरे-धीरे फेफड़ों को जानवर के शरीर से बाहर खींचें। पानी में फेफड़ों कुल्ला और अतिरिक्त दाग को दूर करने और एक धुएं हुड में ऊतक को ठीक करने के लिए फेकेट के समाधान युक्त एक शीशी में उन्हें स्थानांतरित करें। ट्यूमर पिंड अंधेरे पृष्ठभूमि के खिलाफ सफेद दिखाई देते हैं।
निम्नलिखित प्रोटोकॉल में, हम फेफड़ों के मेटास्टेसिस को मान्य करने के लिए भारत स्याही मुद्रास्फीति तकनीक का प्रदर्शन करेंगे।
फेफड़ों के लिए प्राथमिक ट्यूमर के मेटास्टेसिस को मान्य करने के लिए, पहले माउस को पॉलीस्टीरिन बोर्ड पर रीढ़ की स्थिति में रखें और श्वासनली तक अबाधित पहुंच सुनिश्चित करने के लिए पैरों को सुरक्षित करें। माउस को 70% इथेनॉल के साथ स्प्रे करें। फिर, रिब पिंजरे के माध्यम से माउस के मध्य पेट के मध्य रेखा के साथ और लार ग्रंथियों की ओर एक चीरा बनाने के लिए कैंची की एक जोड़ी का उपयोग करें। श्वासनली की पहचान करें। फिर, आसपास के ऊतकों को हटाने के लिए संदंश का उपयोग करें।
इसके बाद, एक हाथ में एक पिपेट टिप पकड़े, श्वासनली के नीचे टिप धागा और धीरे से ऊतक ऊपर और शरीर से दूर उठा । श्वासनली को ऊंचा रखते हुए, विच्छेदन मंच को 180 डिग्री घुमाएं। फिर, श्वासनली में आधा सीसी 27 गेज ट्यूबरक्यूलिन सिरिंज डालें और एक मजबूत प्रतिरोध महसूस होने तक भारत स्याही के साथ फेफड़ों को पूरी तरह से फुलाएं।
फिर, कैंची की एक जोड़ी का उपयोग कर, श्वासनली काट। माउस को एक संदंश के साथ रखें, फेफड़ों के नीचे एक और संदंश डालें और फेफड़ों के लोब्स को माउस से बाहर खींचें। फेफड़ों को संक्षेप में पानी की एक बीकर में कुल्ला और एक धुएं हुड में ऊतक हस्तांतरण । फिर, फेफड़ों को एक ग्लास प्रस्फुटन शीशी में रखें जिसमें फेकेट के समाधान के 3 मिलीलीटर होते हैं, समाधान को वाष्पित होने से रोकने के लिए शीशी को कैपिंग करते हैं। कुछ मिनटों के बाद, फेफड़ों को पेट्री डिश में स्थानांतरित करें और एकल, सफेद, मेटास्टैटिक ट्यूमर नोड्यूल की संख्या गिनें।