S. cerevisiae sind einzellige Eukaryoten, die häufig als Modellorganismen in der biologischen Forschung verwendet werden. Währen ihrer Arbeit verlassen sich Hefeforscher auf die fundamentale Methode der Transformation (die Aufnahme von Fremd-DNA durch eine Zelle), um die Genexpression zu kontrollieren, genetische Löschungen zu induzieren, rekombinante Proteine zu exprimieren, oder subzellulare Strukturen zu markieren
Dieses Video stellt eine Übersicht bereit, wie und weshalb Hefetransformationen in dem Labor ausgeführt werden. Wichtige Eigenschaften von Hefeplasmiden und die Methode zur Herstellung von Hefezellen für die Einfügung von Fremd-DNA werden gezeigt. Diese Präsentation beinhaltet auch ein Schritt-für-Schritt Protokoll für die Lithium-Acetat Methode der Hefetransformation. Zuletzt gehen wir auf einige Beispiele der vielen Anwendungen von dieser grundlegenden Methode ein.
Procedure
Hefe, oder or Saccharomyces cerevisiae, ist ein weit verbreitetes, einfaches eukaryotisches Modellsystem, mit dem man Genetik und Zellbiologie untersuchen und somit Einblicke in humane zelluläre Prozesse erhalten kann. Dieses Video behandelt die Transformation, also die Aufnahme von Fremd-DNA durch die Hefezelle. Wir werden außerdem Hefeplasmide einführen, zeigen wie man Hefezellen für die Transformation vorbereitet, eine Schritt-für-Schritt Anleitung für die Transformation geben, und einige Anwendungen und …