Biology

볼륨 압력 녹음, 꼬리 즉석 방법을 사용하여 마우스의 측정 혈압

Published: May 15, 2009 doi: 10.3791/1291

Alan Daugherty¹, Debra Rateri¹, Lu Hong¹, Anju Balakrishnan¹

¹Cardiovascular Research Center, University of Kentucky

Summary

코다 8 채널 높은 처리량 비침습 혈압 시스템은 동시에 8 쥐 또는 쥐에 혈압을 측정합니다. 이 꼬리 즉석 시스템은 꼬리 혈액 볼륨을 결정하여 혈압을 측정하는 볼륨 압력 녹음 (VPR)를 사용합니다.

Abstract

코다 8 채널 높은 처리량 비침습 혈압 시스템은 동시에 8 쥐 또는 쥐에 혈압을 측정합니다. 코다 꼬리 즉석 시스템은 꼬리 혈액 볼륨을 결정하여 혈압을 측정하는 볼륨 압력 녹음 (VPR)를 사용합니다. 개별 펄스 신호를 얻기 위해 필요없이 특별히 고안된 차동 압력 변환기 및 폐색 꼬리 즉석 측정 꼬리의 총 혈액 볼륨. 특별한주의는 가장 정확한 혈압 수치를 도출하기 위해 폐색의 즉석의 길이에 여유입니다. VPR 쉽게 같은 C57BL6 생쥐로 어두운 피부 설치류에 판독을 구하고 호환 MRI입니다 수 있습니다. 코다 시스템은 여섯 (6) 다른 혈압 파라미터 측정을 제공, 수축기 및 diastolic 혈압, 심장 박동은, 혈압, 꼬리 혈액 흐름, 그리고 꼬리 혈액 볼륨을 의미합니다. 성능은 깨어 또는 anesthetized 마우스 또는 쥐 중 하나를 만들 수 있습니다. 코다 시스템은 컨트롤러, 노트북 컴퓨터, 소프트웨어, 수갑, 동물 소유자, 적외선 온난 패드, 그리고 적외선 온도계를 포함합니다. 900g 크기로 쥐에 8g만큼 작은 생쥐를위한 7 개의 홀더 크기가 있습니다.

Protocol

설정 장비
1. 실내 온도가 ° C.에서 20 위에 실험실에서 영역을 선택
2. 에어컨 통풍구 및 / 또는 큰 소음이 근처에 위치를 피하십시오.
3. 같은 향수, 향수, 화학, 그리고 클리너로 자극 및 / 또는 스트레스의 원인이 될 수 있습니다 악취로 동물을 노출하지 마십시오.
4. 코다 컨트롤러를 켭니다.
5. 온난화 플랫폼의 전원을 켜고 레벨 3으로 설정합니다. 실내 온도가 25 이상이면 ° C는 레벨 1 또는 2에서 시작합니다.
6. 컨트롤러 진단 테스트
  1. 코다 소프트웨어를 엽니다.
  2. 그것을 클릭하여 코다 장치를 선택합니다.
  3. "테스트 선택한 장치"를 클릭하십시오.
  4. "테스트"를 테스트하고를 클릭 수갑 및 채널을 선택합니다.
  5. 테스트가 완료되면, 장치 테스트 창을 닫습니다.
설정 소프트웨어
1. 인사 및 동물 관리
  1. 인사 관리
    1. 선택 도구> 인사 관리.
    2. 이름을 변경하려면 "연구원 1"을 클릭하십시오.
    3. 추가 연구를 추가하는 후속 행을 클릭합니다.
    4. 기술자를 수정하거나 추가하려면 "기술자 탭"을 클릭합니다.
    5. 쥐가 드나 마우스, 쉽게 식별이 동물의 이름과 동물의 유형을 선택하려면 "표본 탭"을 클릭합니다.
    6. 동물 종류와 감도를 변경하려면 "동물 탭"을 클릭합니다.
2. 새 실험
  1. 파일> 새로 작성> 실험을 선택
  2. 새 실험을 시작
    1. 실험 이름을 입력합니다.
    2. 주요 연구원을 선택합니다.
    3. 시작 날짜를 선택하고 "다음"을 클릭합니다.
  3. 기본 세션 정보
    1. 세션 이름을 입력
    2. 5 "Acclimation주기"를 설정합니다. 당신은 0으로 설정 acclimation 사이클을 포함하지 않도록 설정하는 경우. , 홀더와 수갑으로 동물을 acclimating 도와 실험에 추가 사이클을 추가 5 연속 일 동안 실험을 실행합니다.
    3. 1 "설정 번호"를 설정합니다.
    4. 여러 집합에 대한 30 초 "설정 사이의 시간"을 설정
    5. 20주기 위해 "설정 당 사이클"을 설정합니다.
    6. 오초에 "사이클 사이의 시간"을 설정하고 "다음"을 클릭합니다.
3. 표본 선택
  1. 1. 표본 수영장에서 표본을 선택하고 사용 가능한 첫 번째 채널을 지정하고 "다음"을 클릭하십시오.
  2. 세션 매개 변수
    1. 250mmHg에 "최대 폐색 압력"을 설정합니다.
    2. 마우스, 쥐 때까지 15 초 20 초 '디플레이션 시간 "을 설정합니다.
    3. 15ul에 "최소 볼륨"을 설정합니다.
    4. 그래프 당 하나의 채널에 "표시 스타일"을 설정합니다.
    5. 추가 연구자와 기술자를 추가하고 "다음"을 클릭하십시오.
  3. 세션 스크립트
    1. 세션 스크립트를 검토하고 "다음"을 클릭하십시오.
    2. 당신은 동물 준비 섹션을 완료할 때까지 마침을 선택하지 마십시오.
동물 준비
1. 설정 동물
  1. 동물 홀더
    1. 기차와 동물 acclimation을 향상 시키며, 실험에 추가 사이클을 추가하고 다섯 경기를 연속 일 동안 실험을 실행합니다. 당신은 또한 실제 공부하기 전에 연속 3 일간 15 분 홀더에 동물을 배치하여 acclimation와 도움을 줄 수 있습니다.
    2. 꼬리로 동물을 데리러 부드럽게 코 콘의 열린 끝을 얼굴 홀더의 뒷면에 동물을 배치하여 보유자의 각 동물을 놓으십시오. 참고 : 선택한 홀더의 크기와 관련하여 동물의 크기. 동물 자유롭게 홀더를 입력하실 수 있습니다.
    3. 조심스럽게 뒷문에있는 빨간 나사 뚜껑을 설정하여 소유자에게 뒷문을 확보. 주의가 뒷문을 확보하면서 꼬리 또는 기타 신체 부분을 곤란하게하지 않도록 주의해야한다.
    4. 동물의 움직임을 제한, 뒷문쪽으로 코 콘 슬라이드. 코 콘은 홀더 내부 동안 주변을 공전의 동물을 제한하는 위치에 있어야합니다.
    5. 지정된 위치에 온난 화 플랫폼에 홀더를 놓으십시오. 일정 기간 동안 동물의 동일한 그룹을 테스트하는 경우 BP 측정의 일관성 및 정확도를 향상시키기 위해 온난 화 플랫폼 홀더의 위치를 회전해야합니다. 적어도 5 분 자에 적응하기 위해 동물을 허용합니다.
    6. 동물을 만지거나 처리하지 마십시오 자 안에있는 동안. 증가 연락처는 동물을 짜증나게 수 있습니다.
    7. 무인 홀더에있는 동물을 두지 마십시오.
  2. 커프 위치
    1. 홀더의 맨 뒤쪽에있는 노치에있는 "폐색의 커프 튜브"를 고정합니다.
    2. "폐색 커프 '의 2mm 이내에 그것을 배치,"VPR 커프'를 통해 꼬리를 스레드.
    3. 홀더의 맨 뒤쪽에있는 노치에있는 "VPR의 커프 튜브"를 고정합니다.
    4. 코다 컨트롤러에 수갑을 연결합니다.
  3. 동물 온도
    1. 적어도 5 분 thermoregulate에 동물을 허용합니다.
    2. 적외선 온도계와 함께 자주 동물의 온도를 기록합니다. 동물 온도 32 35 ° C.되어야합니다
실험
1. 실험 시작
  1. "Finish"를 클릭하고 실험 즉시 시작됩니다.
2. 최종 실험
  1. 동물
    1. 즉시 수갑과 홀더에서 동물을 제거합니다.
    2. "간단한 세션 요약 보고서"가 표시되면 해당 창구로 동물을 반환합니다.
  2. 데이터 수집
    1. 허용주기가 자동으로 코다 응용 프로그램 내에서 스프레드 시트 형식으로 표시됩니다 마지막주기의 완료 후, "Excel로 내보내기"버튼을 클릭하십시오.
    2. 에서 파일을 폴더를 선택하고 파일 이름을 지정하고 "저장"을 클릭하십시오.
    3. 엑셀 응용 프로그램을 열고 "열기"를 클릭하십시오.
    4. ". csv 파일 저장"을 표시하는 모든 파일 형식을보기 파일을 클릭합니다.
  3. 데이터 처리
    1. 엑셀 파일 내의 데이터를 처리하는 방법에는 여러 가지가 있습니다. 일반적인 연습은 평균 및 표준 편차를 얻을 수 있습니다.
    2. 표준 편차가 30보다 큰 경우에는 측정을 삭제합니다.
    3. 또한, 거부 사이클을 볼 수 있으며 전체 데이터베이스를 쉽게 Excel로 내보낼 수 있습니다. 자세한 내용은 사용자 설명서를 참조하십시오.