Biology

Mätning av blodtryck hos möss med Inspelningsvolym Pressure, en Tail-manschetten metod

Published: May 15, 2009 doi: 10.3791/1291

Alan Daugherty¹, Debra Rateri¹, Lu Hong¹, Anju Balakrishnan¹

¹Cardiovascular Research Center, University of Kentucky

Summary

Den CODA 8-kanaligt High Throughput Icke-invasivt blodtryck systemet mäter blodtrycket i upp till 8 möss eller råttor samtidigt. Denna svans-manschetten system använder Inspelningsvolym Tryck (VPR) för att mäta blodtrycket genom att bestämma volymen svansen blod.

Abstract

Den CODA 8-kanaligt High Throughput Icke-invasivt blodtryck systemet mäter blodtrycket i upp till 8 möss eller råttor samtidigt. Den CODA tail-manschetten system använder Inspelningsvolym Tryck (VPR) för att mäta blodtrycket genom att bestämma volymen svansen blod. En specialdesignad Differentialtryckgivaren och en ocklusion tail-manschetten mäta den totala blodvolymen i svansen utan att behöva få den individuella pulssignal. Särskild uppmärksamhet ges för längden på ocklusion manschetten för att få fram den mest exakta blodtrycksmätningar. VPR kan lätt få mätvärden på mörkhyade gnagare, såsom C57BL6 möss och är MR-kompatibel. Det CODA-systemet ger dig mätningar av sex (6) olika blodtryck parametrar; systoliskt och diastoliskt blodtryck, hjärtfrekvens, menar blodtryck, svans blodflöde, och svans blodvolym. Mätningar kan göras på antingen vakna eller sövda möss eller råttor. Det CODA systemet ingår en styrenhet, bärbar dator, programvara, manschetter, innehavare djur, infraröd kuddar uppvärmningen och en infraröd termometer. Det finns sju olika hållare storlekar för möss så små som 8 gram till råttor så stor som 900 gram.

Protocol

Utrustning Set-up
1. Välj ett område i labbet där rumstemperaturen ligger på eller över 20 ° C.
2. Undvik platser nära ventiler luftkonditionering och / eller kraftigt buller.
3. Undvik att utsätta djuret för lukter som kan orsaka irritation och / eller stress, såsom parfym, cologne, kemikalier och rengöringsmedel.
4. Slå på CODA Controller.
5. Slå på uppvärmningen Platform och inställd på nivå 3. Om rumstemperaturen är över 25 ° C, startar på nivå 1 eller 2.
6. Controller diagnostiktest
  1. Öppna CODA programvara.
  2. Välj CODA enheten genom att klicka på den.
  3. Klicka på "Testa valda enhet".
  4. Välj manschetter och kanaler för att testa och klicka på "Test".
  5. När testet är klart, stäng fönstret Device Test.
Programvara Set-up
1. Hantera Personal och Djur
  1. Hantera personal
    1. Välj Verktyg> Hantera personal.
    2. Klicka på "forskare 1" för att ändra namnet.
    3. Klicka på efterföljande rader att lägga till ytterligare forskare.
    4. Klicka på "Tekniker Tab" för att ändra eller lägga till tekniker.
    5. Klicka på "Prover Tab" för att nämna djuret för enkel identifiering och för att välja djurslag, råtta eller mus.
    6. Klicka på "Djur Tab" för att ändra djurslag och känslighet.
2. Nytt experiment
  1. Välj Arkiv> Nytt> Experiment
  2. Börja ett nytt experiment
    1. Skriv in namn på experimentet.
    2. Välj nyckel Forskare.
    3. Välj ett Startdatum och klicka på "Nästa".
  3. Grundläggande Session Info
    1. Skriv in Sessionsnamn
    2. Ställ in "Acklimatisering Cycles" till 5. Om du föredrar att inte inkludera acklimatisering cykler, satt till noll. Att hjälpa till med acclimating djuret till innehavaren och manschetter, lägga till ytterligare cykler för att experimentet och köra experimentet i 5 dagar i följd.
    3. Ställ in "Antal Set" till 1.
    4. Ställ in "Tid mellan set" till 30 sekunder för flera uppsättningar
    5. Ställ in "Cycles per set" till 20 cykler.
    6. Ställ in "gång mellan omgångarna" till 5 sekunder och klicka på "Nästa".
3. Prov Urval
  1. 1. Välj provet från provet poolen och koppla den till den första tillgängliga kanalen och klicka på "Nästa".
  2. Session Parametrar
    1. Ställ in "Maximum Ocklusion Pressure" för att 250mmHg.
    2. Ställ in "Deflation Time" till 20 sekunder för möss, 15 sekunder för råttor.
    3. Ställ in "minsta volym" för att 15ul.
    4. Ställ in "Display Style" till en kanal per diagram.
    5. Lägg till ytterligare forskare och tekniker och klicka på "Nästa".
  3. Session Script
    1. Granska Session Script och klicka på "Nästa".
    2. Välj inte avslutas förrän du är klar med avsnittet Animal förberedelse.
Animal Förberedelser
1. Animal Set-up
  1. Animal Hållare
    1. Att träna och förbättra djurens acklimatisering, lägga till ytterligare cykler för att experimentet och köra experimentet under fem dagar. Du kan också hjälpa till med acklimatisering genom att placera djuret i hållaren i 15 minuter 3 dagar i följd före den verkliga studien.
    2. Placera varje djur i en hållare genom att plocka upp djuret i svansen och försiktigt placera djuret i den bakre delen av hållaren som vetter mot öppna änden av noskonen. Notera: storleken på djuret i förhållande till storleken på den valda hållaren. Djuret ska fritt kunna komma in i hållaren.
    3. Försiktigt fast de bakre luckan till innehavaren genom att vrida den röda skruvlock på den bakre luckan. Försiktighet bör iakttas för att undvika klämma svansen eller andra kroppsdelar samtidigt som den bakre luckan.
    4. Skjut noskon mot bakluckan, vilket begränsar förflyttning av djur. Den noskon bör vara i stånd att begränsa djuret från att vända samtidigt inne i hållaren.
    5. Placera hållaren på uppvärmningen plattform i den angivna positionen. Om test samma grupp av djur över en viss tidsperiod, se till att rotera innehavaren position på uppvärmningen plattform för att förbättra konsekvens och exakthet i din BP mätningar. Låt djuret minst 5-minuter att acklimatisera sig till innehavaren.
    6. Rör inte eller hantera djuret samtidigt inne i hållaren. Den ökade kontakten kan irritera djuret.
    7. Lämna aldrig djuret i hållarna utan uppsikt.
  2. Manschett Placering
    1. Säkra "Slangar Ocklusion Cuff" i skåran på toppen baksidan av hållaren.
    2. Trä svansen genom "VPR Manschett", placera den i 2mm av "Ocklusion Cuff".
    3. Säkra "VPR manschettslangen" i skåran på toppen baksidan av hållaren.
    4. Fäst manschetter till CODA Controller.
  3. Animal Temperatur
    1. Låt djuret minst 5-minuter att thermoregulate.
    2. Spela in temperaturen på djuret ofta med en infraröd termometer. Djuret temperatur bör vara 32 till 35 ° C.
Experiment
1. Börja Experiment
  1. Klicka på "Slutför" och försöket kommer att inledas omgående.
2. Avsluta Experiment
  1. Animal
    1. Omedelbart ta bort djuret från muddar och hållaren.
    2. Tillbaka djuret till sin bur efter "Simple Session sammanfattande rapport" visas.
  2. Datainsamling
    1. Efter slutförandet av den sista cykeln de accepterade cykler kommer automatiskt att visas i kalkylbladsformat inom CODA ansökan, klicka på "Exportera till Excel"-knappen.
    2. Välj mapp att placera filen i, namnet på filen och klicka på "Spara".
    3. Öppna Excel-programmet och klicka på "Öppna".
    4. Visa alla filtyper för att visa ". Csv-filen sparas", klicka på filen.
  3. Data Processing
    1. Det finns flera sätt att behandla uppgifterna i Excel-filen. En vanlig praxis är att få den genomsnittliga och standardavvikelse.
    2. Ta bort mätningar om standardavvikelsen är större än 30.
    3. Dessutom kan avvisas cykler ses och hela databasen kan enkelt exporteras till Excel. Konsultera användarhandboken för ytterligare information.