Biology

Medición de la presión arterial en ratones con registro del volumen de presión, un método de la cola del manguito

Published: May 15, 2009 doi: 10.3791/1291

Alan Daugherty¹, Debra Rateri¹, Lu Hong¹, Anju Balakrishnan¹

¹Cardiovascular Research Center, University of Kentucky

Summary

El CODA de 8 canales de alto rendimiento sistema no invasivo de presión arterial mide la presión arterial hasta en 8 ratones o ratas de forma simultánea. Este sistema utiliza la cola del manguito de registro del volumen de presión (VPR) para medir la presión arterial mediante la determinación del volumen de sangre cola.

Abstract

El CODA de 8 canales de alto rendimiento sistema no invasivo de presión arterial mide la presión arterial hasta en 8 ratones o ratas de forma simultánea. El CODA cola del manguito sistema utiliza registro del volumen de presión (VPR) para medir la presión arterial mediante la determinación del volumen de sangre cola. Un diferencial especialmente diseñado transductor de presión y una oclusión cola del manguito medir el volumen total de sangre en la cola, sin la necesidad de obtener la señal de pulso individual. Especial atención se brinda a la longitud del manguito de oclusión a fin de obtener las lecturas de presión sanguínea más precisa. VPR pueden obtener lecturas de piel oscura los roedores, como ratones C57BL6 y es compatible con MRI. El sistema CODA proporciona mediciones de seis (6) diferentes parámetros de la presión arterial, presión arterial sistólica y diastólica, frecuencia cardíaca, presión arterial media, el flujo de sangre cola, la cola y el volumen sanguíneo. Las mediciones se pueden realizar en cualquiera de los ratones despiertos o anestesiados o ratas. El sistema incluye un controlador de CODA, un ordenador portátil, el software, los puños, los titulares de los animales, las almohadillas de infrarrojos calentamiento, y un termómetro de infrarrojos. Hay siete tamaños diferentes titular de los ratones tan pequeños como de 8 gramos de ratas tan grandes como 900 gramos.

Protocol

Instalación del equipo
1. Selecciona un área en el laboratorio donde la temperatura ambiente es igual o superior a 20 ° C.
2. Evite los lugares cerca de los respiraderos de aire acondicionado y / o un fuerte ruido.
3. Evite la exposición del animal a los olores que pueden causar irritación y / o el estrés, tales como perfumes, colonias, productos químicos, y productos de limpieza.
4. Encienda el controlador de CODA.
5. A su vez en la plataforma de calentamiento y se puso a nivel 3. Si la temperatura ambiente es superior a 25 º C, empieza en los niveles 1 o 2.
6. Prueba de diagnóstico de controlador de
  1. Abra el software de CODA.
  2. Seleccione el dispositivo de CODA haciendo clic en él.
  3. Haga clic en "dispositivo de prueba seleccionado".
  4. Seleccione los puños y los canales para poner a prueba y haga clic en "Test".
  5. Después de la prueba se haya completado, cierre la ventana de prueba de dispositivos.
Software de Configuración
1. Gestión de personal y los animales
  1. Gestión de personal
    1. Seleccione Herramientas> Administrar personal.
    2. Haga clic en "Investigador 1" para cambiar el nombre.
    3. Haga clic en las filas posteriores de añadir nuevos investigadores.
    4. Haga clic en la pestaña "técnicos" para modificar o agregar los técnicos.
    5. Haga clic en la pestaña "muestras" para el nombre del animal para facilitar su identificación y para seleccionar el tipo de animal, la rata o el ratón.
    6. Haga clic en la pestaña "animales" para modificar el tipo de animal y la sensibilidad.
2. Nuevo experimento
  1. Seleccione Archivo> Nuevo Experimento>
  2. Comenzar un nuevo experimento
    1. Escriba el nombre del experimento.
    2. Seleccione el investigador clave.
    3. Seleccione una fecha de inicio y haga clic en "Siguiente".
  3. Información básica de sesión
    1. Escriba el nombre de sesión
    2. Establecer "ciclos de aclimatación" a 5. Si prefiere no incluir los ciclos de aclimatación, a cero. Para ayudar a aclimatar al animal a la titular y en los puños, añadir ciclos adicionales a su experimento y ejecutar el experimento durante 5 días consecutivos.
    3. Ajuste "Número de Sets" a 1.
    4. Conjunto "El tiempo entre grupos" a 30 segundos para los sistemas múltiples
    5. Establecer "ciclos por Set" a 20 ciclos.
    6. Conjunto "El tiempo entre los ciclos" a 5 segundos y haga clic en "Siguiente".
3. SELECCIÓN DE LA MUESTRA
  1. 1. Seleccionar la muestra de la piscina de la muestra y la asigna a la primer canal disponible y haga clic en "Siguiente".
  2. Parámetros de la sesión
    1. Establecer "la presión de oclusión máxima" a 250mmHg.
    2. Set "Tiempo deflación" a 20 segundos para los ratones, 15 segundos para las ratas.
    3. Set "Volumen mínimo" a 15ul.
    4. Set "Estilo de visualización" para un canal por el gráfico.
    5. Añadir investigadores y técnicos adicionales y haga clic en "Siguiente".
  3. Sesión de secuencias de comandos
    1. Revisar la secuencia de comandos de sesión y haga clic en "Siguiente".
    2. No seleccione Finalizar hasta que se complete la sección Preparación del animal.
Preparación de los animales
1. Animal Set-up
  1. Animal titular
    1. Para entrenar y mejorar la aclimatación de los animales, añadir ciclos adicionales a su experimento y ejecutar el experimento durante cinco días consecutivos. También puede ayudar con la aclimatación se coloca el animal en el soporte por 15 minutos durante 3 días consecutivos antes del estudio actual.
    2. Lugar de cada animal en un soporte al recoger el animal por la cola y con cuidado colocar al animal en la parte trasera del titular que se enfrenta el extremo abierto de la ojiva. Nota: el tamaño del animal en relación con el tamaño del titular seleccionado. El animal debe ser capaz de entrar libremente en el titular.
    3. Con cuidado, seguro la puerta trasera al titular girando el tapón de rosca roja en la puerta trasera. Se debe tener cuidado de evitar pellizcar la cola o en cualquier otra parte del cuerpo garantizando al mismo tiempo la puerta trasera.
    4. Deslice el cono de la nariz hacia la puerta trasera, lo que limita el movimiento de los animales. El cono de la nariz debe estar en condiciones de limitar el animal darse vuelta, mientras que en el interior del soporte.
    5. Coloque el soporte a la plataforma de calentamiento en la posición designada. Si la prueba el mismo grupo de animales durante un período de tiempo, asegúrese de rotar la posición de titular en la plataforma de calentamiento para mejorar la consistencia y precisión de sus mediciones de la PA. Permitir que el animal por lo menos 5 minutos para aclimatarse a la titular.
    6. No tocar o manipular el animal, mientras que en el interior del soporte. El mayor contacto podría irritar al animal.
    7. Nunca deje a los animales en los titulares de vigilancia.
  2. Colocación del manguito
    1. Asegurar el "Tubo de oclusión del manguito" en la muesca en la parte posterior superior del soporte.
    2. Tema de la cola a través de los "Gemelos VPR", colocándolo dentro de 2 mm de la "manguito de oclusión".
    3. Asegurar el "Tubo de VPR espontáneas" en la muesca en la parte posterior superior del soporte.
    4. Coloque los puños al controlador de CODA.
  3. Animal de temperatura
    1. Permitir que el animal por lo menos 5 minutos para regular la temperatura.
    2. Registrar la temperatura del animal con frecuencia con un termómetro infrarrojo. La temperatura de los animales debe ser de 32 a 35 ° C.
Experimento
1. Comience Experimento
  1. Haga clic en "Finalizar" y el experimento se iniciará de inmediato.
2. Final Experiment
  1. Animal
    1. Quitarse de inmediato al animal de los puños y el soporte.
    2. Devolver el animal a su jaula después de que el "Informe simple resumen de la sesión" en la pantalla.
  2. Recopilación de datos
    1. Después de completar el último ciclo los ciclos aceptados se mostrarán automáticamente en formato de hoja de cálculo dentro de la aplicación CODA, haga clic en "Exportar a Excel" botón.
    2. Seleccione la carpeta para colocar el archivo, el nombre del archivo y haga clic en "Guardar".
    3. Abra la aplicación Excel y haga clic en "Abrir".
    4. Ver todos los tipos de archivo para mostrar la ". Csv salvo", haga clic en el archivo.
  3. Procesamiento de Datos
    1. Hay varias maneras de procesar los datos en el archivo de Excel. Una práctica común es para obtener el promedio y desviación estándar.
    2. Eliminar las medidas si la desviación estándar es mayor que 30.
    3. Además, los ciclos rechazado puede ser visto y la base de datos puede ser fácilmente exportado a Excel. Consulte el manual del usuario para obtener información adicional.