Biology

Mesurer la pression sanguine chez des souris en utilisant enregistrement de la pression du volume, une méthode Queue-coiffe

Published: May 15, 2009 doi: 10.3791/1291

Alan Daugherty¹, Debra Rateri¹, Lu Hong¹, Anju Balakrishnan¹

¹Cardiovascular Research Center, University of Kentucky

Summary

Le CODA 8-canaux à haut débit système non invasif de pression artérielle mesure la pression sanguine dans jusqu'à 8 simultanément souris ou les rats. Ce système utilise la queue-coiffe enregistrement de la pression du volume (VPR) pour mesurer la pression artérielle en déterminant le volume de sang de la queue.

Abstract

Le CODA 8-canaux à haut débit système non invasif de pression artérielle mesure la pression sanguine dans jusqu'à 8 simultanément souris ou les rats. Le CODA-queue coiffe système utilise enregistrement de la pression du volume (VPR) pour mesurer la pression artérielle en déterminant le volume de sang de la queue. Un capteur différentiel de pression spécialement conçu et une occlusion de la queue-coiffe mesurer le volume total de sang dans la queue, sans la nécessité d'obtenir le signal d'impulsion individuelle. Une attention particulière est accordée à la longueur de la manchette d'occlusion afin d'en tirer les lectures les plus précises pression sanguine. VPR peuvent facilement obtenir des lectures sur la peau foncée rongeurs, comme les souris C57BL6 et est compatible avec l'IRM. Le système ADOC vous fournit des mesures de six (6) différents paramètres de pression artérielle; pression artérielle systolique et diastolique, fréquence cardiaque, pression artérielle moyenne, le flux sanguin queue, et le volume sanguin de la queue. Les mesures peuvent être faites sur des souris soit éveillé ou anesthésié ou des rats. Le système comprend un contrôleur CODA, ordinateur portable, logiciel, poignets, les détenteurs d'animaux, plaquettes réchauffement infrarouge et un thermomètre infrarouge. Il ya sept tailles de supports différents pour les souris aussi petits que 8 grammes pour les rats aussi gros que 900 grammes.

Protocol

Installation des équipements
1. Sélectionnez une zone dans le laboratoire où la température ambiante est égale ou supérieure à 20 ° C.
2. Éviter les endroits à proximité de bouches de climatisation et / ou un bruit fort.
3. Évitez d'exposer l'animal à des odeurs qui peuvent causer une irritation et / ou de stress, comme le parfum, eau de cologne, produits chimiques, et les nettoyeurs.
4. Mettez le contrôleur de l'ADOC.
5. Tournez sur la plateforme de réchauffement et mis au niveau 3. Si la température ambiante est supérieure à 25 ° C, commencer le niveau 1 ou 2.
6. Diagnostics contrôleur de test
  1. Ouvrez le logiciel CODA.
  2. Sélectionnez le périphérique CODA en cliquant dessus.
  3. Cliquez sur "périphérique de test sélectionné".
  4. Sélectionnez les menottes et les chaînes de test et cliquez sur "Test".
  5. Après le test est terminé, fermez la fenêtre de test de périphériques.
Logiciel Set-up
1. Gérer le personnel et les animaux
  1. Gérer le personnel
    1. Sélectionnez Outils> Gérer le personnel.
    2. Cliquez sur "Chercheur 1" pour changer le nom.
    3. Cliquez sur les lignes suivantes à ajouter d'autres chercheurs.
    4. Cliquez sur "Tab techniciens" pour modifier ou ajouter des techniciens.
    5. Cliquez sur "Tab spécimens" au nom de l'animal pour faciliter l'identification et de sélectionner le type d'animal; rat ou la souris.
    6. Cliquez sur "Tab Animaux" pour modifier le type d'animal et de sensibilité.
2. Expérience Nouveau
  1. Sélectionnez Fichier> Nouveau> Expérience
  2. Commencez une nouvelle expérience
    1. Entrez le nom d'expérience.
    2. Sélectionnez le chercheur clé.
    3. Sélectionnez une date de début et cliquez sur "Suivant".
  3. Infos session de base
    1. Entrez le nom de session
    2. Réglez "Cycles Acclimatation" à 5. Si vous préférez ne pas inclure les cycles d'acclimatation, mis à zéro. Pour aider à acclimater l'animal au titulaire et aux poignets, ajouter des cycles additionnels de votre expérience et d'exécuter l'expérience pendant 5 jours consécutifs.
    3. Set "Nombre de jeux" à 1.
    4. Réglez "Temps entre les séries» à 30 secondes pour plusieurs jeux
    5. Réglez "Cycles par Set" à 20 cycles.
    6. Réglez "temps entre les cycles" à 5 secondes et cliquez sur "Suivant".
3. Sélection des échantillons
  1. 1. Sélectionnez le spécimen de la piscine échantillon et de l'attribuer à la première chaîne disponible et cliquez sur "Suivant".
  2. Paramètres de session
    1. Réglez "pression d'occlusion maximale" à 250mmHg.
    2. Réglez "Temps déflation" à 20 secondes pour les souris, 15 secondes pour les rats.
    3. Réglez «Volume minimum" à 15ul.
    4. Réglez "Style d'affichage" pour un canal par le graphique.
    5. Ajouter d'autres chercheurs et techniciens et cliquez sur "Suivant".
  3. Script de session
    1. Lisez le script de session et cliquez sur "Suivant".
    2. Ne pas sélectionner Terminer jusqu'à ce que vous remplir la section Préparation des animaux.
Préparation des animaux
1. Mise en place des animaux
  1. Titulaire d'animaux
    1. Pour former et améliorer l'acclimatation des animaux, ajouter des cycles supplémentaires à votre expérience et exécuter le test pendant cinq jours consécutifs. Vous pouvez également aider à l'acclimatation en plaçant l'animal dans le support pendant 15 minutes pendant 3 jours consécutifs avant l'étude réelle.
    2. Placer chaque animal dans un support en ramassant l'animal par la queue et plaçant délicatement l'animal dans l'arrière de la porte qui fait face à l'extrémité ouverte du cône de nez. Note: la taille de l'animal par rapport à la taille du support sélectionné. L'animal doit être en mesure d'entrer librement sur le support.
    3. Soigneusement sécuriser le hayon arrière au titulaire en tournant le bouchon à vis rouge sur le hayon arrière. Des précautions doivent être prises pour éviter de pincer la queue ou de toute autre partie du corps tout en sécurisant le hayon arrière.
    4. Glissez le cône de nez vers le hayon arrière, limitant le mouvement de l'animal. Le cône de nez devrait être en mesure de limiter l'animal de se retourner tout l'intérieur du support.
    5. Placez le support sur la plateforme du réchauffement de la position désignée. Si les tests du même groupe d'animaux sur une période de temps, assurez-vous de tourner la position de titulaire sur la plateforme réchauffement d'améliorer la cohérence et la précision de vos mesures de pression artérielle. Laisser l'animal au moins 5 minutes pour s'acclimater à son titulaire.
    6. Ne pas toucher ou manipuler l'animal tandis que l'intérieur du support. La multiplication des contacts pourraient irriter l'animal.
    7. Ne jamais laisser l'animal dans la détenteurs sans surveillance.
  2. Placement manchette
    1. Fixez le "Tuyau d'occlusion du brassard" dans l'encoche à l'arrière haut de la porte.
    2. Discussion de la queue à travers la "manchette VPR», le plaçant au sein de 2mm de la "manchette d'occlusion».
    3. Fixez le "Tube Cuff VPR» dans l'encoche à l'arrière haut de la porte.
    4. Attacher les poignets au contrôleur CODA.
  3. Température des animaux
    1. Laisser l'animal au moins 5 minutes de thermorégulation.
    2. Enregistrer la température de l'animal fréquemment avec un thermomètre infrarouge. La température des animaux doit être de 32 à 35 ° C.
Expérience
1. Commencez l'expérience
  1. Cliquez sur «Finish» et l'expérience va commencer immédiatement.
2. Expérience Fin
  1. Des animaux
    1. Immédiatement enlever l'animal de les poignets et titulaire.
    2. Retour à l'animal de leur cage après le «Rapport sommaire de la session Simple" est affiché.
  2. Collecte des données
    1. Après l'achèvement du dernier cycle des cycles acceptés seront automatiquement affichées sous forme de tableur dans l'application CODA, cliquez sur "Exporter vers Excel" bouton.
    2. Sélectionnez le dossier à placer le fichier dans, le nom du fichier et cliquez sur "Enregistrer".
    3. Ouvrez l'application Excel et cliquez sur «Ouvrir».
    4. Voir tous les types de fichiers à afficher le ". Csv sauvé", cliquez sur le fichier.
  3. Traitement des données
    1. Il ya plusieurs façons de traiter les données dans le fichier Excel. Une pratique courante est d'obtenir l'écart moyen et standard.
    2. Supprimer les mesures si l'écart type est supérieur à 30.
    3. En outre, les cycles de rejet peut être consulté et toute la base peuvent être facilement exportées vers Excel. Consultez le manuel d'utilisation pour des informations supplémentaires.