Xenopus Laevis oocytes के Microinjection
Summary
यहाँ हम cytoplasmic microinjection का प्रदर्शन<em> Xenopus laevis</em> Oocytes परमाणु आयात सब्सट्रेट, के रूप में के रूप में अच्छी तरह से पतली सेक्शनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा दृश्य के लिए इंजेक्शन oocytes की तैयारी के साथ.
Abstract
Xenopus laevis oocytes के Microinjection पतली सेक्शनिंग इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी (EM) द्वारा पीछा nucleocytoplasmic परिवहन अध्ययन के लिए एक उत्कृष्ट सिस्टम है. अपने बड़े नाभिक और परमाणु ताकना परिसरों (NPCs) के उच्च घनत्व के कारण, परमाणु परिवहन Xenopus oocyte में आसानी से देखे जा सकते हैं. परमाणु आयात और निर्यात के तंत्र में ज्यादातर अंतर्दृष्टि इस प्रणाली का उपयोग (Panté, 2006 द्वारा की समीक्षा की) के माध्यम से प्राप्त की है. इसके अलावा, हम Xenopus oocytes के microinjection का इस्तेमाल किया है कई वायरस के परमाणु आयात मार्ग है कि मेजबान नाभिक में दोहराने को काटना .
यहाँ हम एक परमाणु आयात सब्सट्रेट के साथ Xenopus oocytes की cytoplasmic microinjection प्रदर्शित करता है . हम भी दृश्य के लिए इंजेक्शन oocytes की तैयारी दिखाने पतली सेक्शनिंग EM विच्छेदन, निर्जलीकरण, और एक epoxy एम्बेडिंग राल में oocytes की एम्बेड सहित,. अंत में, हम oocytes कि microinjected baculovirus Autographa californica (AcMNPV) nucleopolyhedrovirus या चूहे (MVM) parvovirus मिनट वायरस के capsid के साथ किया गया है, और तकनीक के संभावित अनुप्रयोगों पर चर्चा के लिए प्रतिनिधि परिणाम प्रदान करते हैं.
Protocol
Discussion
Xenopus EM पतली – सेक्शनिंग के साथ संयुक्त oocytes के Microinjection nucleocytoplasmic परिवहन के अध्ययन के लिए एक अत्यधिक प्रभावी उपकरण है. इस प्रणाली cytoplasmic filaments और परमाणु टोकरी (Panté, 2006 द्वारा की समीक्षा की) जैसे एनपीसी के संरचनात्मक घ?…
Acknowledgements
हम baculovirus AcMNPV प्रदान करने के लिए और उपयोगी चर्चा के लिए दाऊद Theilmann (प्रशांत कृषि खाद्य अनुसंधान केन्द्र, Summerland, ब्रिटिश कोलंबिया) धन्यवाद.
इस काम अभिनव के लिए कनाडा फाउंडेशन (CFI), स्वास्थ्य (CIHR) अनुसंधान, स्वास्थ्य अनुसंधान (MSFHR) के लिए माइकल स्मिथ फाउंडेशन कनाडा के संस्थानों, और प्राकृतिक विज्ञान और कनाडा के इंजीनियरिंग रिसर्च काउंसिल () NSERC से अनुदान द्वारा समर्थित किया गया .
References
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- Panté, N., Kann, M. Nuclear pore complex is able to transport macromolecules with diameters of about 39 nm. Mol. Biol. Cell. 13 (2), 425-434 (2002).
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