Biology

Meten van de bloeddruk in Muizen met behulp van Volume Pressure Recording, een staart-cuff-methode

Published: May 15, 2009 doi: 10.3791/1291

Alan Daugherty¹, Debra Rateri¹, Lu Hong¹, Anju Balakrishnan¹

¹Cardiovascular Research Center, University of Kentucky

Summary

Het CODA 8-kanaals High Throughput Non-invasieve bloeddruk meet de bloeddruk in maximaal 8 muizen of ratten tegelijkertijd. Deze staart-cuff systeem maakt gebruik van Volume Pressure Recording (VPR) om de bloeddruk te meten door het bepalen van de staart bloedvolume.

Abstract

Het CODA 8-kanaals High Throughput Non-invasieve bloeddruk meet de bloeddruk in maximaal 8 muizen of ratten tegelijkertijd. Het CODA staart-cuff systeem maakt gebruik van Volume Pressure Recording (VPR) om de bloeddruk te meten door het bepalen van de staart bloedvolume. Een speciaal ontworpen drukverschiltransductor en een occlusie staart-cuff meten het totale bloedvolume in de staart, zonder de noodzaak om de individuele pulssignaal te verkrijgen. Speciale aandacht is geboden aan de lengte van de occlusie manchet om daaruit de meest nauwkeurige bloeddrukmetingen. VPR kan gemakkelijk verkrijgen metingen op een donkere huid knaagdieren, zoals muizen en C57Bl6 is MRI compatibel. Het CODA systeem biedt u met metingen van zes (6) verschillende bloeddruk parameters; systolische en diastolische bloeddruk, hartslag, gemiddelde bloeddruk, staart doorbloeding, en de staart bloedvolume. Metingen kunnen worden verricht op beide wakker of verdoofde muizen of ratten. Het CODA-systeem bestaat uit een controller, laptop computer, software, manchetten, dier houders, infrarood verwarming pads, en een infrarood thermometer. Er zijn zeven verschillende maten houder voor muizen zo klein als 8 gram aan ratten zo groot als 900 gram.

Protocol

Apparatuur Set-up
1. Selecteer een gebied in het lab, waar de temperatuur is aan of hoger dan 20 ° C.
2. Vermijd plaatsen in de buurt van airconditioning ventilatieopeningen en / of lawaai.
3. Niet bloot te stellen het dier om te geuren die kunnen leiden tot irritatie en / of stress, zoals parfum, eau de cologne, chemicaliën en reinigingsmiddelen.
4. Zet de CODA Controller.
5. Zet de Warming Platform en ingesteld op niveau 3. Als de omgevingstemperatuur boven 25 ° C, begint op niveau 1 of 2.
6. Controller Diagnostics Test
  1. Open de CODA-software.
  2. Selecteer de CODA Device door erop te klikken.
  3. Klik op "Test Selected Device".
  4. Selecteer de manchetten en kanalen om te testen en klik op "Test".
  5. Na de test is voltooid, sluit u het apparaat te testen venster.
Software Set-up
1. Beheer Personeel en Dieren
  1. Het beheer van personeel
    1. Selecteer Extra> Beheer Personeel.
    2. Klik op "Onderzoeker 1" om de naam te wijzigen.
    3. Klik op de volgende rijen om extra onderzoekers toe te voegen.
    4. Klik op "Technici Tab" te wijzigen of toe te voegen technici.
    5. Klik op "monsters Tab" naar het dier naam voor gemakkelijke identificatie en om het dier te selecteren, rat of muis.
    6. Klik op "Animals Tab" om het dier te type en de gevoeligheid aan te passen.
2. Nieuwe Experiment
  1. Selecteer Bestand> Nieuw> Experiment
  2. Begin een nieuw experiment
    1. Voer de Experiment Naam.
    2. Selecteer de sleutel onderzoeker.
    3. Selecteer een Begin datum en klik op "Next".
  3. Basis Sessie Info
    1. Voer de Session Name
    2. Stel "Acclimatisering Cycles" tot 5. Als u liever geen acclimatisering cycli, op nul gezet te nemen. Om te helpen bij het acclimatiseren van het dier aan de houder en manchetten, voeg extra cycli om uw experiment en het experiment gedurende 5 opeenvolgende dagen.
    3. Set "Aantal Sets" op 1.
    4. Stel "Time Between Sets" tot 30 seconden voor meerdere sets
    5. Stel "Cycles per Set" tot 20 cycli.
    6. Zet "tussen de cycli" tot 5 seconden en klik op "Next".
3. Specimen Selectie
  1. 1. Selecteer het monster uit het monster zwembad en deze toewijzen aan de eerste beschikbare kanaal en klik op "Next".
  2. Sessie Parameters
    1. Stel "Maximum occlusiedruk" aan 250mmHg.
    2. Stel "Deflatie Time" tot 20 seconden voor muizen, 15 seconden voor ratten.
    3. Stel "Minimum Volume" naar 15ul.
    4. Stel "Display Style" om een kanaal per grafiek.
    5. Voeg extra onderzoekers en technici in en klik op "Next".
  3. Sessie Script
    1. Bekijk de Session Script en klik op "Next".
    2. Selecteer niet Voltooien totdat je de Animal Voorbereiding sectie.
Dier Voorbereiding
1. Animal Set-up
  1. Dier Holder
    1. Om te trainen en te verbeteren dier acclimatisering, voeg extra cycli om uw experiment en het experiment gedurende vijf opeenvolgende dagen. U kunt ook helpen met acclimatisatie door het plaatsen van het dier in de houder gedurende 15 minuten gedurende 3 opeenvolgende dagen voorafgaand aan het eigenlijke onderzoek.
    2. Plaats elk dier in een houder door het oppakken van het dier bij de staart en voorzichtig het plaatsen van het dier in de achterkant van de houder, die het open uiteinde van de neuskegel gezichten. Let op: de grootte van de dieren in verhouding tot de grootte van de geselecteerde houder. Het dier moet vrij kunnen betreden de houder.
    3. Zorgvuldig zet de achterklep aan de houder door het rode schroefdop op de achterklep. Zorg moeten worden genomen om te voorkomen dat knijpen van de staart of enig andere lichaamsdelen, terwijl het veiligstellen van de achterklep.
    4. Schuif de neus in de richting van de achterklep, het beperken van de beweging van het dier. De neus moet worden in een positie om het dier te beperken uit te draaien, terwijl in de houder.
    5. Plaats de houder op de opwarming platform in de aangewezen positie. Als het testen van de dezelfde groep van dieren over een periode van tijd, moet u de houder positie draaien op de opwarming platform om consistentie en nauwkeurigheid van uw BP metingen te verbeteren. Laat het dier ten minste 5 minuten te acclimatiseren aan de houder.
    6. Niet aanraken of hanteren van het dier, terwijl in de houder. De toegenomen contact kan irriteren het dier.
    7. Laat nooit het dier in de houders zonder toezicht.
  2. Manchet Plaatsing
    1. Zet de 'Occlusie Cuff Tubing "in de inkeping aan de bovenkant achterkant van de houder.
    2. Draad de staart door middel van de 'VPR Manchet ", waardoor het binnen 2 mm van de" Occlusie Cuff ".
    3. Zet de 'VPR Cuff Tubing "in de inkeping aan de bovenkant achterkant van de houder.
    4. Bevestig de manchetten aan de CODA Controller.
  3. Temperatuur dier
    1. Laat het dier ten minste 5 minuten naar thermoregulate.
    2. Vaak registreren de temperatuur van het dier met een infrarood thermometer. Het dier temperatuur moet 32 tot 35 ° C.
Experiment
1. Begin Experiment
  1. Klik op "Finish" en het experiment zal onmiddellijk beginnen.
2. Einde Experiment
  1. Dier
    1. Onmiddellijk verwijderen van het dier uit de mouwen en de houder.
    2. Ga terug het dier om hun kooi na de "Simple Session Summary Report" wordt weergegeven.
  2. Data Collection
    1. Na voltooiing van de laatste cyclus van de aanvaarde cycli automatisch worden weergegeven in spreadsheet-formaat binnen de CODA applicatie, klik op de "Export naar Excel" te klikken.
    2. Selecteer de map waarin u het bestand in, de naam van het bestand en klik op "Opslaan".
    3. Open het Excel-toepassing en klik op "Open".
    4. Bekijk alle bestandstypen aan de ". CSV-bestand opgeslagen" weergeven, klikt u op het bestand.
  3. Data Processing
    1. Er zijn verschillende manieren om de gegevens in het Excel-bestand te verwerken. Een veel voorkomende praktijk is het verkrijgen van het gemiddelde en de standaarddeviatie.
    2. Verwijderen van metingen als de standaardafwijking groter is dan 30.
    3. Daarnaast kunnen verworpen cycli worden bekeken en de gehele database kan eenvoudig worden geëxporteerd naar Excel. Raadpleeg de gebruikershandleiding voor meer informatie.